生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)培訓(xùn)

生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)培訓(xùn)第1頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一【生物安全實(shí)驗(yàn)室】概念生物安全（biosafety）指避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露，向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施。

WHO定義為“保護(hù)工作人員避免接觸與所進(jìn)行實(shí)驗(yàn)工作（臨床或研究）有關(guān)的微生物因子的生物安全原則和技術(shù)的實(shí)踐”。第2頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一【生物安全實(shí)驗(yàn)室】概念生物安全實(shí)驗(yàn)室（biosafetylaboratory）是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置、個(gè)人防護(hù)裝備的使用，通過(guò)嚴(yán)格遵守預(yù)先制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序和管理規(guī)范等綜合措施，確保操作生物危險(xiǎn)因子的工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染的實(shí)驗(yàn)室。第3頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一生物安全標(biāo)識(shí)第4頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一生物安全標(biāo)識(shí)第5頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室】

目的

保護(hù)操作人員保護(hù)環(huán)境保護(hù)樣品第6頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一防護(hù)水平分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)，

BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4

（表示動(dòng)物活體操作）

一級(jí)防護(hù)水平最低，四級(jí)防護(hù)水平最高

【生物安全實(shí)驗(yàn)室】

實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平分級(jí)

第7頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

適用于操作在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/適用性】

適用性

【1】一級(jí)（BSL-1）實(shí)驗(yàn)室第8頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/適用性】

【2】二級(jí)（BSL-2）實(shí)驗(yàn)室第9頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物

。

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/適用性】

【3】三級(jí)（BSL-3）的實(shí)驗(yàn)室第10頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物

。

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/適用性】

【4】四級(jí)（BSL-4）實(shí)驗(yàn)室第11頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氣溶膠aerosols懸浮于氣體介質(zhì)中的粒徑一般為0.001μm～100μm的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對(duì)穩(wěn)定的分散體系

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/主要術(shù)語(yǔ)】

主要術(shù)語(yǔ)

第12頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一生物安全柜biologicalsafetycabinet，BSC具備氣流控制及高效空氣過(guò)濾裝置的操作柜，可有效降低實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的有害氣溶膠對(duì)操作者和環(huán)境的危害

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/主要術(shù)語(yǔ)】

第13頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氣鎖airlock具備機(jī)械送排風(fēng)系統(tǒng)、整體消毒滅菌條件、化學(xué)噴淋（適用時(shí)）和壓力可監(jiān)控的氣密室，其門具有互鎖功能，不能同時(shí)處于開(kāi)啟狀態(tài)。

緩沖間bufferroom設(shè)置在被污染概率不同的實(shí)驗(yàn)室區(qū)域間的密閉室，需要時(shí)，設(shè)置機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，其門具有互鎖功能，不能同時(shí)處于開(kāi)啟狀態(tài)

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/主要術(shù)語(yǔ)】

第14頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一高效空氣過(guò)濾器（HEPA過(guò)濾器）highefficiencyparticulateairfilter通常以0.3μm微粒為測(cè)試物，在規(guī)定的條件下濾除效率高于99.97%的空氣過(guò)濾器

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/主要術(shù)語(yǔ)】

第15頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一實(shí)驗(yàn)室的走廊和通道應(yīng)不妨礙人員和物品通過(guò)

應(yīng)設(shè)計(jì)緊急撤離路線，緊急出口應(yīng)有明顯的標(biāo)識(shí)

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/設(shè)計(jì)原則及基本要求】

設(shè)計(jì)原則及基本要求

第16頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一房間的門根據(jù)需要安裝門鎖，門鎖應(yīng)便于內(nèi)部快速打開(kāi)

需要時(shí)（如：正當(dāng)操作危險(xiǎn)材料時(shí)），房間的入口處應(yīng)有警示和進(jìn)入限制

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/設(shè)計(jì)原則及基本要求】

第17頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一應(yīng)評(píng)估生物材料、樣本、藥品、化學(xué)品和機(jī)密資料等被誤用、被偷盜和被不正當(dāng)使用的風(fēng)險(xiǎn)，并采取相應(yīng)的物理防范措施

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等室內(nèi)環(huán)境參數(shù)應(yīng)符合工作要求和衛(wèi)生等相關(guān)要求

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/設(shè)計(jì)原則及基本要求】

第18頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)還應(yīng)考慮節(jié)能、環(huán)保及舒適性要求，應(yīng)符合職業(yè)衛(wèi)生要求和人機(jī)工效學(xué)要求

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入的措施

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/設(shè)計(jì)原則及基本要求】

第19頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一門應(yīng)有可視窗并可鎖閉，門鎖及門的開(kāi)啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生

墻壁、天花板、地面應(yīng)易清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒滅菌劑的腐蝕地面應(yīng)平整、防滑，不應(yīng)鋪設(shè)地毯

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/設(shè)計(jì)原則及基本要求】

第20頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一不得循環(huán)使用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室排出的空氣

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)，如：空間、進(jìn)出通道、解剖室、籠具等應(yīng)考慮動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物福利的要求

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/設(shè)計(jì)原則及基本要求】

第21頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一【生物安全實(shí)驗(yàn)室】二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室BSL－2第22頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一BSL-2實(shí)驗(yàn)室在建筑物中的位置通常無(wú)特別要求；可根據(jù)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的需要確定；當(dāng)建筑條件允許時(shí)，宜設(shè)于人流、物流相對(duì)較少的僻靜處，自成隔離區(qū)域。

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL-2實(shí)驗(yàn)室】位置第23頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2實(shí)驗(yàn)室】

常壓

狀態(tài)

負(fù)壓

狀態(tài)

負(fù)壓狀態(tài)的生物安全防護(hù)性能高于常壓狀態(tài)。

選擇——

根據(jù)需要

類型第24頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/常壓狀態(tài)】

“無(wú)特別要求”

生物安全柜洗眼器/洗手池

標(biāo)志實(shí)驗(yàn)室主入口的門、放置生物安全柜實(shí)驗(yàn)間的門應(yīng)可自動(dòng)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室主入口的門應(yīng)有進(jìn)入控制措施

常壓狀態(tài)

第25頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一若房間面積足夠，宜在進(jìn)口處設(shè)置隔斷，形成前室和核心工作間

核心實(shí)驗(yàn)間前室衣柜邊臺(tái)雙扉傳遞窗

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/常壓狀態(tài)】

實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外應(yīng)有存放備用物品的條件

第26頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/負(fù)壓狀態(tài)】

平面設(shè)置/布局壓力梯度氣流組織人流組織物流組織負(fù)壓狀態(tài)——建設(shè)要點(diǎn)第27頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/負(fù)壓狀態(tài)】

平面布局——要點(diǎn)應(yīng)符合

人流組織物流組織其他各環(huán)節(jié)的生物安全性要求第28頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/負(fù)壓狀態(tài)】

平面設(shè)置

更衣室＋緩沖間＋主實(shí)驗(yàn)室

［準(zhǔn)備間/洗消間＋淋浴室＋樣品庫(kù)］使用獨(dú)立空調(diào)時(shí)應(yīng)設(shè)（預(yù)留）機(jī)房，無(wú)需設(shè)污物專用走廊及二更衣室第29頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

基本平面結(jié)構(gòu)示意圖

更衣室緩沖間核心工作間準(zhǔn)備間邊臺(tái)傳遞窗

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/負(fù)壓狀態(tài)】

第30頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

人流進(jìn)入路線

公共清潔區(qū)

更衣室

緩沖間

污染區(qū)第31頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

人流退出路線

污染區(qū)

緩沖間

淋浴間

公共清潔區(qū)

更衣室第32頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

物品進(jìn)、出路線清潔區(qū)

雙扉傳遞窗

污染區(qū)

第33頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

平面結(jié)構(gòu)示意圖—淋浴

更衣室緩沖間核心工作間準(zhǔn)備間邊臺(tái)傳遞窗淋浴間淋浴第34頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

平面結(jié)構(gòu)示意圖—樣品庫(kù)

更衣室緩沖間核心工作間準(zhǔn)備間邊臺(tái)傳遞窗淋浴間樣品庫(kù)樣品庫(kù)

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

第35頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

平面結(jié)構(gòu)示意圖—機(jī)房

更衣室緩沖間核心工作間準(zhǔn)備間邊臺(tái)傳遞窗機(jī)房

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

第36頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

平面設(shè)置

緩沖間

是指具有不同空氣指標(biāo)（氣壓、潔凈度、溫度、相對(duì)濕度）的區(qū)域之間相貫通時(shí)空氣相互交換的減緩區(qū)，其作用僅在于最大程度地減少區(qū)域空氣指標(biāo)的損失。第37頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

平面設(shè)置緩沖間

在BSL-2實(shí)驗(yàn)室中，緩沖室最重要的作用是減少相鄰相通房間負(fù)壓差（Pa）的損失，起縮小泄壓區(qū)的作用，使不同區(qū)域之間的空氣交換量降低到最小程度；其次是減少潔凈度等其他空氣指標(biāo)的損失。

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

第38頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

平面設(shè)置緩沖間

緩沖室越小效果越好。在滿足正常人流、物流的情況下，應(yīng)盡量縮小建筑尺度；因此，緩沖室的面積通常取1300mm×〔1300～1500〕mm左右即可。

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

第39頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

第40頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

第41頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/平面布局】

各區(qū)域平面結(jié)構(gòu)應(yīng)規(guī)整

第42頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一空氣處理核心措施

氣流組織保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員（定向氣流）

負(fù)壓梯度保護(hù)外部環(huán)境

潔凈度保護(hù)樣品

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/核心措施】

第43頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一實(shí)驗(yàn)室區(qū)域整體氣流組織

清潔區(qū)緩沖區(qū)污染區(qū)排出

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/氣流組織】

第44頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一主實(shí)驗(yàn)室氣流組織清潔空氣送入操作人員生物安全柜后排出生物安全柜

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/氣流組織】

第45頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/氣流組織】

人員核心實(shí)驗(yàn)間氣流組織

排風(fēng)口送風(fēng)口生安柜第46頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一空氣調(diào)節(jié)主實(shí)驗(yàn)室為對(duì)側(cè)上送下排

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/負(fù)壓狀態(tài)】

第47頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/負(fù)壓狀態(tài)】

主實(shí)驗(yàn)室為對(duì)側(cè)上送下排/上排

均勻單向流

空氣調(diào)節(jié)送風(fēng)口排風(fēng)口宜采用全新風(fēng)系統(tǒng)第48頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一【生物安全實(shí)驗(yàn)室/BSL－2/負(fù)壓狀態(tài)】

空氣調(diào)節(jié)

主實(shí)驗(yàn)室相對(duì)壓強(qiáng)宜為

-20Pa～-30Pa

相鄰相通房間壓差為10Pa以上潔凈度為7級(jí)～8級(jí)。第49頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

生物安全柜

BSC-II-A1型BSC-II-A2型BSC-II-B1型BSC-II-B2型

第50頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

BSC-II-A1型實(shí)驗(yàn)區(qū)有垂直層流前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.38m/s可向室內(nèi)排風(fēng)循環(huán)氣流比例為70%有正壓污染區(qū)不能用于揮發(fā)性有毒化學(xué)物、放射性物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)操作

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

第51頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一實(shí)驗(yàn)區(qū)有垂直層流前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.50m/s可向室內(nèi)排風(fēng)循環(huán)氣流比例為70%正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍無(wú)外接風(fēng)道有外接風(fēng)道BSC-II-A2型

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

第52頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一BSC-II-B1型實(shí)驗(yàn)區(qū)有垂直層流前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.50m/s用風(fēng)道連接排至室外循環(huán)氣流比例為30%正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

第53頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一實(shí)驗(yàn)區(qū)有垂直層流前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速≥0.50m/s用風(fēng)道連接排至室外循環(huán)氣流比例為

0—

全排正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍BSC-II-B2型

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

第54頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

A1型、A2型排風(fēng)方式室內(nèi)循環(huán)室外排風(fēng)

外置風(fēng)機(jī)排風(fēng)管套筒連接

第55頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

排風(fēng)管套筒接

避免干擾生物安全柜自身的氣流套筒排風(fēng)管生安柜第56頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一四種都可以通常選擇BSC-II-A2型原因：安全—符合安裝—簡(jiǎn)單：可直接排在室內(nèi)

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

生物安全柜選擇

第57頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一排至室內(nèi)生物安全柜排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備換氣條件排至室外排風(fēng)管應(yīng)獨(dú)立于建筑物其他公共通風(fēng)系統(tǒng)管道；可以連接本實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)排風(fēng)管

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/生物安全柜】

說(shuō)明第58頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

實(shí)驗(yàn)設(shè)備布置

生物安全柜與出入口不緊鄰的墻體通訊設(shè)備生物安全柜對(duì)面洗手、洗眼裝置門口孵箱靠近鄰室氣瓶處高壓過(guò)滅均器靠近傳遞窗

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/設(shè)備布置】

第59頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一主實(shí)驗(yàn)室設(shè)備布置生安柜離心機(jī)箱培養(yǎng)洗眼/手滅菌器傳遞窗傳真機(jī)

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/設(shè)備布置】

第60頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

實(shí)驗(yàn)室核心間內(nèi)一臺(tái)實(shí)驗(yàn)室所在建筑一臺(tái)

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/設(shè)備布置】

高壓滅菌器洗手、洗眼裝置

水上下水下水處理？消毒液一次性洗眼瓶第61頁(yè)，共69頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

【生物安全實(shí)驗(yàn)室/負(fù)壓狀態(tài)BSL－2/面積】

建筑面積（參考）

以一臺(tái)生物安全柜計(jì)

總面積宜為35平方米～55平方米主實(shí)