積壓血清弱凝集

積壓血清弱凝集第1頁/共49頁交叉配血常見錯誤的分析第2頁/共49頁責任性錯誤特殊原因導致配血錯誤技術性錯誤交叉配血常見錯誤第3頁/共49頁

在交叉配血中發(fā)生重大差錯事故往往是工作責任心不強，粗心大意，馬馬虎虎造成。要把事故消滅在萌芽狀態(tài)必須做到以下幾點：

1、熱愛本職工作，愛崗敬業(yè)，認真按照標準操作規(guī)程操作。

2、防止交叉配血標本拿錯和離心后結果看錯。

3、各種配血器皿、器材要清潔、干燥，防止溶血和交叉污染。一、責任性錯誤（責任心不強）第4頁/共49頁4、交叉配血用的滴管、試管等不能互相交叉混用。5、標準血清不用時應及時放入冰箱，防止細菌生長導致標準血清變質。6、觀察結果要仔細，遵守規(guī)定的時間，冬季注意保溫，防止冷凝集素干擾配血結果。7、觀察結果時，除了用肉眼觀察外，必須用顯微鏡觀察，注意區(qū)分假凝集與真凝集反應。一、責任性錯誤（責任心不強）第5頁/共49頁8、注意病人有無輸血史和妊娠史，交叉配血時一定要用鹽水相（如鹽水配血法）和非鹽水相（如凝聚胺配血法、抗凝球蛋白法、卡式法）兩種方法同時配血，防止不完全抗體漏檢。

①鹽水法優(yōu)缺點:簡便、快速、成本低，但有局限性。

迄今人類紅細胞血型已發(fā)現(xiàn)23個系統(tǒng)。鹽水法只能檢出ABO、P、Lewis、I和MN等系統(tǒng)的抗體，而不能檢出Rh、等系統(tǒng)的抗體。前者多為天然抗體，屬IgM球蛋白；后者由免疫產生，屬IgG球蛋白。IgM分子量大，分子長度長，能在鹽水中與紅細胞上相應抗原結合，連接相鄰紅細胞出現(xiàn)可見的凝集反應：而IgG分子量小，分子長度短，不能在鹽水中起可見的凝集反應。因此，交叉配血不能只用鹽水法，還要選用能有效檢出IgG抗體的方法。

一、責任性錯誤（責任心不強）第6頁/共49頁②能夠檢出IgG抗體的酶法、抗球蛋白法及凝聚胺法各有優(yōu)缺點：

凝聚胺法對大多數血型系統(tǒng)敏感度高，且操作簡便、快速。目前我國適合應用凝聚胺法、因對Rh系統(tǒng)特別敏感。因我國以Rh系統(tǒng)引起的遲發(fā)性溶血性輸血反應最為常見。第7頁/共49頁9、一個血標本只能配血1次，第2次輸血時必須重抽標本配血（24-72小時內的標本能代表病人的免疫狀態(tài)）。10、交叉配血全過程應由2個人反復復查、核對，準確無誤后才能出具《配血試驗報告單》和發(fā)放血液。11、配血完成后應將病人和供血者的標本置2～8℃冰箱保存至少7d，輸血后血袋至少保存3-7d，以備復查。一、責任性錯誤（責任心不強）第8頁/共49頁二、特殊原因導致配血錯誤冷凝集現(xiàn)象緡錢狀形成不相容現(xiàn)象其他第9頁/共49頁1、冷凝集現(xiàn)象

這是冬天配血最常見的問題，主要是因為獻血者或受血者血清中存在冷凝集素（IgG）造成。

（正常人血清中冷凝集素效價一般不高，且在4℃以下時才有活性。但由于人免疫系統(tǒng)的差異，在惡性腫瘤或病原體感染后有時，冷反應性自身抗體可異常增高，可導致溶血性貧血。這種冷凝集素效價在4℃可高于1000，用37℃生理鹽水洗滌紅細胞）

二、特殊原因導致配血錯誤第10頁/共49頁1、冷凝集現(xiàn)象

處理方法：37℃孵育或37℃水浴5～10分鐘，取出后立即用顯微鏡觀察，凝塊消失者是冷凝集，不消失者是真凝集。

(含有冷凝集素的血液輸注時應先將血液預熱后再輸注。)第11頁/共49頁冷凝集現(xiàn)象第12頁/共49頁冷凝集37℃水浴5～10分鐘后第13頁/共49頁正常紅細胞形態(tài)第14頁/共49頁2、緡錢狀形成交叉配血時有時紅細胞會出現(xiàn)串錢狀假凝集，沒有經驗的人會認為這是真凝集，而造成配血錯誤。造成假凝集的原因是受血者或獻血者血液中球蛋白及纖維蛋白原含量增高，使紅細胞易于靠近而形成緡錢狀。

（常見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、慢性腫瘤等。）二、特殊原因導致配血錯誤第15頁/共49頁RBC緡錢狀假凝集第16頁/共49頁正常RBC形態(tài)第17頁/共49頁3、不相容現(xiàn)象血清中有免疫抗體或不規(guī)則抗體（IgM或IgG和IgM混合型）時，交叉配血結果會出現(xiàn)不相容現(xiàn)象，做不規(guī)則抗體篩查試驗可查明。4、其他有自身抗體（積壓血清）、弱凝集、假凝集、亞型、細菌性凝集、混合外觀凝集現(xiàn)象、自身免疫性溶血性貧血時，會影響交叉配血結果。二、特殊原因導致配血錯誤第18頁/共49頁假凝集

血清在室溫和37℃中，使紅細胞出現(xiàn)了假凝集，造成配血錯誤。常見于某些肝病、傳染病、多發(fā)性骨髓瘤、霍金氏病、心肌梗塞、感染等病，或用紙片或玻片作血型鑒定時，時間過長水份蒸發(fā)引起紅細胞發(fā)生凝集，這種凝集在鏡下為緡錢狀，可看清紅細胞形態(tài)，患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗陰性.處理方法：用生理鹽水稀釋或洗滌紅細胞可使凝集消失。第19頁/共49頁弱凝集

血型試驗是抗原抗體反應，當患者紅細胞上抗原異常或血清中存在ABO血型以外的不規(guī)則抗體時，可能會導致減弱的或缺少的凝集反應?？乖惓０ǎ孩賮喰?，這種亞型紅細胞抗原性較弱，可以通過亞型定型試劑來具體定型。②紅細胞抗原形成不足或敏感性降低，如新生兒、老年人及少數惡病質患者。鑒定血型時要注意正反定型的結合，加用抗H和抗A，B型標準血清、A2紅細胞等檢查唾液中的血型物質，必要時作吸收放散試驗以確定。若血清中存在不規(guī)則抗體可在反定型用O細胞加以鑒定，有些亞型因為抗原的某些位點缺失，也會產生相對于缺失抗原位點的抗體，這些抗體的產生有助于亞型的判定。第20頁/共49頁細菌性凝集

常見有類B凝集，A型或O型病人因大腸桿菌O86感染，從而使紅細胞上獲得類B抗原，能與抗B抗體發(fā)生凝集，表現(xiàn)為AB或B型，其不受溫度影響。處理方法：等病情好轉類B凝集即消失。另外紅細胞被細菌或細菌酶污染，紅細胞上的T抗原被激活，與供血者中抗T抗體發(fā)生凝集。處理方法：此種凝集在4℃和37℃之間隨著溫度的升高凝集程度逐漸減弱，在37℃時最弱或消失。第21頁/共49頁自身免疫性溶血性貧血

紅細胞被自身抗體強烈致敏后將干擾ABO定型，且自身抗體的存在會導致交叉配血不合。

處理方法：選擇合適的試驗方法對紅細胞上結合的抗體做放散處理，確定抗體的特異性。如果抗體屬于同種抗體，則交叉配血時應選取該抗原陰性的獻血者的血液。如果該抗體無法確定特異性，則交叉配血時要根據患者自身紅細胞與自身血清的對照反應選取較弱反應的獻血者血液。

第22頁/共49頁自身免疫性溶血性貧血

因為自身抗體的干擾而發(fā)生ABO正反定型不相符時。

處理方法：可用37℃～45℃生理鹽水洗滌紅細胞三次，或者用放散后的紅細胞（放散方法需不破壞紅細胞結構），血清定型則可用洗滌或放散后的紅細胞將血清中的自身抗體吸收后再進行。第23頁/共49頁混合外觀凝集現(xiàn)象

出現(xiàn)混合外觀凝集的情況時一般要核對標本，必要時可重新抽取血樣?；颊咴诮谟羞^骨髓移植或輸血史、胎盤出血和白血病等應在疾病恢復后再確定血型。其他原因如嵌合現(xiàn)象、A3亞型及Tn多凝集反應等在定型時可幫助正確判斷血型。第24頁/共49頁不規(guī)則抗體及亞型

血型試驗是抗原抗體反應，當患者血清中存在ABO型以外的IgM或IgG和IgM混合型不規(guī)則抗體時，必然會導致ABO正反定型不一致。處理方法：可通過測定唾液中的血型物質來鑒定ABO血型。由于受檢者紅細胞上有弱抗原，且抗原表達性特別弱，在紙片定型中很可能被錯誤定型，另外抗A/抗B/抗AB血清的效價低等其他因素的影響，正反定型不相符，也可能被錯定或無法確認。處理方法：應用試管鹽水法鏡檢顯示抗A/抗B/抗AB管呈弱的混合外觀，正反定型相符，且經吸收放散試驗進一步確定相應的亞型。

第25頁/共49頁不規(guī)則抗體及亞型

由于某些亞型紅細胞與抗A，B血清呈現(xiàn)出特異性反應，因此同時采用抗A，B血清，而在反定型時加入O細胞可以檢出部分不規(guī)則抗體。對ABO血型正反定型不一致的標本，正定型時加入抗H有助于檢測紅細胞表面H抗原的量，對鑒別亞型具有重要意義，同時有助于發(fā)現(xiàn)稀有血型，如孟買型等第26頁/共49頁三、技術性錯誤

1、交叉配血中出現(xiàn)溶血時被誤認為是陰性（血液相配合）。溶血是因為血液先凝集后在血清補體作用下形成的，是血液不配合的表現(xiàn)?？朔椒ǎ合葘⒀?6℃滅活補體后，再做交叉配血試驗。

2、交叉配血時紅細胞懸液太濃或太淡，易造成假陰生結果。

3、交叉配血時生理鹽水加量過多導致血清（漿）被稀釋，出現(xiàn)假陰性結果。

第27頁/共49頁

4、配血時離心速度太低或太高，造成了假陰性和假陽性結果。

5、聚凝胺配血時重懸液加量過少或殘留液過多，造成了假陽性結果。

6、聚凝胺試劑使用前沒有恢復至室溫就做實驗，造成了錯誤結果。

7、病人血標本中肝素含量過多，配血時聚凝胺沒有雙倍加量，造成配血錯誤。三、技術性錯誤第28頁/共49頁

8、聚凝胺配血時各試劑的比例不恰當，增加血清或紅細胞的量后，LISS及聚凝胺、重懸液的量沒有相應增加，使靈敏度降低導致配血錯誤。

9、聚凝胺配血時最適溫度是22℃，溫度降低靈敏度會下降，出現(xiàn)假陰性結果。10、紅細胞不正確的洗滌和懸浮，使抗球蛋白實驗出現(xiàn)假陰性結果。三、技術性錯誤第29頁/共49頁案例分析一第30頁/共49頁第31頁/共49頁此病人交叉配血（抗人球蛋白卡）主側：無凝聚無溶血次側：有凝聚（++++）交叉配血（凝聚胺法）主側：無凝聚無溶血次側：無凝聚無溶血不規(guī)則抗體及自身對照：全陰第32頁/共49頁考慮獻血員的血清中是否存在抗體？做獻血員的不規(guī)則抗體篩查：第33頁/共49頁第34頁/共49頁獻血員的不規(guī)則抗體篩查結果檢測細胞Ⅰ：++++

檢測細胞Ⅱ：++++

檢測細胞Ⅲ：陰性說明該獻血員存在不規(guī)則抗體。處理方法：與血站聯(lián)系退血。立即更換一袋血做交叉配血后主次側無凝聚無溶血。第35頁/共49頁案例分析第36頁/共49頁第37頁/共49頁病人交叉配血：主側：無凝聚無溶血

次側：有凝聚

不規(guī)則抗體：全陰

自身對照：++

第38頁/共49頁直接抗人球蛋白：++

說明病人本身紅細胞上存在抗體，鑒于輸血安全考慮，建議輸注同型的洗滌紅細胞。第39頁/共49頁案例分析第40頁/共49頁陳倩君嬰、女、5天血型鑒定：0型RH陰性。其父母雙方為0型RH陽性。第41頁/共49頁案例分析謝秦雁女33歲婦二科診斷：宮內妊娠雙活胎第42頁/共49頁卡式法：B型較弱1～2+；

玻片法：正定型為B型，

反定型為B型，正反相符。第43頁/共49頁正定型操作方法：

1、A型：紅懸液+抗A抗體試劑

B型：紅懸液+抗B抗體試劑

2、放置10min后離心，混勻，結果：B型凝集。第44頁/共49頁凝聚胺介質