化學發(fā)光免疫分析

化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光免疫檢測技術起源Halman在1977年基于放射免疫分析的基本原理，將酶的化學發(fā)光與免疫反應結合起來，建立了化學發(fā)光免疫分析方法。(Chemiluminescenceimmunoas)2020/11/32臨床核醫(yī)學診斷核醫(yī)學（影像診斷）治療核醫(yī)學體外分析技術（放射免疫分析）（化學發(fā)光免疫分析）2020/11/33什么是化學發(fā)光？人體內的某些化合物分子被氧化后，可以形成激發(fā)態(tài)并返回基態(tài)同時發(fā)射光子，這就是化學發(fā)光?；瘜W發(fā)光免疫檢測技術是利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子的產額。該技術可以有效的消除樣本的本底干擾，消除樣本對光信號的散射，從而獲得更高的檢測靈敏度。

2020/11/34化學發(fā)光免疫分析原理：化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光分析系統(tǒng)免疫反應系統(tǒng)2020/11/35免疫反應系統(tǒng)：將發(fā)光物質（在反應劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體）直接標記在抗原（化學發(fā)光免疫分析）或標記抗體（免疫化學發(fā)光分析）上，或用酶作用于發(fā)光底物。2020/11/36化學發(fā)光分析系統(tǒng)：利用化學發(fā)光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發(fā)態(tài)的中間體，當這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時發(fā)射出光子（hv)，利用發(fā)光信號測量儀測量光量子的產額，就可測知體內某些微量生物活性物質的含量。2020/11/37化學發(fā)光免疫分析類型：根據標記物的不同分為三大類：1、化學發(fā)光免疫分析2、化學發(fā)光酶免疫分析3、電化學發(fā)光免疫分析2020/11/38化學發(fā)光免疫檢測技術：優(yōu)點：安全，靈敏度高（10-15g/ml），穩(wěn)定性好，重復性較佳，結果漂移小，線性較好，準確度高，操作方便，試劑貨架期長（半年~1年），浪費少，出結果快速。缺點：儀器價格昂貴，試劑成本較高，目前有些檢測項目不能用化學發(fā)光檢測，待開發(fā)。2020/11/39化學發(fā)光技術與其他免疫分析技術比較：

免疫診斷技術在經歷了放射免疫法、酶標免疫法、免疫熒光法等方法后，發(fā)展到今天，化學發(fā)光技術的出現(xiàn)并臨床應用，為現(xiàn)代醫(yī)學免疫診斷技術的發(fā)展奠定了一個劃時代的里程碑。

2020/11/310.1、放射免疫法：1、放射免疫法缺陷：同位素半衰期短（125I半衰期60天）及需要特殊水源處理裝置，污染問題、試劑有效期短、出報告時間長（一般要2天）、標準曲線穩(wěn)定性差，但在有些發(fā)達國家仍在使用，完全能滿足臨床需要。2020/11/3112、酶標記免疫分析缺陷：

由來已久，但是始終沒有能夠替代放射免疫。這種依靠比色法或偏振光法的檢測技術所受的干擾因素太多，甚至試管的形狀的變化都會影響實驗結果，靈敏性、穩(wěn)定性、重復性均較差（可測靈敏度為10-8g/ml）。2020/11/3123、熒光免疫分析技術缺陷：利用特定波長的入射光將分子轉換到激發(fā)態(tài)，然后分子回到基態(tài)并發(fā)射光子。但有以下干擾因素：

1）血清樣本中存在內源性熒光帶，會增強非特異性本底熒光；

2）樣本對熒光光信號的散射也干擾實驗結果。2020/11/313化學發(fā)光免疫檢測技術臨床應用：1、甲狀腺功能類：T3、T4、THS、FT3、FT4、rT3、TG、T-PO新生兒篩查：T4sTSH

2、性腺激素類：HCG、?-HCG、FSH、LH、E2、E3、PRL、P、T、GH等3、腫瘤檢測：

CEA、AFP、Fe、PSA、CA125、CA153、CA199CA50、CA211、CA7242020/11/3144、心血管：CK-MB、BNP、Tn-I、Myoglobin5、貧血類：鐵蛋白、ViteB12、葉酸6、藥物濃度：地高辛、洋地黃、托普霉素可馬西平、苯巴比妥、等7、糖尿病及代謝：胰島素、C-肽、PTH8、過敏源類：過敏源篩選、總過敏源9、傳染?。焊窝紫盗?、風疹、弓形體10、其他：皮質醇、還有很多待開發(fā)項目。2020/11/315心血管系統(tǒng):如何能更快更準確更全面的診斷AMI2020/11/316時心電圖并不能典型歸類診斷急性心肌梗塞有一定難度一半有不穩(wěn)定胸口窒息痛的病人，入院時心電圖并不典型。病人再發(fā)梗塞診斷困難導致不能及時診斷AMI延誤及時治療、護理臨床需要盡早準確診斷AMI方法2020/11/317肌肉組織心肌心肌細胞特異性標志肌鈣蛋白ICT肌鈣蛋白I釋放入血心肌壞死（氨基酸順序40％差異）2020/11/318心肌細胞肌紅蛋白肌酸激酶MB心肌壞死釋放入血（含量大）血液濃度明顯升高(CK-MB)2020/11/31965432104812162024487296h肌紅蛋白CK-MB肌鈣蛋白濃度急性心肌梗塞后各項指標變化2020/11/320肌紅蛋白升高高峰回落肌酸激酶MB肌鈣蛋白I1-2h4-8h6-8h5-12h10-24h12-24h18-30h48-72h5-7d2020/11/321肌紅蛋白的臨床意義早期診斷特異性低靈敏度高急性心梗后最早(1-2h)出現(xiàn)的標記最早能排除非急性心梗陰性預測率為99%體內周期短，對再發(fā)梗塞特別靈敏肌紅蛋白測定能有效分辨非急性心梗，使急性心梗病人能盡早得到治療.有效觀察溶栓療效2020/11/322肌鈣蛋白I的臨床意義診斷急性心肌梗塞特異性>98%特異性強、確診率高靈敏度低急性心梗發(fā)病后6h才出現(xiàn)，應與肌紅蛋白一同使用肌鈣蛋白I升高即可確診為急性心肌梗塞，及時得到治療體內周期長，對外地病人延誤求診亦能診斷對極輕微的心肌創(chuàng)傷都能檢出2020/11/323胸痛ECG發(fā)病肌鈣蛋白I肌紅蛋白CK-MB急性心梗+–++<8h>8h隨訪+再發(fā)心梗2020/11/324肌紅蛋白注意事項肌酸激酶MB骨骼肌損傷肌紅蛋白升高腎功能衰竭CK-MB

增高2020/11/325甲狀腺功能系列診斷：T3T4TSHTSH-3

FrT3FrT4TupT-poAb2020/11/326

診斷各種甲亢必須具備的儀器設備:

1、甲狀腺131-I攝取率測定儀2、各種放射免疫測定儀或各種全自動發(fā)光免疫測定儀3、甲狀腺功能顯像設備：（SPECT、γ照相儀）2020/11/327甲亢正確診斷（特別是首診）1、臨床癥狀、體征。2、實驗室檢查：T3、T4、FT3、FT4、sTSH或uTSH、TMAb、TGAb、TPOAb、TRAb……3、131-I攝取試驗是必查項目

只靠臨床癥狀、體征及實驗室檢查無法鑒別：碘甲亢、亞甲炎甲亢、亞急性淋巴細胞性甲炎甲亢、慢甲炎甲亢和醫(yī)源性甲亢。治療和處理是完全不同的。2020/11/3282020/11/329目前臨床上靠一張甲狀腺功能檢查單（T3、FT3、T4、FT4增高和sTSH降低）診斷甲亢是不正確的，化驗單只證明患者血中甲狀腺激素增多（甲狀腺毒癥），而碘甲亢、亞甲炎甲亢、亞急性淋巴細胞性甲狀腺炎甲亢、慢性淋巴細胞性甲狀腺炎、醫(yī)源性甲亢等靠臨床癥狀、體征及化驗檢查是無法區(qū)分的，因此，首診病人必須做131-I攝取試驗才不會造成誤診。2020/11/3302020/11/3312020/11/332甲狀腺炎掃描圖2020/11/333正常甲狀腺掃描圖治療1個半月后2020/11/334治療后檢測結果顯示各項指標正常2020/11/335治療后恢復正常2020/11/3362020/11/3372020/11/3382020/11/3392020/11/3402020/11/3412020/11/342臨床常見的甲狀腺疾病種類：1、甲亢：大概分為13種，三大類。2、甲減：分為原發(fā)性、繼發(fā)性。3、甲狀腺炎：分5種。4、甲狀腺腫瘤：良性、惡性。5、甲狀腺腫：青春期、結節(jié)性甲腫。6、TH不敏感綜合征：三大類。2020/11/343甲狀腺激素不敏感綜合癥：一、全身型：1、甲減型T3、T4、TSH2、代償型T3、T4、TSH二、垂體型：甲亢癥狀明顯：T3、T4、TSH三、外周選擇型：T3、T4、TSH（正常）臨床甲減癥狀2020/11/3442020/11/3452020/11/3462020/11/3472020/11/3482020/11/3492020/11/3502020/11/3512020/11/3522020/11/3532020/11/3542020/11/3552020/11/3562020/11/3572020/11/3582020/11/3592020/11/3602020/11/3612020/11/362總之，化學發(fā)光免疫檢測技術（ChemiluminesentImmunoassay,CLIA）是繼酶免技術（EIA）、放免技術（RIA）、熒光免疫技術（FIA）和時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）之后發(fā)展的一項新興高度敏感的微量測定技術。

2020/11/363其具備以下特點：

①高度敏感，極限達10-17g/mL，遠高于RIA、EIA、FIA。②特異性強，重復性好C.V.＜5％。③測定范圍寬，可達7個數(shù)量級。④試劑穩(wěn)