動(dòng)物細(xì)胞工程-細(xì)胞融合與單克隆抗體課件

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體授課教師：楊麗娜一、動(dòng)物細(xì)胞融合

細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合

受精作用動(dòng)物細(xì)胞融合（也稱細(xì)胞雜交）是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。雜交細(xì)胞融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞模上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。動(dòng)物細(xì)胞融合二、單克隆抗體什么是抗體？

抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。長(zhǎng)期以來(lái)，人們?yōu)榱双@得抗體，采用的方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后，從動(dòng)物的血清中分離所需抗體。缺點(diǎn)：產(chǎn)量低，純度低，而且制備的抗體特異性差。B淋巴細(xì)胞與抗體１．B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。２．動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。

３．每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體制備過(guò)程

注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體兩次篩選的目的第一次篩選是將未融合的B淋巴細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞以及同類型融合的細(xì)胞通過(guò)選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞。第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測(cè)的辦法篩選出來(lái)。因?yàn)轶w內(nèi)取免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞時(shí)取出很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞很多種，所以需篩選出特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。動(dòng)物的胚胎移植解決某些妊娠時(shí)間長(zhǎng)、每胎產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速度問(wèn)題。胚胎移植技術(shù)試管動(dòng)物（嬰兒）培養(yǎng)過(guò)程卵細(xì)胞精子體外受精受精卵胚胎新個(gè)體母體子宮內(nèi)孕育、產(chǎn)出

下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的抗體實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中B為_(kāi)_______過(guò)程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______5、C過(guò)程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過(guò)程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中_____代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌抗體無(wú)限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC乙甲abcdef(2)產(chǎn)生甲和乙的過(guò)程分別是—————和————（3）在形成乙是的過(guò)程中，需要將d的細(xì)胞核取出，將c細(xì)胞核移入d細(xì)胞內(nèi)，此技術(shù)叫———。所需的受體細(xì)胞大多采用動(dòng)物卵細(xì)胞的原因是————————————————————————（4）綿羊的白色對(duì)黑色為顯色。若甲是白色綿羊，要判斷它是否純合體，選用與它交配的綿羊最好是————-------------------------有性生殖克隆核移植卵細(xì)胞大，易于操作；卵細(xì)胞具有繼續(xù)分化的潛能。黑毛乙甲abcdef（5）在產(chǎn)生多莉羊時(shí)，需將e細(xì)胞形成的早期胚胎移入另一頭母羊（f）子宮里，這種技術(shù)在細(xì)胞工程中叫——————（6）繼植物組織培養(yǎng)后，克隆綿羊的培育成功，證明動(dòng)物細(xì)胞也有———（7）在繁殖多莉羊的過(guò)程中，是否