抗原抗體及其結(jié)合反應(yīng)演示文稿

抗原抗體及其結(jié)合反應(yīng)演示文稿當(dāng)前1頁，總共35頁?？乖贵w及其結(jié)合反應(yīng)當(dāng)前2頁，總共35頁。第一節(jié)抗原一、抗原的特性免疫原性、免疫反應(yīng)性特異性二、用于免疫測定的抗原分類天然、合成多肽、基因重組當(dāng)前3頁，總共35頁。第二節(jié)抗體一、抗體的特性特異性、多樣性、免疫原性二、用于免疫測定的抗體分類多克隆、單克隆、基因工程三、抗體產(chǎn)生的規(guī)律初次應(yīng)答、再次應(yīng)答當(dāng)前4頁，總共35頁。第三節(jié)抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng):指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)?？乖砦慌c抗體高變區(qū)間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)抗原表位與抗體高變區(qū)的緊密接觸抗原抗體之間的結(jié)合力親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體物質(zhì)基礎(chǔ)當(dāng)前5頁，總共35頁。一、抗原抗體結(jié)合力靜電引力范德華引力氫鍵疏水作用力抗原抗體結(jié)合力示意圖當(dāng)前6頁，總共35頁。１.靜電引力（electrostaticforces）抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團(tuán)之間相互吸引的力。又稱為庫倫引力當(dāng)前7頁，總共35頁。2.范德華引力（VonderWaalsforces）

抗原和抗體相互接近時(shí)，由于分子的極化作用而出現(xiàn)的引力。

范德華引力<靜電引力當(dāng)前8頁，總共35頁。3.氫鍵結(jié)合力供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力供氫體：羧基、氨基和羥基受氫體：羧基氧、羧基碳和肽鍵氫鍵具有高度的方向性當(dāng)前9頁，總共35頁。4.疏水作用力（疏水鍵）

兩個(gè)疏水基團(tuán)在水溶液中相接觸時(shí)，由于對(duì)水分子排斥而趨向聚集力。當(dāng)前10頁，總共35頁。二、抗原抗體的親和力和親合力抗原抗體親和力示意圖當(dāng)前11頁，總共35頁。抗原抗體親合力示意圖當(dāng)前12頁，總共35頁。三、液相中抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)抗原抗體復(fù)合物

(疏水膠體)可見反應(yīng)電解質(zhì)

抗原

(親水膠體)抗體﹢當(dāng)前13頁，總共35頁。四、固相表面抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)1.抗原抗體結(jié)合反應(yīng)時(shí)間2.反應(yīng)體積3.解離速度4.固相化抗原或抗體的構(gòu)象當(dāng)前14頁，總共35頁。第四節(jié)抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的特點(diǎn)特異性可逆性比例性階段性當(dāng)前15頁，總共35頁。

親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體可見反應(yīng)當(dāng)前16頁，總共35頁。一、特異性抗原抗體反應(yīng)特異性示意圖當(dāng)前17頁，總共35頁。特異性示意圖當(dāng)前18頁，總共35頁。交叉反應(yīng)（crossreactions）抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖當(dāng)前19頁，總共35頁。二、可逆性可逆性：抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性影響因素：抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親合力環(huán)境因素對(duì)復(fù)合物的影響當(dāng)前20頁，總共35頁。

【Ag】+【Ab】【Ag-Ab】

解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件：低pH、高濃度鹽等。Ab1當(dāng)前21頁，總共35頁。比例性：抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系最適比：沉淀物最多時(shí)的抗原抗體的濃度比或量比等價(jià)帶:

抗原與抗體分子比例合適范圍前帶：

抗體過量后帶：

抗原過量三、比例性當(dāng)前22頁，總共35頁。

抗原抗體反應(yīng)比例性示意圖當(dāng)前23頁，總共35頁。四、階段性第一階段：特異性結(jié)合階段第二階段：反應(yīng)可見階段當(dāng)前24頁，總共35頁。第五節(jié)影響抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的因素抗原抗體本身因素反應(yīng)基質(zhì)因素實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素當(dāng)前25頁，總共35頁。一、抗原抗體本身因素抗原:理化性狀、表位種類和數(shù)目抗體:來源、特異性、親和性、效價(jià)當(dāng)前26頁，總共35頁。來源R型Ab：等價(jià)帶寬，易出現(xiàn)可見反應(yīng)。H型Ab：等價(jià)帶窄，易出現(xiàn)前帶或后帶McAb:不宜用于凝集和沉淀反應(yīng)。濃度：是相對(duì)Ag而言，比例要合適，故實(shí)驗(yàn)前

需滴定，以求最適Ag與Ab比例。

特異性與親和力：關(guān)鍵因素，選擇特異性與親和力高的Ab。當(dāng)前27頁，總共35頁。二、反應(yīng)基質(zhì)因素非特異性因素，如蛋白、鹽、藥物等當(dāng)前28頁，總共35頁。三、實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素電解質(zhì):0.85%生理鹽水或緩沖液酸堿度:pH6~8溫度:37℃最適當(dāng)前29頁，總共35頁。(一）電解質(zhì)作用：中和膠體表面電荷，破壞水化層，使Ag-Ab聚集。常用：0.85%NaCl溶液，緩沖液、Ca2+、Mg2+等。當(dāng)前30頁，總共35頁。（二）酸堿度

抗原抗體反應(yīng)中一般以pH6-8為宜，有補(bǔ)體參與的反應(yīng)最適pH為7.2-7.4酸凝集：當(dāng)pH為3左右時(shí)，接近細(xì)菌Ag的等電點(diǎn)，可出現(xiàn)非特異性凝集。當(dāng)前31頁，總共35頁。（三）溫度

最適溫度為37℃或室溫18-25℃為宜。若溫度高于56℃，可導(dǎo)致已結(jié)合了的抗原抗體復(fù)合物解離，甚至分子變性。當(dāng)前32頁，總共35頁?？乖贵w反應(yīng)類型反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷凝集反應(yīng)直接凝集試驗(yàn)觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗(yàn)同上抗球蛋白試驗(yàn)同上沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀，檢測濁度免疫電泳技術(shù)觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體溶血試驗(yàn)觀察測定溶血現(xiàn)象補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)同上當(dāng)前33頁，總共35頁。反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷中和反應(yīng)病毒中和試驗(yàn)檢測病毒感染性毒素中和試驗(yàn)檢測外毒素毒性標(biāo)記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測放射性強(qiáng)度酶免疫技術(shù)檢測酶底物顯