(72)-17.1超高效液相色譜法藥物分析

PharmaceuticalAnalysis

PharmaceuticalAnalysis超高效液相色譜法（UPLC）

超高效液相色譜(UPLC)技術(shù)

新型色譜填料(色譜柱<2μm小粒徑填料)A超高壓液相色譜泵(>100MPa)B全新自動(dòng)進(jìn)樣器(減少死體積；消除交叉污染)C顯著改善色譜的分離效率和檢測(cè)靈敏度;大大縮短分析周期E高速檢測(cè)器(小檢測(cè)池體積；低信噪比；質(zhì)譜檢測(cè)器)D超高效液相色譜(UPLC)技術(shù)

分離效率更高、速度更快的原因？

理論塔板高度(HEPT,H)范第姆特(VanDeemter)方程式H=A(dp)+B/u+C(dp)2uA項(xiàng)代表顆粒度和柱床填裝的優(yōu)良程度；B項(xiàng)代表縱向分子擴(kuò)散項(xiàng)；C項(xiàng)代表傳質(zhì)阻力項(xiàng)。H值越小，則塔內(nèi)傳質(zhì)效果越佳理論塔板數(shù)(N)用于定量表示色譜柱的分離效率(柱效)，N越大柱效越高；N=16(tR/W)2

H=L/N(L為柱長(zhǎng))UPLC優(yōu)點(diǎn)

高分離度UPLC的dp達(dá)1.7μm，分離度比5μm粒度提高70%，比3.5μm高40%分離度UPLC優(yōu)點(diǎn)

高分析速度uopt∝1/dp,dp↓，柱長(zhǎng)L↓，提供更高分析速度運(yùn)用1.7μm粒度，柱長(zhǎng)比5μm縮短3倍而柱效保持不變;并使流速在高3倍下進(jìn)行，分離過(guò)程提高9倍而分離度保持不變。UPLC優(yōu)點(diǎn)

0.000.040.000.501.001.502.002.503.003.504.004.505.005.506.001.Tpylbenzene-1.7424.butylbenzene-2.4135.hexylbenzene-5.058

樣品的組分?jǐn)?shù)：55μm顆粒度完全分離時(shí)間：6.00min0.200.241.Tpylbenzene-0.1374.butylbenzene-0.1825.hexylbenzene-0.360UPLC?AU0.000.100.20Minutes0.000.250.300.350.400.450.500.550.60UPLC?HPLC樣品的組分?jǐn)?shù)：51.7μm顆粒度完全分離的時(shí)間：0.60min0.00AU例UPLC優(yōu)點(diǎn)

高靈敏度AU0.0000.0040.0080.0120.0160.020Minutes1.701.801.902.0002.402.502.601.7μmAU0.0000.0100.0200.0300.0400.050Minutes0.001.002.003.004.005.006.007.008.00AU0.0000.0100.0200.0300.0400.0505.0μm0.024UPLC使用小顆粒技術(shù)可得到更高的柱效從而改善分離度，獲得更窄的色譜峰，即更高的靈敏度。UPLC優(yōu)點(diǎn)

方法轉(zhuǎn)化簡(jiǎn)便基于相同的分離機(jī)制，UPLC與HPLC之間方法容易轉(zhuǎn)化UPLC較HPLC縮短了分析時(shí)間，同時(shí)減少了溶劑用量UPLC-MS較HPLC-MS能提供更高的靈敏度和分離效率易與質(zhì)譜串聯(lián)UPLC的應(yīng)用

新型的色譜填料及裝填技術(shù)

超高壓液相色譜泵、

自動(dòng)進(jìn)樣器、高速檢測(cè)器優(yōu)化系統(tǒng)的綜合設(shè)計(jì)儀器分析能力增強(qiáng)UPLC的應(yīng)用

UPLC多應(yīng)用于高通量分