(5)-2.3臨床生物化學(xué)檢測方法的校準與溯源性

臨床生物化學(xué)檢測方法的

校準與溯源性校準：指在規(guī)定條件下，為確定測量儀器或測量系統(tǒng)所指示的量值，或與實物量具（包括參考物質(zhì)等）所代表的值，與對應(yīng)的由標準所復(fù)現(xiàn)的量值之間關(guān)系的一組操作。臨床檢驗中校準通常是指在規(guī)定條件下，通過測定已知濃度或活性的分析物（校準品或標準品），建立試劑或儀器系統(tǒng)與分析物濃度或活性之間關(guān)系的過程。如果校準函數(shù)不能正確反映試劑或儀器系統(tǒng)與分析物濃度或活性之間的關(guān)系，檢測方法將存在系統(tǒng)誤差（偏倚）。溯源性是指測量結(jié)果或標準量值的屬性，使測量結(jié)果或標準量值通過一條不間斷的校準連與給定的參考標準相關(guān)聯(lián)。實現(xiàn)溯源性的基礎(chǔ)是參考溯源系統(tǒng)，簡稱參考系統(tǒng)，是由參考物質(zhì)、參考測量程序和參考測量實驗室組成的測量系統(tǒng)。1.參考物質(zhì)是一類充分均勻，并具有一個或多個確定的特性值的材料或物質(zhì)，用以校準測量系統(tǒng)、評價測量程序或為材料賦值。2.參考物質(zhì)具有校準和評價測量系統(tǒng)兩個主要功能，因此參考物質(zhì)又分為校準物和正確度質(zhì)控物。3.校準物是在校準函數(shù)中其值被用作自變量的參考物質(zhì)，用以校準測量系統(tǒng)或為材料賦值。4.正確度質(zhì)控物是用于評價測量系統(tǒng)的測量偏倚的參考物質(zhì)。參考物質(zhì)的分級：

一級參考物：最高計量學(xué)特性，最小測量不確定度，主要在參考實驗室應(yīng)用。二級參考物:主要在臨床檢驗試劑溯源性的建立中發(fā)揮重要作用。有證參考物質(zhì)：特性值由建立了溯源性的程序確定，其每一種確定的特性值都有給定置信水平的不確定度，其表示方式為“參考值+-總不確定度”。臨床檢驗的溯源可以有不同的模式，但其中心內(nèi)容是使各測量方法的測量值與一公認的標準發(fā)聲聯(lián)系。

1.ISO/DIS17511溯源鏈：ISO/DIS17511的SI單位溯源鏈包含三個層次：最上層是由國際計量局、國家計量機構(gòu)或經(jīng)認可的參考實驗室掌握的一級參考測量程序、一級參考物質(zhì)和二級參考測量程序、二級參考物質(zhì)；中間層為制造商；最下一層為終末用戶。在每一級水平，的參考物質(zhì)/質(zhì)控品用于校準測量程序，后者則為下一級參考物質(zhì)或校準品定值。通過不間斷的溯源鏈，最終實現(xiàn)臨床實驗室常規(guī)檢驗結(jié)果的溯源性。2.國家標準與技術(shù)研究所（NIST）溯源鏈此溯源鏈也分為三層：最高一層為各國的國家計量研究所建立的決定性方法；第二層是參考實驗室發(fā)展的參考方法，最下一層是臨床實驗室使用的常規(guī)方法。與ISO/DIS17511的SI單位溯源鏈的基于本原理一致，通過不間斷的溯源鏈，最終實現(xiàn)臨床實驗室常規(guī)檢驗結(jié)果的溯源性。參考物質(zhì)的互換性是指互通性、替換性等。其定義為：用常規(guī)方法和參考方法測量參考物質(zhì)所得結(jié)果的數(shù)字關(guān)系，與上述方法測量實際臨床樣本所得結(jié)果的數(shù)字關(guān)系的一致程度。參考物質(zhì)的互換性直接影響量值傳遞的正確性。參考物質(zhì)缺乏互換性的原因：

1.分析物：制備參考物質(zhì)時使用動物來源的樣本或添加外源性分析物，可因分析物的存在形式不同導(dǎo)致參考物質(zhì)缺乏互換性。如觀察到互換性隨著分析物濃度的增大而變差，考慮到互換性缺乏由分析物引起的。2.基質(zhì)效應(yīng)：基質(zhì)效應(yīng)是指被測量以外的某種樣品（簡稱影響量）對測量及被測量值的影響。基質(zhì)效應(yīng)包括：分析干擾，影響量本身不產(chǎn)生測量信號，但它增大或減小被測量的測量值。還有測量過程的非特異性影響量本身產(chǎn)生測量信號。3.基質(zhì)效應(yīng)產(chǎn)生的原因：

①參考物質(zhì)的加工處理：參考物質(zhì)一般采用與實際樣本相同或相似的材料制備，但由于對分析物濃度的要求及貯存和運輸?shù)饶康?，需要對原材料成分進行調(diào)整及處理（如添加外源性穩(wěn)定劑、凍干、冰凍等）。經(jīng)過處理的樣本和新鮮樣本的基質(zhì)狀態(tài)不同，因而存在不同程度的基質(zhì)效應(yīng)。②參考方法與常規(guī)方法的檢測原理不同：參考方法采用公認可靠的測量原理，測量結(jié)果較少受基質(zhì)狀態(tài)影響；常規(guī)方法針對實際臨床標本設(shè)計，分析與臨床樣本不同的參考物質(zhì)時，可表現(xiàn)出不同的分析能力，因而出現(xiàn)基質(zhì)效應(yīng)?；|(zhì)效應(yīng)可以通過回收試驗來評估。參考物質(zhì)互換性問題