培養(yǎng)基與微生物的分離

培養(yǎng)基與微生物的分離第1頁/共18頁第2頁/共18頁第3頁/共18頁一、培養(yǎng)基的類型和作用劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運動、分類、鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計數、保藏菌種第4頁/共18頁劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途化學成分天然培養(yǎng)基含化學成分不明確的天然物質工業(yè)生產合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學成分已知的化學物質配成)微生物的分類、鑒別第5頁/共18頁劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途用途選擇培養(yǎng)基允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)酵母菌或霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽鑒別培養(yǎng)基根據微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品鑒別不同種類的微生物，如用伊紅—美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)第6頁/共18頁科目一考試/2016年科目一模擬考試題科目二考試2016年科目二考試技巧、考試內容、考試視頻第7頁/共18頁二、微生物的分離與鑒定微生物的分離方法有很多種，本專題中常用的是：平板劃線法、稀釋涂布平板法、微生物的選擇培養(yǎng)等。針對不同微生物的特點選擇不同的方法，對目的微生物進行篩選。以下是尿素分解菌和纖維素分解菌的分離與鑒定比較。第8頁/共18頁尿素分解菌的分離與鑒定纖維素分解菌的分離與鑒定分離選擇條件利用尿素為唯一氮源利用纖維素為唯一碳源鑒定原理細菌等微生物合成脲酶，將尿素分解產生NH3，使pH升高，加入酚紅變紅色分解纖維素的微生物產生纖維素酶，將纖維素分解為纖維二糖或葡萄糖，使纖維素—剛果紅復合物降解而出現透明圈步驟土壤取樣→制備培養(yǎng)基→樣品梯度稀釋→涂布平板→培養(yǎng)觀察→進一步鑒定土壤取樣→制備培養(yǎng)基→選擇培養(yǎng)→富集培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布培養(yǎng)→剛果紅染色→挑取菌落→進一步鑒定第9頁/共18頁1．(2011·重慶高考)下列有關細菌培養(yǎng)的敘述，正確的是

(

)A．在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌B．在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進細菌生長C．向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進破傷風桿菌的生長D．在半固體培養(yǎng)基中接種細菌培養(yǎng)后可以觀察其運動解析：單個菌落中只含有一種細菌；青霉素抑制細菌生長，而對真菌沒有影響；破傷風桿菌是厭氧型細菌，通入氧氣會抑制其生長。答案：D第10頁/共18頁2．微生物與人類關系密切。雖然有些微生物能使動植物患病，但多數微生物對人類是有益的，請回答下列有關問題：(1)下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方。A培養(yǎng)基：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g第11頁/共18頁

B培養(yǎng)基：纖維素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO4·7H2OKCl酵母膏水解酪素5g1g1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g0.5g第12頁/共18頁將上述兩種培養(yǎng)基中的物質分別溶解后，均用蒸餾水定容到1000mL。①如果要進行土壤中分解尿素的細菌的分離，則需要選擇上述哪種培養(yǎng)基？________，該培養(yǎng)基能分離尿素分解菌的原因是__________________________________________。②在該培養(yǎng)基中可加入________指示劑，根據指示劑的顏色可鑒定該種細菌能夠分解尿素。③從功能上來看，上述兩種培養(yǎng)基均屬于________培養(yǎng)基。第13頁/共18頁(2)把牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入平板，等培養(yǎng)基冷凝后，應將平板________放置，這樣做的目的是可防止________造成污染。(3)微生物接種的方法很多，平板劃線法操作結束時，為什么仍需要灼燒接種環(huán)？______________________________。(4)微生物培養(yǎng)過程中還有什么方法或步驟要防止其他微生物污染？________________、_______________________、________________。第14頁/共18頁解析：在進行土壤中分解尿素的細菌的分離時，培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，只有能分解尿素的微生物才能生長繁殖，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。接種時及接種操作結束后，仍需要灼燒接種環(huán)以殺死接種環(huán)上殘留的細菌，避免污染環(huán)境和感染操作者。答案：(1)①A培養(yǎng)基培養(yǎng)基中尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生長繁殖②酚紅③選擇(2)倒過來皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基(3)殺死接種環(huán)上殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者(4)培養(yǎng)基滅菌接種環(huán)境滅菌接種過程無菌操作第15頁/共18頁KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂15g將上述物質溶解后，用自來水定容到1000mL第16頁/共18頁(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________，實驗需要振蕩培養(yǎng)