免疫分型教程

40-免疫分型教程(1)正常骨髓免疫分型上圖是正常骨髓經(jīng)CD45CD71CD33染色后組成的CD45/SSCCD71/CD33雙參數(shù)散點(diǎn)圖；況。CD45/SSC圖中可見(jiàn)：1CD45強(qiáng)陽(yáng)性SSC（褐色細(xì)胞群體；2，中等強(qiáng)度的CD45SSC信號(hào)最強(qiáng)的細(xì)胞群體為粒細(xì)胞（藍(lán)色及紅色細(xì)胞群體；3CD45表達(dá)與SSC信號(hào)介于淋巴細(xì)胞與粒細(xì)胞之間的是單核細(xì)胞群體（綠色細(xì)胞群體；4，CD45陰性，SSC信號(hào)最低的有核紅細(xì)胞和細(xì)胞碎片；CD33/CD71圖中可見(jiàn)：1CD33表達(dá)最強(qiáng)的單核細(xì)胞群體（綠色；2，粒細(xì)胞CD33表達(dá)較單核弱，不成熟粒表達(dá)CD71，成熟后不表達(dá)。3，淋巴細(xì)胞、有核細(xì)胞和細(xì)胞碎片不表達(dá)CD33、CD71。CD11B/CD15圖可用來(lái)評(píng)估髓系細(xì)胞向單核、粒分化的程度（得CD11，粒細(xì)胞高表達(dá)CD1：1，單核細(xì)胞（綠色）高表達(dá)CD11B，CD15中等到表達(dá)；（藍(lán)色及橘紅色CD11B幼稚髓細(xì)胞僅表達(dá)CD15CD11B。3，TBCD15、CD11B，NKCD11B而無(wú)CD15（紅色細(xì)胞。4，有核紅細(xì)胞及碎片不表達(dá)CD15和CD11B。根據(jù)骨髓細(xì)胞CD45/SSC圖中分布情況設(shè)門(mén)圈定各類細(xì)胞：R1門(mén)為成熟淋巴細(xì)胞；R2門(mén)為正常單核細(xì)胞位置；R3門(mén)正常粒細(xì)胞位置；R4門(mén)為幼稚淋巴細(xì)胞出現(xiàn)位置；R5門(mén)為有核紅細(xì)胞或細(xì)胞碎片位置；R6門(mén)為幼稚髓細(xì)胞出現(xiàn)位置；白血病細(xì)胞通常會(huì)在R4、R6兩門(mén)位置處出現(xiàn)。M0免疫分型M0:急性髓細(xì)胞白血病微分化型原始細(xì)胞在光鏡下類似L2堿性,無(wú)嗜天青顆粒及Auer小體,髓過(guò)氧化酶(MPOB陽(yáng)性細(xì)胞<3%;或CD13CD7+,TdT+急非淋白血病可表現(xiàn)CD7+,TdT。90AUER，MPO陰性。遺傳學(xué)：染色體常有復(fù)雜的異常，特別是5和7號(hào)染色體。當(dāng)病例伴T(mén)（9；22）時(shí)會(huì)出現(xiàn)淋系抗原。FSSSCD45/SSCD16。相當(dāng)一部分病例CD7CD4；HLA-DRCD7CD34MPOCD33/CD13聯(lián)合檢測(cè)更為敏感。M0MPO3%，3%M1。M0:HLA-DR+,CD34+,CD13+/-,MPO+,CD14-,CD11b-,TdT-/+to+/-CD45/SSCSSCCD19、CD34CD13CD33。CD13CD3396%。HLA-DR這些幼稚細(xì)胞表型的情況是：CD13陽(yáng)性，CD33陽(yáng)性，CD34陰性，HLA-DR陰性。這個(gè)表型與AML-M3相以。腫瘤細(xì)胞不表達(dá)CD71、CD117、CD18、CD11b和CD15。CD64是陰性，但CD14表達(dá)。CD14表達(dá)強(qiáng)度比較弱與CD13相似。TCD2、CD5、CD3CD7T與陰性對(duì)照相比，CD4診斷：AML微分化型，CD34和HLA-DR陰性。實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步診斷：MPO（免疫組化）陽(yáng)性，NSE陰性，46XY，t(3;5)(q25;q34)重要說(shuō)明：本例中白血病細(xì)胞免型表型為：CD34-、HLA-DR-，CD13+，CD33+AML-M3AML-M3FCM結(jié)如下：（）表達(dá)CD1（leu-M3，盡管表達(dá)有所降低（SSCAML-M3vSSCM3vCD13（CD13/CD33。有時(shí)AML-M3CD13。對(duì)于這些疑難病例需要借助分子遺傳學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)診斷工具來(lái)建立正確的診斷。其他標(biāo)記物如：Bcells(CD19,CD20,Kappa,Lambda),CD10(Calla),CD5(Tcells),CD41(platelet)都是陰性。光散射圖中顯示在前向散射光和表示顆粒度的側(cè)向散射光有一群處于中間位置的細(xì)胞。這與組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果相一致。（暫無(wú)圖）CD45/CD14CD45CD14（99%）。CD45于成熟淋巴細(xì)胞，可能是由髓系細(xì)胞和未成熟幼稚細(xì)胞組成。（暫無(wú)圖）HLADR/CD3DR（81%）CD3（T）TB（CD45）。DRBTCD34/CD38CD34CD38CD38BALLAML（CD45），前B（CD14陰性）。CD13/CD15等高圖中顯示大部分細(xì)胞（63%）髓系抗原CD13/CD15陰性。但此處提供了一絲線索，因?yàn)橛行┘?xì)胞（30%）表達(dá)低水平CD15。絕大部分AMLM1-M6細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD13和CD15。CD33/TdT）。無(wú)細(xì)胞表達(dá)TdTAML-M0/M1。CD11b/GPAGPA髓系干細(xì)胞。CD11bNK這些細(xì)胞還同時(shí)表達(dá)CD7。這使人感覺(jué)有誤，但現(xiàn)已知早期髓系白血病細(xì)胞可偶然同時(shí)表達(dá)CD7。M0M1M0M1MPOM1M0。M1免疫分型幼稚細(xì)胞成群，RALS信號(hào)弱。M1與M0很難區(qū)分，但M1細(xì)胞大小及顆粒度較M0稍大，與原粒細(xì)胞接近。至少伴隨一種髓系抗原：CD13或CD33。高表達(dá)HLA-DR，CD34陽(yáng)性但較M0弱,>3%的幼稚細(xì)胞表達(dá)MPO，較M0多。不表達(dá)CD11B，CD15，CD16等。M1:CD11B-/+,HLA-DR+,CD13+,CD33+,CD34+,CD14+,MPO+,TdT-/+to+/-M2免疫分型CD45/RALSM1M2BLASTWINDOWSM2M1CD33CD71胞強(qiáng)。CD13CD33。M2腫瘤細(xì)胞弱表達(dá)CD15與CD11B,說(shuō)明細(xì)胞已分化。CD34表達(dá)顯著降低。M2CD5,CD7TdTt(8;21),CD19CD56MPOM2t(8;21CD13-，CD33-，CD14MPO+。細(xì)胞分布廣泛，幼稚細(xì)胞較M1少。CD13和CD33陽(yáng)性，且CD13表達(dá)高于CD33。HLA-DR陽(yáng)性，CD15弱陽(yáng)性。M2腫瘤細(xì)胞伴t（8，21）CD19陽(yáng)性。M3免疫分型M3VRALSSS胞。腫瘤細(xì)胞大，F(xiàn)SCD45/RALSM3M3VM3SS/FSM3與M3V在免疫表型上無(wú)區(qū)別。M3CD34HLA-DRCD9特異。CD2M3M3VHLA-DRt(15,17)異常相關(guān)。CD33CD13CD15，CD16CD11B。腫瘤細(xì)胞完全不表達(dá)CD15，與正常早幼粒細(xì)胞表達(dá)CD15SMPOMPOLACTOFERINCD2TBM3腫瘤細(xì)胞因其胞漿內(nèi)多顆粒，細(xì)胞具有很強(qiáng)的自發(fā)熒光。M3:CD33+,CD13+,MPO+,CD34-,HLA-DR-,CD11b-,CD14-,CD15-,TdT-M4免疫分型M4CD45/RALSM0，M1FSSSBLASTWINDOWSM4不同，表型也可能互不相同。本例為M4EO，增多的嗜酸細(xì)胞RALSCD45R4門(mén)中紫色細(xì)胞。幼稚細(xì)胞群表達(dá)CD34，HLA-DR，而異常單核細(xì)胞則CD34陰性，HLA-DR陽(yáng)性。CD33CD14CD33CD14，CD64CD64中強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)則為單核細(xì)胞特異性標(biāo)志。M4CD11B/CD15CD2M4EO16M4/blastpopulation:CD13+,CD33+,CD34+,HLADR+,CD11b-,CD14-M4/abnomal monocyticcell:CD13+,CD33+,CD34-,HLA-DR+,CD11b+,CD14+/-,CD4+/-M5免疫分型M5CD45M5M5aM5bCD45CD15/CD11BCD15的粒細(xì)胞.不成熟的單核細(xì)胞CD11B表達(dá)弱.如出現(xiàn)CD33陽(yáng)性，CD13，CD34陰性。M5腫瘤細(xì)胞通常高表達(dá)CD33，CD13表達(dá)多樣。CD4是髓系幼稚細(xì)胞向單核系分化的敏感指標(biāo)。CD14CD14AMMLCD61M5a:HLA-DR+,CD11b+/-,CD34+,CD33+,CD13+,CD14-/+,CD4+/-M5b:HLA-DR+,CD11b+,CD34-,CD13+,CD16+/-,CD14+,CD4+/-M6免疫分型本例中可見(jiàn)兩群幼稚細(xì)胞，M650%強(qiáng)，而其他系別的幼稚細(xì)胞30M6M6CD71AHLA-DR，CD34CD33CD13很多M6病例中會(huì)出現(xiàn)一群髓系幼稚細(xì)胞，如本例中的紅色細(xì)胞群體。M6;CD71+,GP-A+,CD34+/-,HLA-DR+/-,CD13+/-,CD33+/-,CD34+/-,CD14-,CD11b-M7免疫分型本例中幼稚細(xì)胞CD45/RALS信號(hào)都不強(qiáng)。與B-ALL，M6的腫瘤細(xì)胞相似。M7CD61CD41CD41CD61，CD62CD41CD61本例CD34陽(yáng)性，CD71弱陽(yáng)，其他系別抗原不表達(dá)。其他系別抗原均為陰性，與M0、M1相似。M7:HLA-DR+,CD34+,CD33+/-,CD14-,MPO-,TdT-TALL免疫分型T-ALLCD45B-ALLCD45/SSCBLASTWINDOWS單核細(xì)胞區(qū)或與正常淋巴細(xì)場(chǎng)胞相混。CD10T-ALLCD19CD3440T-ALLCD34T-ALLCD3PECD3CD3/CD5TTCD4/CD8TCD4/CD8T-ALL。T-ALLCD730AMLCD7HLA-DRT-ALL，特別是在兒童，CD7HLA-DR，AMLCD7HLA-DRT-ALLTpre-thymic：CD7+，CD1a-，CD4/8-，CD3-；thymic:CD7+，CD4/8+，CD3-；matrue:CD3+,CD1a-;原始T細(xì)胞ALL與AML很難區(qū)分，要加測(cè)胞漿內(nèi)CD3。T-ALLTdTCD4CD8CD3TdT。T-ALL的共同特征是：下調(diào)表達(dá)T系抗原或出現(xiàn)異?？乖穆?lián)合表達(dá)。BALL免疫分型BB-ALL表達(dá)及其表達(dá)位置。具體情況如下：1,成熟B細(xì)胞ALL表達(dá)表面免疫球蛋白（sIg）2,前B細(xì)胞ALL細(xì)胞胞漿內(nèi)表達(dá)免疫球蛋白重鍵(cu)而不表達(dá)輕鏈3,早前B-ALL則兩者都陰性BcuIgB-ALL。B（B-precursororearly6550FABL1L2BCD34HLA-DRTdTCD10BCD19BBCD9，CD22CD24；這BCD20CD20CD20CD20BBBALLBCD10CD1011q23MLL其他"11q23CD15CD24。白血病細(xì)胞通常CD34BCD19t(9;22BCR-ABLALLPh1CD34CD10CD19CD25Bt(12;21)(p21;q22)的病例預(yù)后TEL/AML1，B1-10CD19，CD10HLA-DR，CD34，部分細(xì)CD20CD10CD9CD20TEL/AML1B-precursor-ALLFS/SS，CD45CD45/SSCFABL1L2B-precursor-ALL的腫瘤細(xì)胞CD10/CD19強(qiáng)陽(yáng)性，CD33弱陽(yáng)性如使用PE標(biāo)記的CD33抗體檢測(cè)陽(yáng)性增強(qiáng)但不可據(jù)此判定為混合型白血病。CD10B-precursor-ALLCD10CD10-，CD10+的病人預(yù)后較好B-precursor-ALLB-cell-ALLPRE-B-ALLCD19，HLA-DRB-ALLCD22CD20