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文檔簡(jiǎn)介

歡迎光臨結(jié)核菌培養(yǎng)方法、耐藥性及存活時(shí)間的研究

當(dāng)前,我國耐藥性病人不斷增加,尋求合理用藥,是當(dāng)務(wù)之急,為此我們對(duì)Dipasic作耐性研究,目的在于,(1)了解Dipasic對(duì)耐藥菌株是否有效?(2)Dipasic的藥物抑菌濃度如何?以便研究用量與用法,提高臨床療效。1、研究方法:從安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院的門診及病房肺結(jié)核病人的痰進(jìn)行結(jié)核菌培養(yǎng),無論病人是初治抑復(fù)治,亦不分男女老少,凡痰菌培養(yǎng)陽性者,即作為研究對(duì)象。結(jié)核菌的檢驗(yàn),按標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)操作進(jìn)行。藥敏培養(yǎng)基的制備:液體雞蛋培養(yǎng)基內(nèi),按比例加入抗結(jié)核藥物,其濃度按我國藥敏標(biāo)準(zhǔn),如INH、PAS、TB1,每毫升分別為1μg及10μg,SM、KM、CPM分別為10μg,RFP及RFD分別為50μg及250μg,EMB為5μg及50μg。Dipasic則暫定為每毫升含藥0.1μg、0.5μg、1.0μg及10μg四種。加入藥物后,充分搖勻混合后,分裝在中試管內(nèi),每管5毫升,擺成斜面,進(jìn)行85℃—90℃一小時(shí)凝固滅菌,24小時(shí)后再滅菌一次,制成的含藥培養(yǎng)基,保存在冰箱,一個(gè)月內(nèi)有效。菌液制備:取培養(yǎng)基上生長一個(gè)月內(nèi)的菌落,于磨菌器內(nèi)滅菌生理鹽水研磨呈均勻的菌液,再加滅菌鹽水稀釋,與標(biāo)準(zhǔn)管比較(制成每毫升含1毫升的菌液),最后100倍稀釋成每毫升含10-2毫克菌液備用。2、研究結(jié)果:我們研究的10種抗結(jié)核藥物耐藥性試驗(yàn),這10種抗結(jié)核藥物是:INH、PAS、DPC、TB1、EMB、RFP、RFD、SM、KM及CPM,圍繞本文目的,我們僅取30例病人的其中INH、PAS及DPC三種藥物的耐藥性進(jìn)行分析,其他另行報(bào)道。INH、PAS的濃度,按國家耐藥性標(biāo)準(zhǔn),分為1μg及10μg,以每毫升1μg為耐藥上界,1μg藥濃下不能生長者為陰性,為敏感菌。1μg生長者為陽性,為耐藥菌。DPC的濃度,由于我們尚需尋求合適的抑菌濃度,故分為每毫升含藥0.1μg、0.5μg、1.0μg及10μg四種不同的濃度。為便于統(tǒng)計(jì)比較,暫以1μg作為耐藥標(biāo)準(zhǔn),1μg以下者為敏感,1μg以上者為耐藥。表130例耐藥情況分析

藥物名

敏感

耐藥INH(%)3(10.0)27(90.0)PAS(%)22(73.3)8(26.7)DPC(%)20(66.6)10(33.4)藥物名-+

+++++INH(%)3(10.0%)1(3.3%)4(13.3%)22(73.4%)PAS(%)22(73.4%)2(6.6%)3(10.0%)3(10.0%)DPC(%)20(66.6%)3(10.0%)6(20.0%)1(3.3%)表2敏感與耐藥程度的分析表1和表2可以說明INH、PAS、DPC為三種不同的抗結(jié)核藥物,他們對(duì)不同的結(jié)核菌,有不同的敏感與耐藥情況。從8例耐PAS菌株中,我們發(fā)現(xiàn),此8例同時(shí)有三種以抗結(jié)核藥物之耐藥,耐DPC菌株10例中,也有此一現(xiàn)象,是多種耐藥性菌株。

抑菌濃度(μg)培養(yǎng)陽性培養(yǎng)陰性

0.130(100%)0(0%)0.518(60%)12(40%)19(30%)21(70)102(6.6%)28(93.4%)表3

30例DPC抑菌濃度的分析

討論:過去,有人認(rèn)為DPC是一種INH+PAS的混合物,我們的研究證明從耐藥性及耐藥程度分析,DPC是獨(dú)立的一種抗結(jié)核藥物,是INH與PAS的一種化合物,當(dāng)前,我國耐INH菌株已達(dá)90%,這樣的耐藥性,仍在廣泛應(yīng)用,是否降低療效,值得重視。INH耐藥后,是否致病力全均下降,從我們的結(jié)核菌培養(yǎng)后生長時(shí)間看,并未發(fā)現(xiàn)耐藥菌的生長延緩。比統(tǒng)計(jì)學(xué)看來,耐INH菌株,應(yīng)用DPC仍有效,差異有高度顯著性。因此,DPC可否作為另一種抗結(jié)核藥物,與RFP、RFD等聯(lián)合應(yīng)用,關(guān)鍵在于DPC是否和PAS那樣,對(duì)RFP、RFD吸收有障礙,會(huì)降低RFP的血濃度,降低療效。如果DPC并沒有PAS這一代謝現(xiàn)象,則DPC作為另一抗結(jié)核藥物,其應(yīng)用前景就較為廣闊了。Kowilsky氏測(cè)定DPC服用后血濃度的記載,氏用DPC與INH同量時(shí),血濃度1小時(shí)5.8mg/L,3小時(shí)6mg/1,7小時(shí)4.56mg/L,12小時(shí)2.6mg/L,14小時(shí)2mg/L,氏認(rèn)為DPC明顯優(yōu)于INH,其優(yōu)點(diǎn)是:(1)DPC排泄慢,INH12小時(shí)血濃度僅有0.003mg/L,而KPC仍有2.6mg/L,14小時(shí)時(shí)INH濃度已為”0”,KPC仍高達(dá)2mg/L。(2)血濃度KPC比INH高,在二者給同樣的藥量時(shí),INH血濃度為5.2mg/L,DPC則為5.8mg/L。結(jié)論:作者用結(jié)核菌培養(yǎng)及耐藥性測(cè)定的方法研究結(jié)果,認(rèn)為DPC是一種獨(dú)立的抗結(jié)核藥物,在各種抗結(jié)核藥物耐藥性增加的情況下,為了便于聯(lián)合治療,DPC有一定的實(shí)用價(jià)值。鑒于DPC1μg仍有30%生長,認(rèn)為用量應(yīng)加倍,提高血濃度,以求提高療效,建議推廣應(yīng)用。目的:了解Dipasic對(duì)耐藥菌株是否有效及其藥物抑菌濃度。方法:藥敏培養(yǎng)基內(nèi)加入10種不同濃度抗結(jié)核藥物,加入結(jié)核菌菌液10-3毫克。結(jié)果:四周后觀察三種抗結(jié)核藥物耐藥情況。結(jié)論:DPC是一種獨(dú)立的抗結(jié)核藥物對(duì)耐藥結(jié)核菌都有效,但在1μg濃度時(shí)仍有30%生長,認(rèn)為用藥量量應(yīng)加倍?!娟P(guān)鍵詞】:結(jié)核菌培養(yǎng)方法結(jié)核菌耐藥性結(jié)核菌存活時(shí)間結(jié)核菌試驗(yàn)科研三要素處理因素:抗結(jié)核藥物的濃度研究對(duì)象:肺結(jié)核病人

效益指標(biāo):DPC是一種獨(dú)立的抗結(jié)核的藥物,DPC有一定的實(shí)用

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