血細胞化學(xué)染色

關(guān)于血細胞化學(xué)染色第一頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三一、概述（一）研究對象

外周血和骨髓新鮮涂片單個細胞中的化學(xué)物質(zhì)：

酶類、脂類、糖類、鐵、蛋白質(zhì)、核酸等

第二頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

（二）臨床應(yīng)用

1.鑒別各類血細胞

2.輔助血液系統(tǒng)等疾病診斷和鑒別診斷

3.觀察疾病療效和判斷預(yù)后

第三頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

二、常用細胞化學(xué)染色方法

過氧化物酶染色中性粒細胞堿性磷酸酶染色過碘酸-雪夫反應(yīng)

α-醋酸萘酚酯酶染色鐵染色

第四頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三過氧化物酶染色

（peroxidase,POX）

第五頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三POX

新生態(tài)氧

[O]↑過氧化氫（基質(zhì)中）四甲基聯(lián)苯胺（無色）聯(lián)苯胺藍（藍色）亞硝基鐵氰化鈉

藍色顆粒（漿內(nèi)酶部位）粒、單核細胞胞漿【原理】第六頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【結(jié)果判斷】

-、+、++、+++、++++弱陽性顆粒小，分布稀疏陽性顆粒稍粗，分布較密集強陽性顆粒粗大，密布于整個胞漿第七頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【正常血細胞染色反應(yīng)】1.粒細胞系統(tǒng)

POX主要存在于粒系細胞中。分化差的原粒細胞陰性;

分化好的原粒細胞至中性成熟粒細胞各階段均呈陽性，陽性反應(yīng)程度隨細胞的成熟逐漸增強。

第八頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

2.單核細胞系統(tǒng)陰性或弱陽性

3.淋巴細胞系統(tǒng)紅細胞系統(tǒng)巨核細胞系統(tǒng)陰性漿細胞組織細胞

第九頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三第十頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【臨床評價】

急性髓細胞白血病急性淋巴細胞白血病

鑒別第十一頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

1.急性髓細胞白血?。?）急性粒細胞白血病

陽性反應(yīng)

（2）急性單核細胞白血病

弱陽性反應(yīng)第十二頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

2.急性淋巴細胞白血病

陰性反應(yīng)或陽性率<3%(殘留原粒細胞)第十三頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

中性粒細胞堿性磷酸酶染色

（neutrophilicalkaline

phosphatase，NAP）第十四頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三磷酸萘酚鈉（基質(zhì)中）中性粒細胞胞漿中NAP磷酸鈉α-萘酚

重氮鹽（堅牢藍鹽RR）＋紫黑色偶氮染料

（胞漿中）水解【原理】Kaplow偶氮偶聯(lián)法第十五頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【結(jié)果判斷】

胞漿中有紫黑色顆粒為陽性(+~++++）第十六頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【正常血細胞染色反應(yīng)】1.中性成熟粒細胞陽性反應(yīng)其他細胞呈陰性反應(yīng)第十七頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三第十八頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

2.NAP積分值計數(shù)100個成熟中性粒細胞（桿狀和分葉）,分別記錄其分級情況：

第十九頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三(-)0分

(+)1分

(++)2分

(+++)3分

(++++)4分

陽性率全部陽性反應(yīng)細胞之和

積分值各種陽性程度細胞的分值之和第二十頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

3.參考值

積分值35-70分

(各實驗室參考值不同)

第二十一頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【臨床評價】（1）細菌性感染與病毒性感染

（尤其是化膿性感染）

明顯增加無明顯變化第二十二頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三(2）類白血病反應(yīng)與慢性粒細胞白血病明顯增加明顯下降且常為零分，緩解時又上升到正常第二十三頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三過碘酸-雪夫反應(yīng)

(糖原染色)

（periodicacid-Schiffreaction，PAS）第二十四頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三雙醛基過碘酸雪夫試劑中的無色品紅

紫紅色化合物

(附于含多糖類的胞漿內(nèi))

乙二醇基(多糖類物質(zhì)含有)氧化【原理】第二十五頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【結(jié)果判斷】陽性胞漿內(nèi)紅色陽性物呈彌散狀、顆粒狀或塊狀。陰性胞漿內(nèi)無色或無顆粒,核淡綠。

第二十六頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【正常血細胞染色反應(yīng)】

1.粒細胞系統(tǒng)分化差的原粒細胞為陰性；分化好的原粒細胞至中性分葉核粒細胞各階段均呈陽性反應(yīng)，陽性程度隨細

胞的成熟逐漸增強。

陽性物呈細顆粒、均勻紅色。第二十七頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

2.紅細胞系統(tǒng)

陰性

3.單核細胞系統(tǒng)

絕大多數(shù)陽性呈細顆粒，有時分布于細胞邊緣的陽性顆粒較粗大。第二十八頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三4.淋巴細胞系統(tǒng)

大多數(shù)淋巴細胞呈陰性；

少于20%淋巴細胞呈粗顆粒狀或塊狀陽性。5.巨核細胞系統(tǒng)

呈顆粒狀或塊狀陽性（含血小板）。第二十九頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【臨床評價】1.紅血病或紅白血病幼紅細胞陽性巨幼細胞性貧血幼紅細胞陰性

第三十頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三第三十一頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

3.鑒別急性白血病類型（1）急性淋巴細胞白血病

陽性率20%-80%，呈紅色粗顆粒狀或塊狀。第三十二頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三（2）急性粒細胞白血病

少數(shù)陽性，呈細顆粒狀或均勻紅色。（3）急性單核細胞白血病

可陽性，呈細顆粒狀、彌散分布，有時胞質(zhì)邊緣處顆粒較粗大。第三十三頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三α-醋酸萘酚酯酶染色

（α-naphtholacetateesterase，α-NAE）第三十四頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三α-醋酸萘酚酯酶（細胞內(nèi)）α-醋酸萘酚（基質(zhì)液中）α-萘酚

重氮鹽（堅牢藍B）胞漿不溶性灰黑色或棕黑色沉淀水解【原理】第三十五頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【結(jié)果判斷】

胞漿內(nèi)有灰黑色或棕黑色彌散性顆粒狀沉淀為陽性。第三十六頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

氟化鈉抑制試驗

在基質(zhì)液中加入適量NaF,其余染色方法同上。兩種方法染色后用油鏡計數(shù)100或200個被檢細胞，分別計算出抑制前和抑制后的陽性率或陽性積分。第三十七頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

氟化鈉抑制率=抑制前陽性率或陽性積分-抑制后陽性率或陽性積分抑制前陽性率或陽性積分100%第三十八頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【正常血細胞染色反應(yīng)】1.單核細胞系統(tǒng)

原始單核細胞

分化差陰性分化好陽性

幼稚及成熟單核細胞陽性被氟化鈉抑制第三十九頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

2.粒細胞系統(tǒng)

原粒細胞陰性或弱陽性以下階段為弱陽性

3.淋巴細胞系統(tǒng)

多數(shù)陰性，少數(shù)弱陽性

不被氟化鈉抑制第四十頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三第四十一頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【臨床評價】急單急粒急性早幼粒急粒單急淋α-NAE+++或-或++陽性-++++弱+NaF被抑制不被不被抑制部分被抑制抑制部分未被抑制主要用于鑒別急性白血病類型第四十二頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三鐵染色

（ferricstain）第四十三頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三亞鐵氰化鉀

亞鐵氰化鐵(藍色沉淀在含F(xiàn)e部位)鐵＋酸性環(huán)境普魯士藍反應(yīng)

骨髓小粒中的含F(xiàn)e血黃素（細胞外鐵）骨髓中貯存鐵幼紅細胞內(nèi)的Fe（細胞內(nèi)鐵）原理第四十四頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三【結(jié)果判斷】

幼紅細胞核染色為鮮紅色,鐵粒呈藍綠色。

第四十五頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三細胞外鐵

低倍鏡觀察涂片尾部和骨髓小粒,細胞外鐵位于幼紅細胞外或骨髓小粒巨噬細胞漿內(nèi)，呈藍色顆粒狀、小珠狀或團塊狀。

第四十六頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

再用油鏡判斷陽性程度，根據(jù)鐵量多少分五級:

（-）（+）（++）（+++）（++++）第四十七頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三第四十八頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三細胞內(nèi)鐵

存在于中幼紅細胞、晚幼紅細胞及成熟紅細胞中的鐵。

油鏡下計數(shù)100個中幼紅細胞和晚幼紅細胞，記錄胞漿中含有藍色顆粒細胞的百分率。第四十九頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

根據(jù)細胞內(nèi)鐵顆粒的數(shù)目、大小、染色深淺和顆粒分布情況,將鐵粒幼紅細胞分為四型:

Ⅰ型

Ⅱ型

Ⅲ型

Ⅳ型第五十頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三細胞內(nèi)鐵第五十一頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三第五十二頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三1.細胞外鐵

+～++，約2/3人為++，約1/3人為+。2.細胞內(nèi)鐵

陽性率19%～44%Ⅰ型為主，少數(shù)為Ⅱ型（無環(huán)形鐵粒幼紅細胞和鐵粒紅細胞）【參考值】第五十三頁，共五十八頁，編輯于2023年，星期三

【臨床評價】1.診斷缺鐵性貧血、指導(dǎo)鐵劑治療

細胞內(nèi)、外鐵明顯減低甚至消失，經(jīng)鐵劑治療有效后，其細胞外鐵、內(nèi)鐵先后增多。第五十四頁，共五十八頁，