核酸合成專題知識(shí)講座

核酸合成專題知識(shí)講座核酸合成專題知識(shí)講座第1頁遺傳信息傳遞中心法則

蛋白質(zhì)翻譯轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制復(fù)制DNARNA

中心法則總結(jié)了生物體內(nèi)遺傳信息流動(dòng)規(guī)律，揭示遺傳分子基礎(chǔ)，不但使大家對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、遺傳、變異等生命現(xiàn)象有了更深刻認(rèn)識(shí)，而且以這方面理論和技術(shù)為基礎(chǔ)發(fā)展了基因工程，給人類生產(chǎn)和生活帶來了深刻革命。核酸合成專題知識(shí)講座第2頁目錄第四節(jié)基因工程及分子生物學(xué)技術(shù)介紹第一節(jié)DNA生物合成第二節(jié)RNA生物合成第三節(jié)核酸合成抑制劑核酸合成專題知識(shí)講座第3頁第一節(jié)DNA生物合成

一、DNA復(fù)制（DNA指導(dǎo)下DNA合成）三、DNA突變四、DNA損傷與修復(fù)二、逆轉(zhuǎn)錄作用（RNA指導(dǎo)下DNA合成）核酸合成專題知識(shí)講座第4頁一、DNA半保留復(fù)制

1、概念和試驗(yàn)依據(jù)

2、原核生物DNA聚合反應(yīng)相關(guān)酶類

3、原核細(xì)胞DNA復(fù)制起始點(diǎn)和方式5、DNA復(fù)制忠實(shí)性6、真核細(xì)胞DNA復(fù)制

4、原核細(xì)胞DNA復(fù)制過程（半不連續(xù)復(fù)制）核酸合成專題知識(shí)講座第5頁DNA半保留復(fù)制概念

DNA在復(fù)制時(shí)，兩條鏈解開分別作為模板，在DNA聚合酶催化下按堿基互補(bǔ)標(biāo)準(zhǔn)合成兩條與模板鏈互補(bǔ)新鏈，以組成新DNA分子。這么新形成兩個(gè)DNA分子與親代DNA分子堿基次序完全一樣。因?yàn)樽哟鶧NA分子中一條鏈來自親代，另一條鏈?zhǔn)切潞铣?，這種復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制。

核酸合成專題知識(shí)講座第6頁DNA半保留復(fù)制試驗(yàn)依據(jù)

1958年Meselson&stahl用同位素示蹤標(biāo)識(shí)加密度梯度離心技術(shù)試驗(yàn),證實(shí)了DNA是采取半保留方式進(jìn)行復(fù)制.[15N]DNA[14N-15N]DNA[14N]DNA[14N-15N]DNA核酸合成專題知識(shí)講座第7頁二、DNA復(fù)制起始點(diǎn)和方向起始點(diǎn)含100－200pb，能被特殊蛋白質(zhì)識(shí)別。復(fù)制方向有單方向和雙方向。通常細(xì)菌、病毒、線粒體DNA分子，只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，復(fù)制時(shí)一個(gè)DNA是以一個(gè)復(fù)制單位（復(fù)制子）完成復(fù)制。真核細(xì)胞一個(gè)DNA分子上有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，雙向復(fù)制，也就是說一個(gè)DNA分子上有多個(gè)復(fù)制單位。核酸合成專題知識(shí)講座第8頁大腸桿菌復(fù)制起點(diǎn)成串排列重復(fù)序列

GATCTNTTNTTT成串排列三個(gè)13bp序列共有序列共有序列TTATCCACA

DnaA蛋白結(jié)合位點(diǎn)四個(gè)9bp序列DnaADnaB(解螺旋酶)SSB大腸桿菌DNA復(fù)制起點(diǎn)在起始階段結(jié)構(gòu)模型起始核酸合成專題知識(shí)講座第9頁DNA復(fù)制方向環(huán)狀

DNA復(fù)制時(shí)所形成θ結(jié)構(gòu)起始點(diǎn)復(fù)制叉推進(jìn)復(fù)制叉起始點(diǎn)起始點(diǎn)起始點(diǎn)復(fù)制叉復(fù)制叉未復(fù)制DNA單向復(fù)制雙向復(fù)制核酸合成專題知識(shí)講座第10頁原核生物DNA聚合反應(yīng)相關(guān)酶類

（1）DNA聚合酶(DNApolymetases)（2）引物酶(peimase)和引發(fā)體(primosome)：開啟RNA引物鏈合成。

(3）DNA連接酶（DNAligase）

(4)解鏈酶(DNAhelicase):水解ATP，使DNA雙鏈打開。解旋酶DNA聚合酶III解鏈酶RNA引物引物酶和引發(fā)體DNA聚合酶ISSB3′3′5′3′5′5′RNA引物核酸合成專題知識(shí)講座第11頁

(5）單鏈結(jié)合蛋白(single-strandbindingprotein,SSB)：結(jié)合在解開DNA單鏈上，預(yù)防重新形成雙螺旋。

(6）拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase):兼具內(nèi)切酶和連接酶活力，能快速將DNA超螺旋或雙螺旋擔(dān)心狀態(tài)變成松馳狀態(tài)，便于解鏈。

拓?fù)洚悩?gòu)酶I:使雙鏈DNA中一條鏈斷裂，降低負(fù)超螺旋

拓?fù)洚悩?gòu)酶II:使雙鏈DNA中兩條鏈斷裂，引入負(fù)超螺旋核酸合成專題知識(shí)講座第12頁大腸桿菌三種DNA聚合酶比較DNA聚合酶Ⅱ分子量每個(gè)細(xì)胞分子統(tǒng)計(jì)數(shù)5′-3′聚合酶作用3′-5′核酸外切酶作用5′-3′核酸外切酶作用活性（370C每個(gè)酶分子每分鐘聚合核苷酸數(shù)）主要功效DNA聚合酶ⅠDNA聚合酶Ⅲ（復(fù)合物）109，000400+++600切除引物補(bǔ)缺\校正120，000100++-30校正400，00010-20+++9000聚合比較項(xiàng)目核酸合成專題知識(shí)講座第13頁DNA聚合酶Ⅲ全酶關(guān)鍵酶PolIIIPolIII延長(zhǎng)因子識(shí)別引物并使DNA與引物結(jié)合DNA聚合酶Ⅲ二聚體聚合校正核酸合成專題知識(shí)講座第14頁DNA聚合酶催化鏈延長(zhǎng)反應(yīng)3′5′模板鏈5′RNA引物子鏈3′3′5′5′3′3′5′5′3′核酸合成專題知識(shí)講座第15頁DNA聚合酶3-5

外切酶水解位點(diǎn)3′3′5′5′錯(cuò)配堿基3′-5′核酸外切酶水解位點(diǎn)核酸合成專題知識(shí)講座第16頁DNA聚合酶校對(duì)功效

5′-核酸外切酶3′-核酸外切酶裂縫聚合中心裂縫內(nèi)部核酸合成專題知識(shí)講座第17頁DNA聚合酶校對(duì)功效聚合酶錯(cuò)配鹼基復(fù)制方向正確核苷酸5′5′5′3′3′3′切除錯(cuò)配核苷酸核酸合成專題知識(shí)講座第18頁核酸合成專題知識(shí)講座第19頁原核細(xì)胞DNA半不連續(xù)復(fù)制復(fù)制過程

復(fù)制叉移動(dòng)方向解旋酶DNA聚合酶III解鏈酶RNA引物引物體DNA聚合酶ISSB3′3′5′前導(dǎo)鏈隨即鏈3′5′復(fù)制起始DNA鏈合成與延長(zhǎng)DNA鏈合成終止5′RNA引物3′3′DNA連接酶核酸合成專題知識(shí)講座第20頁復(fù)制叉處前導(dǎo)鏈和隨即鏈同時(shí)合成工作模型聚合酶III全酶引物聚合酶III全酶引物引物體引物體解旋酶解旋酶核酸合成專題知識(shí)講座第21頁連接酶連接切口Mg2+連接酶ATP或NAD＋PPi或NMNATCGPTTPPPAACCTGAPACPPPPOHTGGATCGPTTPPPAACCTGAPACPPPTGGP缺口3'3'5'5'5'5'3'3'模板鏈模板鏈核酸合成專題知識(shí)講座第22頁復(fù)制忠實(shí)性

DNA復(fù)制過程是一個(gè)高度準(zhǔn)確過程，據(jù)預(yù)計(jì)，大腸桿菌DNA復(fù)制109-1010堿基對(duì)僅出現(xiàn)一個(gè)誤差，確保復(fù)制忠實(shí)性原因主要有以下三點(diǎn):a、DNA聚合酶高度專一性（嚴(yán)格遵照堿基配對(duì)標(biāo)準(zhǔn)）b、DNA聚合酶校對(duì)功效（錯(cuò)配堿基被3’-5’

外切酶切除）c、起始時(shí)以RNA作為引物核酸合成專題知識(shí)講座第23頁起始時(shí)以RNA作為引物作用

DNA復(fù)制為何要合成一個(gè)RNA引物，而后又把這個(gè)引物消除呢？這是確保DNA聚合過程高度準(zhǔn)確又一辦法。已知DNA聚合酶含有35外切酶功效校對(duì)復(fù)制過程中核苷酸，也就是說聚合酶在開始形成一個(gè)新磷酸二酯鍵前，總是檢驗(yàn)前一個(gè)堿基是否正確，這就決定了它不能從頭開始合成。所以先合成一條低忠實(shí)性多核苷酸來開始DNA合成，并以核糖核苷酸來表示是“暫時(shí)”，當(dāng)DNA開始聚合以后再以53外切酶功效切除，以高忠實(shí)性脫氧核苷酸取而代之，確保復(fù)制忠實(shí)性。核酸合成專題知識(shí)講座第24頁真核細(xì)胞DNA復(fù)制特點(diǎn)多個(gè)起點(diǎn)復(fù)制起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)端粒（telemere）復(fù)制DNA聚合酶：最少有5種。α、β、γ、δ、ε核酸合成專題知識(shí)講座第25頁真核生物DNA聚合酶DNA聚合酶分子量亞基數(shù)細(xì)胞內(nèi)分布酶活力百分比外切酶活力功效合成后隨鏈、具引發(fā)酶活性DNA聚合酶165-175，000多個(gè)細(xì)胞核～80%無150，000一個(gè)線粒體2～15%無-400，000二個(gè)細(xì)胞核+10～25%3-5外切酶合成前導(dǎo)鏈具解旋酶活性DNA聚合酶DNA聚合酶43，000一個(gè)細(xì)胞核10～15%無修復(fù)核酸合成專題知識(shí)講座第26頁端粒酶（telomerase）DNA復(fù)制需要引物，但在線形DNA分子末端不可能經(jīng)過正常機(jī)制在引物被降解后合成對(duì)應(yīng)片段.假如沒有特殊機(jī)制合成末端序列，染色體就會(huì)在細(xì)胞傳代中變得越來越短。這一難題是經(jīng)過端粒酶發(fā)覺才得到了澄清，端粒酶是一個(gè)含RNA蛋白復(fù)合物，實(shí)質(zhì)上是一個(gè)逆轉(zhuǎn)錄酶，它能催化互補(bǔ)于RNA模板DNA片段合成，使復(fù)制以后線形DNA分子末端保持不變。

初步研究表明，人體中生殖細(xì)胞端粒長(zhǎng)度保持不變，而體細(xì)胞端粒長(zhǎng)度則隨個(gè)體老化而逐步縮短。對(duì)此一個(gè)推論是：人生殖細(xì)胞具端粒酶活力，體細(xì)胞則否。這一問題處理無疑會(huì)有利于對(duì)生命衰老認(rèn)識(shí)。5′3′AAAACCCCAAAACCCCCCA端粒酶核酸合成專題知識(shí)講座第27頁端粒合成一個(gè)模型3′5′TTTTGGGGTTTTG5′3′AAAACCCCAAAACCCCCCAAA3′5′TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTG5′3′AAAACCCCAAAACCCCCCAAATTGGGTGGGT3′5′AATTTTG5′3′AAAACCCCAAAACCCCCCAGTTTTG整合和雜交移位和再雜交端粒合成完成TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTGGGGTTTT5′3′nAA3′TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTGGGGT5′3′TTCCCCTnAA3′TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTGGGGT5′3′TTAAAACCCCAAAACCCCAAAACCCCTn深入加工繼續(xù)延伸核酸合成專題知識(shí)講座第28頁真核和原核DNA細(xì)胞復(fù)制比較核酸合成專題知識(shí)講座第29頁二、逆轉(zhuǎn)錄作用1、概念2、逆轉(zhuǎn)錄酶3、病毒逆轉(zhuǎn)錄過程4、逆轉(zhuǎn)錄生物學(xué)意義擴(kuò)充了中心法則有利于對(duì)病毒致癌機(jī)制了解與真核細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育相關(guān)逆轉(zhuǎn)錄酶是分子生物學(xué)主要工具酶三種功效依賴DNA指導(dǎo)下DNA聚合酶活力依賴RNADNA聚合酶活力核糖核酸酶H活力

以RNA為模板合成DNA，這與通常轉(zhuǎn)錄過程中遺傳信息從DNA到RNA方向相反，故稱為逆轉(zhuǎn)錄作用。核酸合成專題知識(shí)講座第30頁逆轉(zhuǎn)錄過程中cDNA合成

依賴RNADNA聚合酶核糖核酸酶H活力依賴DNADNA聚合酶核酸合成專題知識(shí)講座第31頁逆逆轉(zhuǎn)錄病毒生活周期

生活周期RNA衣殼被膜逆轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)譯整合入宿主細(xì)胞染色體DNA進(jìn)入細(xì)胞丟失被膜丟失衣殼逆轉(zhuǎn)錄RNARNAcDNA衣殼蛋白被膜蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶核酸合成專題知識(shí)講座第32頁

三、DNA突變

DNA分子中核苷酸序列發(fā)生突然而穩(wěn)定改變，從而造成DNA復(fù)制以及以后轉(zhuǎn)錄和翻譯產(chǎn)物隨之發(fā)生改變，表現(xiàn)出異常遺傳特征，稱為DNA突變。它包含因?yàn)镈NA損傷和錯(cuò)配得不到修復(fù)而引發(fā)突變，以及因?yàn)椴灰粯覦NA分子之間交換而引發(fā)遺傳重組。二、誘變劑作用堿基類似物(baseanalog)

堿基修飾劑(basemodifier)嵌入染料(intercalationdye)

紫外線(ultraviolet)和電離輻射(ionizingradiation)一、突變類型

堿基正確置換(substitution)

移碼突變(framesshiftmutation)核酸合成專題知識(shí)講座第33頁

DNA突變類型

-T-C-G-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-C-G-A-C-A-T-G-C-轉(zhuǎn)換

-T-C-G-A-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-T-C-G-A-C-A-T-G-C-插入A

-T-C-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-G-A-C-A-T-G-C-缺失T野生型基因

-T-C-G-A-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-T-G-A-C-A-T-G-C-

-T-C-G-T-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-A-G-A-C-A-T-G-C-顛換堿基正確置換(substitution)移碼突變(framesshiftmutation)核酸合成專題知識(shí)講座第34頁四、DNA損傷與修復(fù)

一些物理化學(xué)因子，如紫外線、電離輻射和化學(xué)誘變劑等，都有引發(fā)生物突變和致死作用，其機(jī)理是作用于DNA，造成DNA結(jié)構(gòu)和功效破壞，稱為DNA損傷.DNA修復(fù)主要有以下類型:暗修復(fù)（4）誘導(dǎo)修復(fù)（SOS修復(fù)）（1）光裂合酶修復(fù)活（2）切除修復(fù)（3）重組修復(fù)

核酸合成專題知識(shí)講座第35頁DNA紫外線損傷光裂合酶修復(fù)1、形成嘧啶二聚體2、光復(fù)合酶結(jié)合于損傷部位3、酶被可見光激活4、修復(fù)后酶被釋放核酸合成專題知識(shí)講座第36頁DNA損傷和切除修復(fù)堿基丟失堿基缺點(diǎn)或錯(cuò)配結(jié)構(gòu)缺點(diǎn)切開核酸內(nèi)切酶核酸外切酶切除DNA聚合酶DNA連接酶AP核酸內(nèi)切酶核酸外切酶切開切除修復(fù)連接糖苷酶插入酶堿基取代核酸合成專題知識(shí)講座第37頁DNA重組修復(fù)胸腺嘧啶二聚體復(fù)制核酸酶及重組蛋白修復(fù)復(fù)制DNA聚合酶DNA連接酶重組核酸合成專題知識(shí)講座第38頁SOS反應(yīng)機(jī)制靶基因表示lexA靶基因表示但產(chǎn)物被分解recA大量表示RecA促使分解LexA未誘導(dǎo)細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞靶基因lexA基因被LexA

蛋白質(zhì)個(gè)別阻遏recA基因被LexA

蛋白質(zhì)個(gè)別阻遏（40個(gè)不一樣位點(diǎn)被阻遏）LexA(阻遏物)

RecA(輔蛋白酶)單鏈DNAATP核酸合成專題知識(shí)講座第39頁第二節(jié)

RNA生物合成一、DNA指導(dǎo)下RNA合成（轉(zhuǎn)錄）二、RNA指導(dǎo)下RNA合成(RNA復(fù)制)三、RNA和DNA合成比較核酸合成專題知識(shí)講座第40頁一、DNA指導(dǎo)下RNA合成（轉(zhuǎn)錄）1、概念及DNA有義鏈和反義鏈2、RNA聚合酶及催化反應(yīng)3、RNA合成過程4、RNA轉(zhuǎn)錄后加工5、真核生物RNA合成核酸合成專題知識(shí)講座第41頁轉(zhuǎn)錄概念和DNA有義鏈和反義鏈

轉(zhuǎn)錄是在DNA指導(dǎo)下RNA聚合酶催化下，按照鹼基配正確標(biāo)準(zhǔn)，以四種核苷酸為原料合成一條與模板DNA互補(bǔ)RNA

過程。RNA轉(zhuǎn)錄從DNA模板特定位點(diǎn)開始，并在一定位點(diǎn)終止。此轉(zhuǎn)錄區(qū)域?yàn)橐粋€(gè)轉(zhuǎn)錄單位。

開啟子（promoter)

終止子(terminator)模板鏈（templattestrand）反意義鏈(antisensestrand)編碼鏈有意義鏈(sensestrand)非信息區(qū)DNA5′5′3′3′核酸合成專題知識(shí)講座第42頁原核生物開啟子結(jié)構(gòu)（+）鏈有意義鏈編碼鏈（-）鏈無意義鏈模板鏈轉(zhuǎn)錄形成mRNA與編碼鏈（有意義鏈）相同Pribnow框(盒）核酸合成專題知識(shí)講座第43頁大腸桿菌RNA聚合酶結(jié)構(gòu)示意圖關(guān)鍵酶(α2ββ)起始因子β——和模板DNA結(jié)合β——起始和催化聚合反應(yīng)α——？全酶(αββ)核酸合成專題知識(shí)講座第44頁RNA聚合酶催化反應(yīng)ACGACGUU模板DNA5′3′5′3′新合成RNA核酸合成專題知識(shí)講座第45頁RNA合成過程起始雙鏈DNA局部解開磷酸二酯鍵形成終止階段解鏈區(qū)抵達(dá)基因終點(diǎn)延長(zhǎng)階段53RNA

開啟子（promoter)

終止子(terminator)5RNA聚合酶5353553離開核酸合成專題知識(shí)講座第46頁RNA鏈延伸圖解3′3′RNA-DNA雜交螺旋聚合酶移動(dòng)方向新生RNA復(fù)鏈解鏈有義鏈模板鏈（反義鏈）延長(zhǎng)部位核酸合成專題知識(shí)講座第47頁原核生物中rRNA前體加工

甲基化作用專一核酸內(nèi)切酶30S前體17StRNA25S專一核酸外切酶16SrRNAtRNA23SrRNA5S

rRNA專一核酸外切酶核酸合成專題知識(shí)講座第48頁tRNA前體分子加工a、切除tRNA前體兩端多出序列：

5’—端切除幾到10個(gè)核苷酸。b、末端添加：3’-端添加CCA序列。c、修飾：形成稀有堿基如DH2。RNAasePRNAaseFRNAasePRNAaseFRNAaseDRNAaseDACC表示核酸內(nèi)切酶作用表示核苷酸轉(zhuǎn)移酶作用表示核酸外切酶作用

表示異構(gòu)化酶作用

核酸合成專題知識(shí)講座第49頁酵母酪氨酸t(yī)RNA前體加工早轉(zhuǎn)錄本成熟tRNA加工核酸合成專題知識(shí)講座第50頁真核細(xì)胞mRNA加工5′

“帽子”PolyA

3′

順反子(cistron)

m7G-5′ppp-N-3′pAAAAAAA-OH5′端接上一個(gè)“帽子”(CAP)結(jié)構(gòu)

3′端添加PolyA“尾巴”,由RNA末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶催化剪接：剪去內(nèi)含子(intron)，拼接外顯子(extron)核酸合成專題知識(shí)講座第51頁真核細(xì)胞mRNA結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

5′

“帽子”PolyA

3′

順反子m7G-5′ppp-N-3′p帽子結(jié)構(gòu)功效使mRNA免遭核酸酶破壞使mRNA能與核糖體小亞基結(jié)合并開始合成蛋白質(zhì)被蛋白質(zhì)合成起始因子所識(shí)別，從而促進(jìn)蛋白質(zhì)合成。Poly(A)尾巴功效是mRNA由細(xì)胞核進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)所必需形式它大大提升了mRNA在細(xì)胞質(zhì)中穩(wěn)定性

AAAAAAA-OH核酸合成專題知識(shí)講座第52頁真核生物和原核生物轉(zhuǎn)錄差異

DNA核核糖體新生蛋白質(zhì)真核生物原核生物mRNA前體轉(zhuǎn)運(yùn)加工mRNAmRNA

真核生物中轉(zhuǎn)錄與復(fù)制在不一樣區(qū)域

RNA聚合酶不相同開啟子不一樣轉(zhuǎn)錄后RNA加工修飾不一樣核酸合成專題知識(shí)講座第53頁噬菌體Q合成

A.負(fù)鏈合成B.正鏈合成病毒正鏈復(fù)制中間體復(fù)制中間體新合成正鏈新合成負(fù)鏈負(fù)鏈核酸合成專題知識(shí)講座第54頁DNA和RNA合成比較核酸合成專題知識(shí)講座第55頁a、操縱子——基因表示協(xié)同單位操縱子結(jié)構(gòu)基因（編碼蛋白質(zhì)，S）控制部位操縱基因（operator,O）開啟子（premotor,P）b、酶合成誘導(dǎo)和阻遏原核生物酶合成調(diào)整遺傳機(jī)制

操縱子學(xué)說

實(shí)例：誘導(dǎo)型操縱子乳糖操縱子阻遏型操縱子色氨酸操縱子（自學(xué)）核酸合成專題知識(shí)講座第56頁酶誘導(dǎo)和阻遏操縱子模型B.有活性阻遏蛋白加誘導(dǎo)劑A.有活性阻遏蛋白C.無活性阻遏蛋白D.無活性阻遏蛋白加輔阻遏劑操縱基因開啟基因調(diào)整基因結(jié)構(gòu)基因

阻遏蛋白(有活性)阻遏蛋白阻擋操縱基因結(jié)構(gòu)基因不表示誘導(dǎo)物誘導(dǎo)物與阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白不能起到阻擋操縱基因作用,結(jié)構(gòu)基因能夠表示酶蛋白mRNA阻遏蛋白不能跟操縱基因結(jié)合,結(jié)構(gòu)基因能夠表示阻遏蛋白(無活性)酶蛋白mRNA代謝產(chǎn)物與阻遏蛋白結(jié)合,從而使阻遏蛋白能夠阻擋操縱基因,結(jié)構(gòu)基因不表示代謝產(chǎn)物核酸合成專題知識(shí)講座第57頁乳糖操縱子正調(diào)控RLacZLacYLacamRNAmRNAZmRNAYmRNAa基因表示CAP基因結(jié)構(gòu)基因TCAPOCAP結(jié)合部位RNA聚合酶TcAMP-CAPP葡萄糖分解代謝產(chǎn)物腺苷酸環(huán)化酶磷酸二酯酶ATPcAMP5'-AMP抑制激活葡萄糖降解物與cAMP關(guān)系cAMPCAP：降解物基因活化蛋白（catabolicgeneactivationprotein）降低cAMP濃度使CAP呈失活狀態(tài)核酸合成專題知識(shí)講座第58頁真核生物基因表示調(diào)控DNA轉(zhuǎn)錄初產(chǎn)物RNAmRNA蛋白質(zhì)前體mRNA降解物活性蛋白質(zhì)DNA水平調(diào)整轉(zhuǎn)錄水平調(diào)整轉(zhuǎn)錄后加工調(diào)整翻譯調(diào)整mRNA降解調(diào)整翻譯后加工調(diào)整核細(xì)胞質(zhì)

真核基因表示調(diào)控五個(gè)水平

DNA水平調(diào)整轉(zhuǎn)錄水平調(diào)整轉(zhuǎn)錄后加工調(diào)整翻譯水平調(diào)整翻譯后加工調(diào)整真核基因調(diào)控主要是正調(diào)控順式作用元件和反式作用因子轉(zhuǎn)錄因子相互作用控制轉(zhuǎn)錄核酸合成專題知識(shí)講座第59頁第三節(jié)核酸合成抑制劑

核苷酸合成抑制劑氨基酸類似物葉酸類似物堿基和核苷酸類似物嵌合劑烷化劑

與DNA模板結(jié)合抑制劑

作用于DNA聚合酶或RNA集合酶抑制劑抗菌素:如利福平、曲張霉素有機(jī)化合物：如磷羧基乙酸核酸合成專題知識(shí)講座第60頁第四節(jié)基因工程及分子生物學(xué)技術(shù)介紹

一、基因工程二、體細(xì)胞克隆技術(shù)三、聚合酶鍵式反應(yīng)（polymerasechainreaction,PCR）核酸合成專題知識(shí)講座第61頁一、基因工程介紹

基因工程亦稱遺傳工程，即利用DNA重組技術(shù)方法，把DNA作為組件，在細(xì)胞外將一個(gè)外源DNA（目標(biāo)基因）和載體DNA重新組合連接（重組），最終將重組體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞，使外源基因DNA在宿主細(xì)胞中，隨細(xì)胞繁殖而增殖（cloning，克?。?，或最終得到表示，最終取得基因表示產(chǎn)物或改變生物原有遺傳性狀。

基因工程操作技術(shù)

基因工程應(yīng)用與前景核酸合成專題知識(shí)講座第62頁基因工程操作技術(shù)

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