dd第四次實(shí)驗(yàn)血鈣血磷測定課件

第四次實(shí)驗(yàn)鈣、磷、試劑空白測定目的與要求1.掌握鈣、磷的測定原理和操作方法2.掌握試劑空白測定的應(yīng)用3.了解鈣、磷的測定的臨床意義一、血清鈣離子測定

甲基麝香草酚藍(lán)比色法鄰甲酚酞絡(luò)合酮法（臨檢中心推薦）原子吸收光譜法離子選擇電極法(一)實(shí)驗(yàn)原理

血清中鈣離子在堿性溶液中能與甲基麝香草酚藍(lán)染料結(jié)合，生成有色復(fù)合物。(三)操作1.檢測參數(shù)主波長：612nm溫度：室溫。2.空白管標(biāo)準(zhǔn)管樣本管工作液2.0ml去離子水20ul）工作液2.0ml工作液2.0ml鈣標(biāo)準(zhǔn)液20ul血20ul3.分別混勻各管，室溫放5分鐘，

以空白管校零，記錄各管吸光度。4.結(jié)果鈣(mmol/L)=樣本管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×標(biāo)準(zhǔn)液濃度(四)臨床意義1.參考值：2.1—2.9mmol/L。生命危急值：1.7mmol/L，3.3mmol/L。2.增高：甲旁亢、多發(fā)性骨髓瘤、VitD增多癥、代酸等3.降低：甲旁減、尿毒癥、佝僂病等。(五)方法評(píng)價(jià)1.重復(fù)性、準(zhǔn)確度較好、簡便、易于自動(dòng)化。2.線性：在樣本濃度0-3.75mmol/L范圍內(nèi),

線性良好。3.精密度：批內(nèi)CV≤5％。批間相對(duì)誤差≤54.易受干擾。(一)實(shí)驗(yàn)原理：

血清中無機(jī)磷在酸性溶液中與鉬酸銨反應(yīng)生成在340nm處有吸收峰的磷鉬酸銨，其吸光度的變化與無機(jī)磷含量成正比。(二)試劑磷試劑硫酸220mmol/L鉬酸銨1.0mmol/L表面活性劑適量校準(zhǔn)液：磷酸二氫鉀1.29mmol/L防腐劑適量(四)臨床意義1.參考值：成人：0.97-1.62mmol/L兒童：1.45-2.10mmol/L2.增高：甲旁減、慢性腎炎晚期、多發(fā)性骨髓瘤、骨折愈合期等。3.減低：甲旁亢、腎小管變性病變時(shí)等。(五)方法性能精密度:批內(nèi)變異CV≤5％。線性范圍:

0-4mmol/L。三、試劑空白測定

1.定義：用蒸餾水調(diào)零測定僅僅未加樣品的試劑管，用以扣除試劑干擾對(duì)結(jié)果所造成的系統(tǒng)誤差。本次實(shí)驗(yàn)用鈣離子測定的方法進(jìn)行試劑空白實(shí)驗(yàn)。計(jì)算

空白值=空白OD/標(biāo)準(zhǔn)OD×標(biāo)準(zhǔn)濃度樣本值=×標(biāo)準(zhǔn)濃度樣本OD-空白OD標(biāo)準(zhǔn)OD-空白OD3.試劑空白的選擇原則（1）試劑中某組分在測定波長下對(duì)光有吸收；（2）被測試樣本身在測定波長下沒有光吸收；（3）被測試樣中的其他成分與