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一、顯微判定慣用方法顯微判定組織判定:觀察藥材切片或磨片,判別其組織特征,適合于完整藥材或粉末特征相同同屬藥材判別;粉末判定:觀察藥材粉末制片或解離片判別其細(xì)胞分子及內(nèi)含物特征,適合于破碎、粉末狀藥材或中成藥判別。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第1頁(yè)判定者:需含有植(動(dòng))物解剖基本知識(shí),掌握制片基本技術(shù)。判定時(shí):依據(jù)觀察對(duì)象和目標(biāo),選擇含有代表性藥材,制備不一樣顯微制片,依法進(jìn)行判別。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第2頁(yè)植物性生藥根、根莖、莖藤、皮、葉等類,制作橫切片觀察,必要時(shí)制縱切片;果實(shí)、種子類須作橫切片及縱切片觀察;木類須觀察橫切、徑向縱切及切向縱切三個(gè)面。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第3頁(yè)判定葉、花、果實(shí)、種子、全草等類生藥,可取葉片、萼片、花冠、果皮、種皮制表面片,以觀察各部位表面(皮)特征??蓪⑸幾鞣勰┢M(jìn)行觀察。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第4頁(yè)可制解離組織片,以觀察一些細(xì)胞組織,如纖維、石細(xì)胞、導(dǎo)管等。對(duì)于中成藥,可直接取目標(biāo)物,選取不一樣試液制片,觀察粉末含有判別意義組織、細(xì)胞及細(xì)胞后含物顯微特征。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第5頁(yè)切片類型橫切片或縱切片切片方法徒手切片:10~20μm,最為簡(jiǎn)便、快速,較為慣用。石蠟切片:便于教學(xué)用?;咔衅河袑S脵C(jī)器切制。冰凍切片:宜于科研,不利于教學(xué),無法染色。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第6頁(yè)解離組織片:可用氫氧化鉀法,使細(xì)胞間質(zhì)溶解,細(xì)胞分離后觀察目標(biāo)物。表面片:葉、花、果實(shí)、種皮等多用,可觀察各部位表皮特征。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第7頁(yè)粉末片:水合氯醛透化片;水合氯醛不透化片;醋酸甘油片或稀甘油片或水裝片。磨片:觀察礦物藥,相當(dāng)于固定片。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第8頁(yè)目鏡測(cè)微尺觀察細(xì)胞和后含物時(shí),常需要測(cè)量其直徑、長(zhǎng)短(以μm計(jì)),作為判定依據(jù)之一,測(cè)量可用目鏡測(cè)微尺進(jìn)行。先將目鏡測(cè)微尺用載臺(tái)測(cè)微尺標(biāo)化,計(jì)算出每一小格μm數(shù),應(yīng)用時(shí)將測(cè)得物小格數(shù),乘以每一小格μm數(shù),即得所欲測(cè)定物大小。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第9頁(yè)二、顯微判定關(guān)鍵點(diǎn)(一)根類生藥1、根類生藥組織結(jié)構(gòu)雙子葉植物:多為次生結(jié)構(gòu),表層為木栓組織;皮層普通已不存在;栓內(nèi)層發(fā)達(dá)呈皮層樣,稱次生皮層;韌皮部較發(fā)達(dá);形成層環(huán)多顯著;顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第10頁(yè)木質(zhì)部由導(dǎo)管、管胞、木纖維、木薄璧細(xì)胞及木射線組成;中央大多無髓。少數(shù)為初生結(jié)構(gòu),皮層寬,中柱小,木質(zhì)部束及韌皮部束數(shù)目少,相間排列,初生木質(zhì)部呈星芒狀,普通無髓。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第11頁(yè)有異常結(jié)構(gòu)(三生結(jié)構(gòu)):何首烏根形成層環(huán)外方有數(shù)個(gè)復(fù)合維管束;牛膝根有數(shù)輪同心排列維管束(維管束環(huán)束間形成層不顯著);商陸根有數(shù)輪同心排列形成層環(huán)及其所形成三生結(jié)構(gòu);
顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第12頁(yè)單子葉植物
無木栓組織,其表皮細(xì)胞外壁有時(shí)增厚,也有表皮發(fā)育成數(shù)列根被細(xì)胞,壁木栓化或木化;皮層寬廣,占根大部分,內(nèi)皮層凱氏點(diǎn)通常顯著;中柱小,木質(zhì)部束及韌皮部束數(shù)目多,相間排列成一圈。中央有髓。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第13頁(yè)根類生藥常有分泌組織,大多分布于韌皮部,有乳管、樹脂道、油室或油管、油細(xì)胞等。根類生藥中常有各種草酸鈣結(jié)晶,如簇晶、方晶、砂晶或針晶等,兼有簇晶與針晶或砂晶與簇晶共生。纖維、石細(xì)胞及淀粉粒、菊糖有沒有及其形狀亦應(yīng)注意。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第14頁(yè)2、根類粉末生藥觀察木栓組織:多見,注意木栓細(xì)胞表面觀形狀、顏色、壁厚度,有可見木栓石細(xì)胞(如黨參)。導(dǎo)管:普通較粗,注意其類型、直徑、導(dǎo)管分子長(zhǎng)度及末端壁穿孔形狀及排列等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第15頁(yè)石細(xì)胞:應(yīng)注意形狀、大小、細(xì)胞壁增厚形態(tài)和程度、紋孔形狀及大小、孔溝密度等特征。
纖維:觀察時(shí)注意纖維類型、形狀、長(zhǎng)短粗細(xì)等;注意纖維束周圍細(xì)胞是否含結(jié)晶形成晶鞘纖維。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第16頁(yè)分泌組織:注意分泌細(xì)胞、分泌腔(室)、分泌管(道)及乳汁管等類型、形狀、顏色、周圍細(xì)胞排列及形態(tài)等特征。結(jié)晶:大多為草酸鈣結(jié)晶,偶有含硅質(zhì)塊,應(yīng)注意結(jié)晶類型、大小、排列及含晶細(xì)胞形態(tài)等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第17頁(yè)淀粉粒:普通較小,應(yīng)注意淀粉粒多少、形狀、類型、大小、臍點(diǎn)形狀及位置、層紋等特征。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第18頁(yè)(二)根莖類生藥1、根莖類生藥組織結(jié)構(gòu)
依據(jù)中柱、維管束類型,區(qū)分其為蕨類植物、雙子葉植物或單子葉植物根莖。蕨類植物根莖:外層為厚壁性表皮及下皮細(xì)胞,基本組織較發(fā)達(dá)。中柱類型有:原生中柱、雙韌管狀中柱及網(wǎng)狀中柱等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第19頁(yè)雙子葉植物根莖:有木栓組織;皮層中有時(shí)可見根跡維管束;中柱維管束無限外韌型;中心有髓。少數(shù)種類有三生結(jié)構(gòu),髓部有復(fù)合維管束。單子葉植物根莖:外層為表皮;皮層中有葉跡維管束;內(nèi)皮層顯著;中柱中散有多數(shù)有限外韌維管束,也有周木維管束(如菖蒲);多含草酸鈣針晶束,存在于黏液細(xì)胞中。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第20頁(yè)2、根莖類粉末生藥觀察:注意鱗莖、塊莖、球莖常含多量較大淀粉粒,其形狀、大小、臍點(diǎn)、層紋以及復(fù)粒等特征是判別主要依據(jù);鱗莖鱗葉表皮??刹煲姎饪?;顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第21頁(yè)單子葉植物根莖較易見到環(huán)紋導(dǎo)管;蕨類植物根莖普通只有管胞,無導(dǎo)管。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第22頁(yè)(三)莖藤類生藥1.莖藤類生藥組織結(jié)構(gòu)
依據(jù)維管束類型及排列:雙子葉植物莖單子葉植物莖顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第23頁(yè)雙子葉植物莖:草質(zhì)莖:有表皮;皮層為初生皮層,有可見內(nèi)皮層;中柱鞘常分化為纖維或夾雜有石細(xì)胞;束中形成層顯著;次生韌皮部大多成束狀或板狀,少數(shù)呈筒狀;髓射線較寬;髓較大。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第24頁(yè)木質(zhì)莖:外層為木栓組織;皮層多為次生皮層;中柱鞘厚壁組織多連續(xù)成環(huán)或斷續(xù);形成層環(huán)顯著;次生韌皮部及次生木質(zhì)部呈筒狀結(jié)構(gòu);射線較窄,細(xì)胞壁常木化;髓較小。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第25頁(yè)單子葉植物莖:最外層為表皮,基本組織中散生多數(shù)有限外韌維管束,中央無髓。裸子植物莖:木質(zhì)部主為管胞,通常無導(dǎo)管。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第26頁(yè)2.藤莖類粉末生藥觀察除了無葉肉組織外,其它組織普通都可能存在。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第27頁(yè)(四)皮類生藥1.皮類生藥組織結(jié)構(gòu)皮類生藥:指裸子植物和雙子葉植物形成層以外部分,以莖干皮種類較多,根皮、枝皮種類較少。木栓組織:注意層數(shù)、顏色、細(xì)胞壁增厚程度;顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第28頁(yè)皮層及韌皮部:有厚壁組織存在,是為判定特征,要注意纖維和石細(xì)胞形狀、大小、壁厚度、排列形式等。皮類生藥常有樹脂道、油細(xì)胞、乳管等分泌組織以及草酸鈣結(jié)晶。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第29頁(yè)2.皮類粉末生藥觀察主要有木栓細(xì)胞、纖維、石細(xì)胞、分泌組織及草酸鈣結(jié)晶等,都有判別意義。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第30頁(yè)(五)木類生藥1.木類生藥組織結(jié)構(gòu)從三個(gè)切面觀察組織結(jié)構(gòu):橫切面:年輪、木射線寬度(細(xì)胞列數(shù))、密度,導(dǎo)管等;徑向縱切面:木射線高度、長(zhǎng)度及細(xì)胞類型等;顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第31頁(yè)切向縱切面:觀察木射線形狀(梭形或線狀)、寬度、高度及類型(單列或多列),同時(shí)觀察導(dǎo)管、木纖維等。2、木類粉末生藥觀察以導(dǎo)管、韌型纖維、纖維管胞、木薄壁細(xì)胞形態(tài)特征以及細(xì)胞后含物為主要判別點(diǎn)。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第32頁(yè)(六)葉類生藥1.葉類生藥組織結(jié)構(gòu)橫切片觀察:表皮:要注意上、下表皮細(xì)胞形狀、大小、外壁、氣孔、角質(zhì)層厚度,以及有沒有內(nèi)含物,尤其是毛茸類型及其特征。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第33頁(yè)葉肉:注意柵欄組織細(xì)胞形狀、大小、層數(shù)及所占葉肉百分比和分布;葉脈:觀察維管組織形狀、類型以及周圍或韌皮部外側(cè)有沒有纖維層。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第34頁(yè)2.葉表面制片主要觀察表皮細(xì)胞、氣孔及各種毛茸全形。注意上、下表皮細(xì)胞形狀,垂周壁及有沒有紋孔,角質(zhì)層紋理,氣孔類型及副衛(wèi)細(xì)胞數(shù)。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第35頁(yè)3.葉類粉末生藥觀察與葉表面制片基本一致,但毛茸多碎斷,粉末中還可見到葉片橫斷面及晶體。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第36頁(yè)(七)花類生藥1.花類生藥顯微判定
依據(jù)不一樣生藥,將苞片、花萼、花冠、雄蕊或雌蕊等分別作表面制片,或?qū)⑼暾ㄗ鞅砻嬷破^察。苞片、花萼結(jié)構(gòu),與葉相同。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第37頁(yè)2.花類粉末生藥觀察花粉粒:是判別花類生藥主要特征,注意其形狀、大小、萌發(fā)孔形態(tài)、外壁結(jié)構(gòu)及紋飾(理)等特征?;ǚ勰覂?nèi)壁細(xì)胞,毛茸;注意草酸鈣結(jié)晶、分泌組織及色素細(xì)胞等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第38頁(yè)(八)果實(shí)類生藥1.果實(shí)類生藥組織結(jié)構(gòu)觀察果皮組織特征,由子房壁分化和增大形成真果果皮,可分為:外果皮:相當(dāng)于葉表皮,為1列表皮細(xì)胞,需注意問題同葉類。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第39頁(yè)中果皮:相當(dāng)于葉肉,為多列薄壁細(xì)胞,有細(xì)小維管束散布。內(nèi)果皮:相當(dāng)于葉表皮,變異較大,有為1層薄壁細(xì)胞,有散在石細(xì)胞,有為結(jié)晶細(xì)胞層,也有分化為纖維層。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第40頁(yè)2.果實(shí)類粉末生藥觀察外果皮細(xì)胞形狀、垂周壁增厚情況、角質(zhì)層紋理以及非腺毛、腺毛有沒有及中果皮、內(nèi)果皮細(xì)胞形態(tài)等特征。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第41頁(yè)(九)種子類生藥1.種子類生藥組織結(jié)構(gòu)重點(diǎn)觀察種皮結(jié)構(gòu),有種皮只有1層細(xì)胞,多數(shù)種皮由數(shù)種不一樣細(xì)胞組織組成;顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第42頁(yè)種子外胚乳、內(nèi)胚乳或子葉細(xì)胞形狀、細(xì)胞壁增厚情況;所含脂肪油、糊粉粒或淀粉粒等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第43頁(yè)2.種子類粉末生藥觀察注意種皮表面觀及斷面觀形態(tài)特征;注意種皮支持細(xì)胞、油細(xì)胞、色素細(xì)胞有沒有和形態(tài);有沒有毛茸、草酸鈣結(jié)晶、淀粉粒、分泌組織碎片等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第44頁(yè)(十)全草類生藥大多為草本植物地上部分,少數(shù)為帶根全株。全草類包含了草本植物藥各個(gè)部位,其顯微判定可參考以上各類生藥判別特征。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第45頁(yè)(十一)菌類生藥大多以子實(shí)體或菌核形式入藥。觀察時(shí)應(yīng)注意菌絲形狀、有沒有分枝、顏色、大小;團(tuán)塊、孢子形態(tài);結(jié)晶有沒有及形態(tài)、大小與類型;應(yīng)無淀粉粒和高等植物顯微特征出現(xiàn)。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第46頁(yè)(十二)動(dòng)物類生藥因藥用部位不一樣,可分為:動(dòng)物體:應(yīng)注意皮膚碎片細(xì)胞形狀與色素顆粒顏色;剛毛形態(tài)、大小及顏色;體壁碎片、骨碎片等特征。
顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第47頁(yè)分泌物、病理產(chǎn)物:注意團(tuán)塊顏色及其包埋物性質(zhì)特征,表皮脫落組織,毛茸及其它細(xì)胞形狀、大小、顏色等特征,如麝香、牛黃等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第48頁(yè)角甲類:注意碎塊形狀、顏色、橫斷面和縱斷面觀形態(tài)特征及色素顆粒顏色,如羚羊角等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第49頁(yè)(十三)礦物類生藥主要應(yīng)注意:晶體大小、直徑或長(zhǎng)徑;晶形棱角、銳角或鈍角;色澤、透明度、表面紋理及方向、光潔度;偏光顯微鏡下特征,如朱砂、石膏等。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第50頁(yè)(十四)中成藥顯微判別關(guān)鍵點(diǎn)中藥丸散錠丹等成方制劑,大多直接用各種粉末生藥及生藥浸膏配制而成。顯微判定是判定中成藥丸散錠丹和制訂品質(zhì)標(biāo)志科學(xué)方法之一,對(duì)確保中成藥質(zhì)量,有一定科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第51頁(yè)生藥粉末判定研究對(duì)于中成藥科學(xué)判定有主要作用。1.了解組方生藥、劑型和制法熟悉處方中組成藥品顯微特征是中成藥判別基礎(chǔ)。中成藥顯微判別要比中藥材粉末判別復(fù)雜得多,制備方法及輔料等會(huì)產(chǎn)生一定影響和干擾。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第52頁(yè)2.依據(jù)處方明確專屬特征中成藥顯微判定,普通依據(jù)處方,對(duì)各組成生藥粉末特征作分析比較,選取各藥具專屬性顯微特征,作為判別依據(jù)。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第53頁(yè)六味地黃丸是由熟地黃、山茱萸、牡丹皮、山藥、茯苓、澤瀉六味藥組成,每味藥都有數(shù)個(gè)顯微特征,大部分特征又有橫向類別交叉。選取六味藥各具專屬性顯微特征,這么六味藥品均可判別。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第54頁(yè)三、掃描電鏡等應(yīng)用1.偏振光顯微鏡(偏光顯微鏡)在偏光顯微鏡下,生藥判別要素在色彩上表現(xiàn)出一定改變,可作為大多數(shù)植物、動(dòng)物、礦物類生藥顯微判別依據(jù)之一。顯微鑒醫(yī)學(xué)宣教專家講座第55頁(yè)比如:淀粉:在偏光顯微鏡下展現(xiàn)黑十字現(xiàn)象,不一樣類型淀粉其黑十字形象不一樣;草酸鈣結(jié)晶:類型多樣,在偏光顯
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