食品中三聚氰胺的檢測方法

食品中三聚氰胺的檢測方法第1頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日化學(xué)名：1,3,5-三氨基-2,4,6-三嗪俗稱“蛋白精”主要用途：三聚氰胺甲醛樹脂的原料涂料化工上交聯(lián)劑阻燃劑、清潔劑等

一、關(guān)于三聚氰胺三聚氰胺第2頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日二、理化性質(zhì)無色單斜棱結(jié)晶無氣味低毒常溫下在水中的溶解度為3.1g/L三聚氰胺呈弱堿性pH值為8能與各種酸反應(yīng)生成三聚氰胺鹽在強(qiáng)堿或強(qiáng)酸液中能發(fā)生水解氨基逐步被羥基取代生成三聚氰酸三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺第3頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日三、毒奶粉事件1、為什么奶粉中加入三聚氰胺？蛋白質(zhì)的含量是奶粉質(zhì)量的主要標(biāo)志之一奶粉中加入三聚氰胺（含氮量66.6%）可以在檢測蛋白質(zhì)的時(shí)候顯示其氮含量很高1公斤稀釋奶中自然溶入的3.3克三聚氰胺成本僅為4分錢1公斤的牛奶的市場收購價(jià)約3.0元第4頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日2、長期攝入三聚氰胺的危害動(dòng)物長期攝入會(huì)造成生殖泌尿系統(tǒng)的損害腎部結(jié)石并可進(jìn)一步誘發(fā)膀胱癌添加到牛奶中后會(huì)產(chǎn)生三聚氰酸與三聚氰胺結(jié)合在一起后形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)晶微溶于水遇胃酸溶解在腎小管中再次結(jié)晶長期會(huì)形成腎結(jié)石第5頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日3、人體能承受三聚氰胺最大量美國食品及藥品監(jiān)督管理局的標(biāo)準(zhǔn)：三聚氰胺每日可容忍攝入量為0.63毫克/公斤體重也就是說一個(gè)60公斤的成年人每日可容忍攝入量為37.8毫克三鹿的問題奶粉則達(dá)到了2563毫克/公斤第6頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日3、為什么會(huì)“大頭娃娃”？嬰幼兒的營養(yǎng)主要攝入是奶粉蛋白質(zhì)糖類脂肪奶粉中含有大量的三聚氰胺營養(yǎng)不良，身體小，腦袋大第7頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日四、三聚氰胺的檢測方法1、色譜檢測法2、離子色譜法3、紅外光譜法4、容量分析法5、毛細(xì)管電泳法等等第8頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜檢測優(yōu)點(diǎn)：①無需分離提?、跇悠房焖贌o損③結(jié)果直觀準(zhǔn)確④分析精度高紅外光譜儀第9頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日傅里葉變換紅外光譜儀結(jié)構(gòu)圖紅外光譜檢測第10頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜檢測儀器檢測原理第11頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日檢測器邁克爾遜干涉儀定鏡l0-l干涉儀動(dòng)鏡IR光源分束器BM光程差=0BMBF=BF第12頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日邁克爾遜干涉儀Detector定鏡干涉儀動(dòng)鏡

l0-lIRSource分束器BM光程差=1/4BM-1/8BF=BF檢測器第13頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜檢測原理：在紅外線照射下每種分子都有其結(jié)構(gòu)和組成決定的獨(dú)有的紅外吸收光譜對(duì)純奶粉與加入少量三聚氰胺的奶粉樣品繪制紅外透過率光譜圖，通過比較，定性判斷聚氰胺特定官能團(tuán)及特征峰第14頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜檢測儀器設(shè)備：①日本島津傅里葉變換紅外光譜儀IRPrestige-21型②天津市科器高新技術(shù)公司

壓片機(jī)③電子天平④瑪瑙研缽樣品準(zhǔn)備：全脂奶粉三聚氰胺溴化鉀第15頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜檢測樣品壓片制備：①將純度為99％溴化鉀150mg通過瑪瑙研體進(jìn)行研磨。研磨后壓制成本底透明薄片。②取奶粉1mg與150mg溴化鉀進(jìn)行混合研磨，研磨后壓制成奶粉透明薄片。第16頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜檢測③三聚氰胺1mg與150mg溴化鉀進(jìn)行混合研磨壓制成三聚氰胺透明薄片。④取奶粉lmg、三聚氰胺0.001mg和150mg溴化鉀進(jìn)行混合研磨，壓制透明薄片第17頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜檢測譜圖采集：紅外光譜儀預(yù)熱30min以上掃描范圍4400—500cm分辨率4cm-1每個(gè)樣品掃描32次求平均值以溴化鉀作為本底，獲取樣品譜圖。第18頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日紅外光譜圖認(rèn)識(shí)：縱坐標(biāo)為透過率，橫坐標(biāo)為波長λ（μm）或波數(shù)（cm-1）例1：Octane（辛烷）紅外光譜圖紅外光譜檢測第19頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日純奶粉紅外透過率光譜第20頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日三聚氰胺紅外光譜圖二聚氰胺主要官能團(tuán)峰值3467cm3419cmNH2反對(duì)稱伸縮振動(dòng)1651cmN-H扭曲振動(dòng)1551cm三嗪環(huán)芳香族C=N伸縮振動(dòng)第21頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日3419cm-1和l551cm-1處為三聚氰胺的NH2和三嗪環(huán)芳香族C=N伸縮振動(dòng)特征吸收峰2924cm-12852cm-1和1745cm-1為奶粉甲基氨基酸的特征吸收峰含有0.1％三聚氰胺奶粉紅外譜圖第22頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日。純奶粉a三聚氰胺b含有0.1%三聚氰胺的奶粉c譜圖疊加第23頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日奶粉與三聚氰胺紅外特征吸收峰第24頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日實(shí)驗(yàn)結(jié)論：若樣品在傅里葉紅外光譜圖中3467m-13419cm-1、1551cm-1和814cm-1處有明顯特征吸收峰則可判斷該奶粉樣品中含有三聚氰胺。第25頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日高效液相色譜法（HPLC)測定原料乳和乳制品中三聚氰胺采用HPLC

以三氯乙酸乙腈為提取液，經(jīng)混合型陽離子交換固相萃取柱富集凈化后采用C18或C8柱，以乙腈和檸檬酸—辛烷磺酸鈉緩沖液為流動(dòng)相采用二極管陣列檢測器或紫外檢測器檢測，在添加量為2.00～10.00mg/kg的濃度范圍內(nèi)回收率在80%～110%，定量限為2.00mg/kg第26頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀超高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法

利用超高效液相色譜電噴霧串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜技術(shù)可測定食品中的三聚氰胺，利用三氯乙酸溶液提取蛋白中的三聚氰胺并形成蛋白絡(luò)合物沉淀，乙酸鉛溶液結(jié)合含有SO42-、SO32-等離子的雜質(zhì)形成沉淀，進(jìn)一步提高了提取效率，三氯乙酸可作為離子對(duì)試劑進(jìn)行液相色譜—質(zhì)譜分析。第27頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日拉曼光譜儀拉曼光譜法

以拉曼效應(yīng)為基礎(chǔ)的分子結(jié)構(gòu)表征技術(shù)，其信號(hào)來源于分子振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)，是分子極化率變化誘導(dǎo)產(chǎn)生的，其譜線強(qiáng)度取決于相應(yīng)的簡正振動(dòng)過程中極化率變化的大小，用來鑒定分子中存在的官能團(tuán)。第28頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日核磁共振儀核磁共振法（NMR）

根據(jù)三聚氰胺分子核磁共振氫譜的特性，采用400Hz下氫的核磁共振模式可分析出奶粉中的三聚氰胺，通過圖譜疊加也可作為定量手段。采用固相萃取液質(zhì)分析三聚氰胺污染的配方奶粉和蛋糕時(shí)，所得結(jié)果與NMR分析相同。第29頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日電位滴定儀

電位滴定法

以硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定含三聚氰胺的溶液，然后根據(jù)等當(dāng)量點(diǎn)時(shí)消耗硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積計(jì)算三聚氰胺含量的方法。該方法多用于化工產(chǎn)品中三聚氰胺的檢測，屬常量檢測。利用電位滴定法測定溶液中三聚氰胺的含量，RSD不大于0.5%第30頁，共32頁，2023年，2月20日，星期日