核醫(yī)學(xué)放射自顯影術(shù)ARG課件

放射自顯影術(shù)（ARG）

一、發(fā)展史

1867年Niepledestvicter發(fā)展鈾鹽能使膠片感光，但引出錯誤的結(jié)論1896年H.Becqueral證實上述是輻射引起。1898年Bq.和居里夫婦發(fā)現(xiàn)210po，226Ra1924年Lacassagae首次研究鈾在生物體內(nèi)分布1939—1945各種記錄粒子徑跡的專用乳膠1946年Belanger和lebland—更好的液體乳膠，ARG分辨力大為提高。1950年P(guān)elc揭膜乳膠1956年 超微結(jié)構(gòu)及電鏡ARGARG的特點：定位準確敏感度高

可定量測量，還可做形態(tài)定量分析

不需復(fù)雜設(shè)備，應(yīng)用廣泛。

ARG的一般過程：引入示蹤劑→制備標本→制備ARG→曝光→照像處理→標本染色→分析各類材料的性質(zhì)和應(yīng)用1、乳膠及制品a、液體核乳膠：粘稠、10℃以下呈膠凍狀，40℃溫溶，極限50℃，出廠本底3個銀粒/1000μm應(yīng)用：核4——所有帶電粒子核2——a粒子 HW3—4——電鏡ARGb、干板：宏觀及光鏡ARGc、揭膜乳膠：光鏡定量ARGd、國外產(chǎn)品：美Eastman—KodakNTE英Kodak英IlfordL-4比利時GevaertNuc-307銀粒0.07-0.4Exp-6M按敏感度分為：0型：a粒子2型：3H,125I5型：用于低電離作用的β粒子徑跡ARG2、電影正片or幻燈片：

粒徑1μm，單面涂乳膠，厚15μm，外加保護層，除3H以外的各種核素宏觀ARG3、X光片：粒徑2.5μm，敏感性強，但分辨力低，宏觀ARG，低能核素不適應(yīng)。4、氚片：進口LKB產(chǎn)品，國產(chǎn)也有了，粒徑1μm，暗室安全光相當耐受，宏觀3HARG5、彩色乳膠片干板：彩顯ARG1、潛影形成：2、潛影消退：3、顯影及顯影劑：最常用的顯影劑：D-196和D-191）米吐爾（硫酸甲基對氨基苯酸）主份，強還原劑 2）亞硫酸鈉：保護劑，能中和還原劑的氧化物，延長顯影效力，還可溶解部分銀粒，減少其相互結(jié)合而導(dǎo)致粒變粗3）海德爾（以苯二酚）：強還原劑，但與米吐爾不同。但與米吐爾不同。它還原力低，影像出現(xiàn)緩慢，可使影像密度增加

4）碳酸鈉：促進劑，增加顯影5）溴化鉀：抑制劑，抑制未感光的銀鹽，防止溴折出而增加灰霧，從而增加顯象的反差，使力象更清晰

影響顯影的因素： （1）顯影時間 （2）顯影溫度 （3）顯影液的攪動 （4）顯影液的效力4、定影：海波（硫代硫酸鈉）溶去未形成潛影的銀晶體亞硫酸鈉：保護劑，能與酸形成亞硫酸氫根離子，從而抑制海波被酸分解。醋酸：停顯劑：終止顯影液繼續(xù)使用。鉀礬：堅膜劑，防止乳膠在定影和水洗過程中因膨脹而造成脫落，防止操作中的擦傷or劃痕。5、水洗及干燥：洗去雜質(zhì)等，防止析出硫磺，它與空氣中水份氧化為硫酸，影象變黃。 干燥：人工電吹風(fēng)，or自然干燥，防空氣灰法沾染。

4、EC、IT：在電子俘獲和內(nèi)轉(zhuǎn)換的衰變中產(chǎn)生的γ、X線不被乳膠記錄，但俄歇電子和內(nèi)轉(zhuǎn)換電子與β粒子的性質(zhì)相同，可使乳膠感光。純β衰變的核素：3H、14C、45Ca、35S、32Pβr——：131IEC——：125IIT——：99mTc徑跡ARG：乳膠厚度超過射線粒子的射程，記錄到的是粒子的全部徑跡，物理學(xué)研究范疇。銀粒密度ARG：薄的乳膠層，只要求留下徑跡超始部分的銀粒。 ARG常用核素，能量及射程P270表14—6（參考書夏宗勤主編實驗核醫(yī)學(xué)與核藥學(xué)）五、ARG的分辨力、效率、本底及示蹤1、分辨力：定義，區(qū)別示蹤物在組織中準確位置的能力。區(qū)分兩個鄰近結(jié)構(gòu)（放射源） 表示方法：半距離HD半半徑HR

它是反映影象散射情況的常用指標。 應(yīng)注意：HD、HR指反映顆粒的散射情況，并不說明ARG所能分辨的最小距離或源的大小。 HD、HR越小，分辨力越高3H光鏡ARGHD在0.3——0.4μm電鏡ARGHD在80——180nm影響分辨力的因素：a、銀粒的大小b、乳膠厚度c、標本與乳膠間距d、射線能量e、曝光時間f、顯影時間g、標本厚度h、本底3、本底：沒有放射性時的銀顆粒 本底增高的因素：a、紅燈過亮b、外環(huán)境輻射c、顯影時間過長d、乳膠受到壓力或張力的作用e、標本中有還原物f、乳膠保存過久4、示蹤劑用量與曝光時間一般原則：輻射強時，曝光時間可縮短，而射線弱時，曝光時間相應(yīng)延長。影響因素：a、核素的性質(zhì)b、核素引入的途徑c、示蹤劑劑型d、核素在體內(nèi)的分布和蓄積狀況e、標本制備時間長時，核素易丟失f、感光材料的靈敏度目前最常用的是：實驗確定曝光法。六、ARG的各種方法1、宏觀ARG：

接觸法：適于磨片，動物整體切片植物片2、光鏡ARG： 用于非擴散性示蹤劑（石蠟切片）浸膜法：從乳膠中提出來 裱貼法：在溫水中撈起標本和干板揭膜乳膠法：在溫水中撈起標本和揭膜用于擴散性示蹤劑（冰凍切片）：融表法：冷沾取切片 絞鏈接觸法：復(fù)雜ARG圖像閱讀分析圖像中銀粒沉著處，反映標本中核素的存在部位，也表示標記物定位。一、宏觀ARG：可直接看or放大鏡，黑度表示放素所在部位，越黑說明放射性越強，含某物標記物越多，如要精確定位，必須與原標本重合在一起觀察。二、微觀ARG：a、銀粒與組織結(jié)構(gòu)的關(guān)系用微調(diào)來確定。b、銀粒與其它顆粒的區(qū)別，用改變焦點來觀察它們的大小，顏色和外形。c、區(qū)別標本內(nèi)與標本外乳膠中的銀粒d、定量以銀粒計數(shù)表示。

定量分析法：預(yù)先制作一套已知活度梯度的放射源標準系列片，與待測標本在同一張乳膠上曝，顯，定。 圖像用黑度計or光密度計讀數(shù)，以標準梯度活度為縱坐標，光密度值為橫坐標，繪一條標準曲線，即可定量。還有如下定量法：視測顆粒計數(shù)：顆粒數(shù)/cm 顯微光度計測定：電視掃描裝置（三）亞微觀ARG： 電鏡ARG，它圖象中銀粒呈扭曲的絲團狀，故易辨認。

八、熒光增敏微觀ARG 適于顯影不太清楚or放射性較弱的組織AGR。 特點：在乳膠中加入了閃爍劑。九、雙標記ARG 當需要研究機體同時攝入的多種放素摻入細胞的區(qū)別時，必須用雙標記。