納洛酮腦保護(hù)作用的研究現(xiàn)狀

納洛酮腦保護(hù)作用的研究現(xiàn)在狀況;納洛酮是通過(guò)受體非特異的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑，對(duì)所有內(nèi)源性阿片肽受體均有拮抗作用。其為高脂溶性，能通過(guò)血-腦屏障。;自1981年Baskin等報(bào)道納洛酮能有效逆轉(zhuǎn)卒中病人的神經(jīng)損害后，有關(guān)阿片受體拮抗劑與中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的研究逐漸受到重視[1]。在嚴(yán)重應(yīng)激狀態(tài)下，機(jī)體釋放大量?jī)?nèi)源性阿片肽能引起腦灌注壓下降、腦組織缺血缺氧及呼吸抑制及意識(shí)障礙加重等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，納洛酮對(duì)神經(jīng)細(xì)胞有保護(hù)作用，并可促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)功能恢復(fù)，改善預(yù)后。現(xiàn)將納洛酮對(duì)神經(jīng)保護(hù)作用的相關(guān)研究進(jìn)展綜述如下。1納洛酮的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制1.1;逆轉(zhuǎn)腦外傷后腦組織內(nèi)鈣離子及興奮性氨基酸的升高;細(xì)胞內(nèi)外鈣離子平衡紊亂是缺血再灌注腦損傷發(fā)病機(jī)制中的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，這一觀點(diǎn)已成為人們的共識(shí)。細(xì)胞內(nèi)鈣〔[Ca2+]i〕升高既是腦損傷的后果，同時(shí)又是進(jìn)一步腦損傷的始動(dòng)因子，甚至有人稱[Ca2+]i升高為“細(xì)胞死亡的最終共同途徑〞。腦缺血發(fā)生后由于三磷酸腺苷(ATP)生成不足和生物膜去極化，導(dǎo)致電壓門控鈣通道開(kāi)放，與此同時(shí)興奮性氨基酸〔EAA〕也在細(xì)胞外大量堆積，激活其在細(xì)胞膜上的受體，使受體門控鈣通道也開(kāi)放，這兩個(gè)途徑造成細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流；由于生物膜的受損，線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜等細(xì)胞內(nèi)鈣池釋放鈣離子也增加，即細(xì)胞內(nèi)鈣釋放也增加。而此時(shí)鈣泵由于ATP缺乏不能正常的將細(xì)胞內(nèi)多余的鈣離子泵出，細(xì)胞內(nèi)鈣池也不能重新儲(chǔ)存鈣離子，即生理狀態(tài)下細(xì)胞對(duì)鈣離子的調(diào)控機(jī)制在此時(shí)失去作用，最終造成[Ca2+]i升高這一結(jié)局，又被稱為“細(xì)胞內(nèi)鈣超載〞[2]。有研究結(jié)果表明，一氧化氮〔NO〕的合成以及EAA的神經(jīng)毒性作用也與[Ca2+]i升高有密切關(guān)系。腦外傷后，由于血-腦屏障破壞，神經(jīng)細(xì)胞及血漿中的興奮性氨基酸進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞間隙，導(dǎo)致N-甲基-D-天門冬氨酸〔NMDA〕受體閘門鈣通道開(kāi)啟，大量鈣離子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，最終致細(xì)胞破壞[3]。Faden等報(bào)道腦外傷后腦組織鈣、谷氨酸和天門冬氨酸含量均明顯升高[4]。內(nèi)皮素〔ET〕是當(dāng)前發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)烈的血管收縮因子，腦外傷后，腦組織局部缺血缺氧、血栓形成及應(yīng)激性腎上腺素〔AD〕增高都可刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌ET，ET和神經(jīng)細(xì)胞膜上ET受體結(jié)合后，可激活細(xì)胞上磷脂酶A2〔PLA2〕和氣磷脂酶C〔PLC〕等，加速花生四烯酸的代謝，產(chǎn)生大量自由基，引起神經(jīng)細(xì)胞損害。Rysard等研究發(fā)現(xiàn)，阿片受體促效劑能顯著增加海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)自發(fā)的細(xì)胞內(nèi)鈣振蕩幅度，而納絡(luò)酮通過(guò)NMDA受體和L-型鈣通道可拮抗這一作用[5]。除此之外，Yang等發(fā)現(xiàn)，嗎啡對(duì)T-型鈣通道電流的影響可被納洛酮所阻斷，這一作用是與納洛酮對(duì)μ-受體的拮抗作用有關(guān)[6]。納洛酮通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性拮抗內(nèi)源性阿片肽受體，同時(shí)對(duì)細(xì)胞膜有穩(wěn)定作用，能抑制花生四烯酸代謝，促進(jìn)SOD生成，阻止脂質(zhì)過(guò)氧化，提高Na+-K+-ATP酶活性,抑制Ca2+內(nèi)流，使各種病理?yè)p害的最后通路被阻斷，這可能是腦保護(hù)作用的主要機(jī)制。1.2;改善神經(jīng)細(xì)胞的生物能量代謝;中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞的產(chǎn)能和做功都有獨(dú)特的特點(diǎn)，做功的最大特點(diǎn)是幾乎不涉及機(jī)械功和外分泌活動(dòng)；產(chǎn)能的最大特點(diǎn)是對(duì)能量的;，即氧和供能的底物〔葡萄糖〕的供應(yīng)失調(diào)異常敏感。這提示血糖的高低和血氧飽和度是決定神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)能過(guò)程的兩大要素，而氧又是腦組織代謝產(chǎn)能的關(guān)鍵因素。大腦缺血導(dǎo)致低氧和低葡萄糖供應(yīng)，并減少ATP的產(chǎn)生。很多依賴ATP的過(guò)程，如對(duì)維持代謝和離子內(nèi)穩(wěn)定有重要作用的細(xì)胞膜泵就會(huì)受到損害。能量代謝的水平，如丙酮酸和乳酸也受到嚴(yán)重的影響。因此，乳酸、丙酮酸及其比例〔L/P〕的變化常作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和研究腦缺血的重要生化指標(biāo)。納洛酮通過(guò)恢復(fù)腦缺血再灌注介導(dǎo)的細(xì)胞外積累的乳酸，減少丙酮酸并增加L/P之比，表明其有明顯的恢復(fù)能量代謝的作用。納洛酮也能通過(guò)影響腦缺血再灌注損傷〔ischemia/refusion,I/R〕所導(dǎo)致的復(fù)雜級(jí)聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生的有害代謝事件中的某些步驟，恢復(fù)線粒體活性或能量代謝[7]。除此之外Shibata等發(fā)現(xiàn)，μ受體促效藥、κ受體促效藥在缺氧/低血糖時(shí)可導(dǎo)致鼠海馬層2-去氧葡糖攝取降低。納洛酮能對(duì)抗缺氧/低血糖時(shí)引起糖攝取缺乏，因而顯示有神經(jīng)保護(hù)作用。相反，嗎啡卻呈現(xiàn)出使其惡化的作用。這些結(jié)果提示用納洛酮阻滯μ受體有對(duì)抗缺氧/低血糖時(shí)導(dǎo)致海馬回糖代謝減少的作用，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞起保護(hù)作用[8]。血管內(nèi)或腹膜內(nèi)給予納洛酮可使腦組織紀(jì)律血流量增加，改善腦組織的能量供應(yīng);，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)能量狀況的改善有益。1.3;降低體內(nèi)自由基水平;有研究結(jié)果顯示，體內(nèi)氧自由基蓄積能引起腦組織缺血再灌注損傷，其證據(jù)是：〔1〕缺血再灌注組織中脂質(zhì)過(guò)氧化物含量增多；〔2〕用氧自由基清除劑SOD等可明顯減輕缺血再灌注損傷；〔3〕給動(dòng)物注射能產(chǎn)生氧自由基的次黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶能引起與缺血再灌注損傷類似的變化[9]。缺血再灌注損傷中氧自由基產(chǎn)生主要來(lái)自有氧代謝的線粒體呼吸鏈過(guò)程中。除此之外呼吸鏈中的成分也都能產(chǎn)生。線粒體生成的氧自由基約有20%未被線粒體SOD岐化而逸出線粒體外，岐化生成的H2O2也易逸出線粒體進(jìn)入胞質(zhì)。在缺血尤其是再灌注時(shí)，由于機(jī)體產(chǎn)生大量自由基以及清除自由基能力的降低，過(guò)量的自由基攻擊細(xì)胞膜形成脂質(zhì)過(guò)氧化物，從而使膜離子轉(zhuǎn)運(yùn)紊亂，導(dǎo)致膜鈣通透性增高。缺血再灌注誘發(fā)氧自由基過(guò)量形成，導(dǎo)致機(jī)體氧化-抗氧化機(jī)制失衡，最終造成細(xì)胞及臟器的損傷。近期實(shí)驗(yàn)結(jié)果的直接和間接證據(jù)表明,氧自由基在缺血再灌注時(shí)由于代謝反應(yīng)的衰竭而升高。而且，自由基清除劑、抗氧化酶等在缺血再灌注腦損傷時(shí)減少。因?yàn)樵诙虝喝毖獡p傷時(shí)氧自由基的潛在參與，伴隨著腦組織缺血再灌注損傷，它將表現(xiàn)為抗氧化酶激活的特征[7]。;納洛酮能降低腦組織缺血再灌注損傷后的過(guò)氧化物等自由基的產(chǎn)生。另外，納洛酮后，缺血再灌注損傷后腦組織內(nèi)Mn-SOD、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性也明顯降低，而這些酶在缺血再灌注損傷后通常是異常升高的。一般認(rèn)為，當(dāng)缺血再灌注損傷后氧自由基的改變激發(fā)了周圍組織細(xì)胞的代償性反應(yīng)機(jī)制，即抗氧化酶活性相應(yīng)增加，從而達(dá)到兩者在體內(nèi)的平衡；抗氧化酶活性下降可以顯示受損組織內(nèi)代謝性自由基產(chǎn)物減少。納洛酮減少體內(nèi)自由基水平，是因?yàn)榧{洛酮能有效改善缺血再灌注損傷后內(nèi)源性抗氧化酶對(duì)過(guò)度升高的自由基清除抑或是納洛酮本身能減少自由基的產(chǎn)生，或者是納洛酮恢復(fù)受損組織的代謝反應(yīng)的結(jié)果，仍無(wú)明確定論[7]。;納洛酮對(duì)動(dòng)物局灶腦缺血模型有神經(jīng)保護(hù)作用，納洛酮也可增加腦血流量，減少腦缺血時(shí)間，增加腦缺血?jiǎng)游锏拇婊盥省．?dāng)前研究結(jié)果證實(shí)：〔1〕納洛酮顯著減少梗死面積的作用是與其恢復(fù)腦缺血再灌注后線粒體活性有關(guān)，納洛酮對(duì)由缺血再灌注介導(dǎo)的內(nèi)源性抗氧化酶活性改變的影響，對(duì)過(guò)度產(chǎn)生的自由基是防御或代償?shù)姆磻?yīng)；〔2〕納洛酮能夠降低缺血再灌注損傷早期細(xì)胞外丙酮酸水平，增加乳酸/丙酮酸比值，從而改善和保護(hù)生物能量代謝，據(jù)此導(dǎo)致減少自由基從線粒體電子傳遞鏈外漏；〔3〕納洛酮最主要的作用可能是減少自由基的產(chǎn)生[7]。1.4;抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化及炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生;中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)與神經(jīng)退行性病變的發(fā)生密切相關(guān)，如Alzheimer病、多發(fā)性硬化、AIDS性癡呆、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化及創(chuàng)傷后腦缺血損傷。在這些疾病發(fā)病過(guò)程中，大腦定居的免疫細(xì)胞——小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮了重要作用。大量研究結(jié)果證實(shí)，活化的小膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生大量的NO、腫瘤壞死因子〔TNF-α〕、白細(xì)胞介素〔IL-β〕、自由基及類花生酸類物質(zhì)〔eicosanoids〕等炎癥因子和潛在的細(xì)胞毒性因子，引發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)是神經(jīng)變性疾病發(fā)展早期主要事件，過(guò)量生成/積聚的炎癥因子與神經(jīng)細(xì)胞死亡有關(guān)[10]。因此，抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活性被認(rèn)為是研究神經(jīng)保護(hù)策略中的主要焦點(diǎn)之一。;細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖〔LPS〕能高度活化小膠質(zhì)細(xì)胞并產(chǎn)生NO、TNF-α、IL-β和超氧化物等致炎因子，從而引起神經(jīng)元的損傷。因此，常把能否逆轉(zhuǎn)LPS引起的小膠質(zhì)細(xì)胞活化作為評(píng)價(jià)神經(jīng)保護(hù)作用的客觀指標(biāo)。Liu等對(duì)納洛酮預(yù)處理的神經(jīng)元-膠質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)細(xì)胞中加入LPS，結(jié)果顯示，納洛酮能抑制脂多糖引發(fā)的小膠質(zhì)細(xì)胞活化，顯著降低LPS引發(fā)的NO、TNF-α的釋放，明顯改善LPS的神經(jīng)毒性。作者還發(fā)現(xiàn)，對(duì)阿片受體無(wú)活性的納洛酮對(duì)映結(jié)構(gòu)體〔+〕—納洛酮對(duì)