培訓(xùn)課件奶牛結(jié)核病監(jiān)控

培訓(xùn)材料十：奶(Nai)牛結(jié)核病監(jiān)控

新希望生態(tài)牧業(yè)有限公司高級(jí)獸醫(yī)師

中國奶協(xié)專家?guī)飓F醫(yī)專家姚智深

第一頁，共四十頁。

主要內(nèi)容一、概述二、病原三、流行病學(xué)四、臨床癥狀五、診斷六、防控

七、公(Gong)共衛(wèi)生第二頁，共四十頁。一、概述

結(jié)核病是由(You)結(jié)核分支桿菌（牛型、人型及禽型）引起的慢性人畜共患傳染病。以多種組織器官形成肉芽組織和干酪樣、鈣化結(jié)節(jié)病變?yōu)樘卣?。臨床上以低熱、咳嗽、消瘦，生產(chǎn)性能低下為主要特征。歐洲多個(gè)國家如丹麥，比利時(shí)，德國，挪威，荷蘭，瑞典，芬蘭，盧森堡，澳大利亞，加拿大等地已消滅了牛結(jié)核。日本，英國，法國，美國等已經(jīng)控制了牛結(jié)核。

我國的人畜結(jié)核病雖然得到了控制，但近年來發(fā)病率又有增長趨勢。第三頁，共四十頁。二(Er)、病原屬于分支桿菌科、分支桿菌屬。其形態(tài)為中等大小桿菌，革蘭氏染色陽性，抗酸性染色被染成紅色。無莢膜，無芽孢，無鞭毛，為專性需氧菌，對培養(yǎng)基要求苛刻。在人工培養(yǎng)基上生長緩慢，3周左右開始生長。結(jié)核桿菌對熱和紫外線敏感，60℃30min即可死亡，陽光直接照射數(shù)小時(shí)死亡。對環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)，生長最適溫度為37.5℃,最適生長PH為5.9~6.9。在干痰中能存活10個(gè)月，糞便中6~7個(gè)月，病變組織中2~7個(gè)月或更久，水中可存活5個(gè)月，冷藏奶油中10個(gè)月。常用消毒劑經(jīng)40h可將其殺死，在70%酒精或者10%漂白粉中很快死亡。第四頁，共四十頁。結(jié)核桿菌的電鏡(Jing)掃描圖Ziehl-Neelsen氏抗酸性染色的結(jié)核桿菌（紅色）第五頁，共四十頁。三、流行病(Bing)學(xué)牛結(jié)核桿菌主要侵害人和家畜，家畜中牛最易感，其中奶牛和黃牛最易感。病牛、病人、帶菌者都是本病的主要傳染源?？赏ㄟ^塵埃、污染的飼料和水、配種、空氣等散播傳染。主要經(jīng)呼吸道、消化道和生殖器等途徑感染。飼養(yǎng)管理不當(dāng)與本病的傳播有密切關(guān)系，畜舍通風(fēng)不良、擁擠、潮濕、陽光不足、缺乏運(yùn)動(dòng)最易患病。各種年齡的家畜均可能感染此病，并無明顯的季節(jié)性。第六頁，共四十頁。主要感染途徑為呼吸道和消化道。相對來說，成年牛易經(jīng)呼吸道感染，而青年牛易經(jīng)消化道感染。呼吸道感染主要由帶菌塵?；驓馊苣z所造成。消化道感染則常因(Yin)飼草、飼料被污染。犢牛感染主要是吮吸帶菌的乳汁造成的。此外，成年牛也可通過交配感染。傳播途徑第七頁，共四十頁。免疫和發(fā)生機(jī)(Ji)理牛分支桿菌是細(xì)胞內(nèi)寄生菌。機(jī)體主要是通過細(xì)胞免疫來進(jìn)行抵抗菌體。發(fā)病機(jī)理

分支桿菌被吞噬（忽略）機(jī)體的巨噬細(xì)胞被帶入組織或淋巴管侵入組織或淋巴結(jié)處發(fā)

生原發(fā)性病灶抵抗力強(qiáng)時(shí)，病灶長期或終身不擴(kuò)散抵抗力弱時(shí)，細(xì)菌向其他淋巴結(jié)擴(kuò)散，形成繼發(fā)性病灶

細(xì)菌進(jìn)入血液，散布全身，引起全身性結(jié)核。第八頁，共四十頁。四、臨床(Chuang)癥狀潛伏期一般為10-45d，長的達(dá)數(shù)月。牛結(jié)核常分為肺結(jié)核、乳房結(jié)核、淋巴結(jié)核，有時(shí)可見腸結(jié)核，生殖器結(jié)核，腦結(jié)核，漿膜結(jié)核和全身結(jié)核。

肺結(jié)核一般病初食欲、反芻無明顯變化。會(huì)有干咳并且逐漸加重，有粘液膿性鼻涕，嚴(yán)重時(shí)可發(fā)生氣喘。胸部會(huì)有摩擦音，叩診出現(xiàn)濁音區(qū)。有體表淋巴結(jié)腫大。病情惡化會(huì)發(fā)生全身性栗粒結(jié)核，即所謂的珍珠病。此時(shí)病牛體溫升至40℃，呈弛張熱或稽留熱，呼吸更加困難，最后心力衰竭而死。第九頁，共四十頁。

淋巴結(jié)核并(Bing)不是一個(gè)獨(dú)立的的病型，各型結(jié)核病的淋巴結(jié)都可能發(fā)生病變。病變淋巴結(jié)腫大，無熱痛，常見于肩前、股前、腹股溝、頜下、咽及頸淋巴結(jié)等。

乳房結(jié)核的特征是：乳房上淋巴結(jié)腫大，乳房本身有局限性或者彌散性硬結(jié)，無熱亦無痛。產(chǎn)奶量下降，乳汁常變得稀薄如水。由于腫塊形成和乳腺萎縮，兩側(cè)乳房變得不對稱，乳頭變形而且位置失常，終至產(chǎn)乳停止。第十頁，共四十頁。病理變(Bian)化

干酪樣壞死：多見于組織器官內(nèi)，常出現(xiàn)在結(jié)核結(jié)節(jié)中心，或臟器中直接可見黃色的干酪樣病灶。有的干酪變?yōu)槟摌右后w或者鈣化；有的壞死溶解排出后，形成空洞（多見于肺）。

“珍珠樣”結(jié)節(jié)：見于胸腔和腹腔的漿膜上，一般為栗粒至豌豆大的透明或半透明灰白色或黃色結(jié)節(jié)似珍珠狀，結(jié)節(jié)聯(lián)合狀似葡萄。結(jié)節(jié)中心常干酪化或鈣化。也有的小結(jié)節(jié)成長不規(guī)律，形成一蒂與漿膜連接。第十一頁，共四十頁。牛結(jié)核病肺結(jié)核左側(cè)干酪樣結(jié)節(jié)結(jié)節(jié)間為纖(Xian)維結(jié)締組織（1）正常肺組織（2）右側(cè)干酪樣壞死后形成肺空洞（3）第十二頁，共四十頁。牛肺結(jié)核、支氣管淋巴結(jié)核、干酪樣(Yang)壞死，邊緣黑色為塵埃沉積（固定標(biāo)本）第十三頁，共四十頁。第十四頁，共四十頁。第十五頁，共四十頁。第十六頁，共四十頁。五(Wu)、診斷1.臨床癥狀和病理變化診斷

。2.病原學(xué)診斷

——抗酸染色法、細(xì)菌分離培養(yǎng)法。

3.免疫學(xué)試驗(yàn)——牛的牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)。4.

其它方法：PCR法、

遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)

、ELISA法、

淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

、γ-干擾素試驗(yàn)

、

菌體成分檢測法。

第十七頁，共四十頁。結(jié)核菌素(Su)皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)（PPD）用結(jié)核菌素進(jìn)行的皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)是檢查牛結(jié)核病主要方法。試驗(yàn)分二種，一種是牛型結(jié)核菌素單一試驗(yàn)，僅用牛型結(jié)核菌素進(jìn)行，目的是檢測是否存在牛型結(jié)核分枝桿菌的感染。另一種是結(jié)核菌素比較試驗(yàn)，用牛型結(jié)核菌素和禽型（或副）結(jié)核菌素同時(shí)進(jìn)行，這是一種鑒別診斷試驗(yàn)，用以明確是牛型結(jié)核分枝桿菌感染，還是副結(jié)核分枝桿菌或其他分枝桿菌感染。奶牛主要是排除副結(jié)核的干擾。第十八頁，共四十頁。牛型結(jié)核(He)菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)出生后20天的牛即可用本試驗(yàn)進(jìn)行檢疫。操作方法如下：1、注射部位及術(shù)前處理：將牛只編號(hào)后在頸側(cè)中部上1/3處剪毛（或提前一天剃毛），三個(gè)月以內(nèi)的犢牛，也可在肩胛部進(jìn)行，直徑約10cm。（簡易初查可于尾根皺褶處做）。用卡尺測量術(shù)部中央皮皺厚度，作好記錄。注意術(shù)部應(yīng)無明顯的病變。2、

注射劑量：不論大小牛只，一律皮內(nèi)注射0.1mL（所含單位2000～5000IU）。凍干提純結(jié)核菌素稀釋后當(dāng)天用完。第十九頁，共四十頁。3、

注射方法先以75％酒精消毒術(shù)部，然后皮內(nèi)注射定量的牛型結(jié)核菌素，注射后局部應(yīng)出現(xiàn)小皰，如對注射有疑問時(shí)，應(yīng)另選15cm以外的部位或?qū)?cè)重做。4、

注射次數(shù)和觀察反應(yīng)皮內(nèi)注射后經(jīng)72小時(shí)判定，仔細(xì)觀察局部有無熱痛、腫脹等炎性反應(yīng)，并以卡尺測量皮皺厚度，作好詳細(xì)記錄。對疑似反應(yīng)牛應(yīng)立即在另一側(cè)以同一批提純結(jié)核菌素同一劑量進(jìn)行第二次皮內(nèi)注射，再經(jīng)72小時(shí)觀察反應(yīng)結(jié)果(Guo)。對陰性牛和疑似反應(yīng)牛，于注射后96和120小時(shí)再分別觀察一次，以防個(gè)別牛出現(xiàn)較晚的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。第二十頁，共四十頁。

結(jié)果判定1、陽性反應(yīng)：局部有明顯的炎性反應(yīng)，皮厚差大于或等于4.0mm。2、疑似反應(yīng)：局部炎性反應(yīng)不明顯，皮厚差大于或等于2.0mm，同時(shí)小于4.0mm。3、陰性反應(yīng)：無炎性反應(yīng)。皮厚差在2.0mm以下。凡牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)疑似反應(yīng)者，于30～45日后進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢結(jié)果為陽性，則按陽性牛處理;若仍呈疑似反應(yīng)則間隔30～45天再(Zai)復(fù)檢一次，結(jié)果仍為可疑反應(yīng)者，視同陽性牛處理。

第二十一頁，共四十頁。皮內(nèi)(Nei)變態(tài)反應(yīng)比較試驗(yàn)本試驗(yàn)采用牛型結(jié)核菌素和禽型（或副）結(jié)核菌素同時(shí)進(jìn)行。操作方法：在牛頸中部選2個(gè)點(diǎn)，一個(gè)在上1/3處一個(gè)在下1/3處。2個(gè)點(diǎn)之間的距離不得少于10cm。注射點(diǎn)及周圍的皮膚應(yīng)無異常。禽型（或副）結(jié)核菌素的注射劑量為每頭0.1ml，含0.25萬IU。即將禽型（或副）結(jié)核菌素稀釋成每毫升含2.5萬IU后，皮內(nèi)注射0.1毫升。牛型結(jié)核菌素的注射劑量為每頭0.1ml，含0.20～0.5萬IU。即將牛型結(jié)核菌素稀釋成每毫升含2.0～5.0萬IU后，皮內(nèi)注射0.1毫升。第二十二頁，共四十頁。

結(jié)果判定1、牛型結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽性。對牛型結(jié)核菌素的反應(yīng)為陽性（局部有明顯的炎性反應(yīng)，皮厚差大于或等于4.0mm），并且對牛型結(jié)核菌素的反應(yīng)大于對禽型（或副）結(jié)核菌素的反應(yīng)，二(Er)者皮差在2.0mm以上，判為陽性。對已經(jīng)定性為牛型結(jié)核分枝桿菌感染的牛群。其中即使少數(shù)牛的皮差在2.0mm以下，甚至對牛型結(jié)核菌素的反應(yīng)略小于對禽型（或副）結(jié)核菌素的反應(yīng)（反應(yīng)差小于或等于2.0mm），只要對牛型結(jié)核菌素的反應(yīng)在2.0mm以上，也應(yīng)判定為牛型結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽性牛。第二十三頁，共四十頁。2、禽型（或副）結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽性。對禽型（或副）結(jié)核菌素的反應(yīng)大于對牛型結(jié)核菌素的反應(yīng)，兩者的皮差在2.0mm以上，判為禽型（或副）結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽性。對已經(jīng)定(Ding)性為副結(jié)核分枝桿菌或禽型結(jié)核分枝桿菌感染的牛群。其中即使少數(shù)牛的皮差在2.0mm以下，甚至對禽型（或副）結(jié)核菌素的反應(yīng)略小于對牛型結(jié)核菌素的反應(yīng)（不超過2.0mm），只要對禽型（或副）結(jié)核菌素的反應(yīng)在2.0mm以上，也應(yīng)判為禽型（或副）結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽性牛。第二十四頁，共四十頁。結(jié)核(He)檢疫消毒第二十五頁，共四十頁。第二十六頁，共四十頁。第二十七頁，共四十頁。淋巴(Ba)結(jié)核比較試驗(yàn)第二十八頁，共四十頁。保(Bao)定第二十九頁，共四十頁。刮(Gua)毛第三十頁，共四十頁。量(Liang)皮第三十一頁，共四十頁。注(Zhu)射第三十二頁，共四十頁。對比試(Shi)驗(yàn)第三十三頁，共四十頁。六(Liu)、

防控結(jié)核雖然有有效的藥物治療，但由于療程長和考慮經(jīng)濟(jì)價(jià)值，奶牛一般不予治療。主要采取以“監(jiān)測、檢疫、消毒、隔離、撲殺”相結(jié)合的綜合性防控措施。

1、監(jiān)測如在牛結(jié)核病凈化群中（包括犢牛群）檢出陽性牛時(shí)，應(yīng)及時(shí)撲殺陽性牛，其它牛按假定健康群處理。成年牛凈化群每年春秋兩季用牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)各進(jìn)行一次監(jiān)測。初生犢牛，應(yīng)于30日齡時(shí)進(jìn)行第一次監(jiān)測。

第三十四頁，共四十頁。

2、

檢疫(Yi)

異地引進(jìn)的奶牛，必須來自于非疫區(qū)。異地調(diào)牛裝運(yùn)前30天內(nèi)，須在當(dāng)?shù)貦z疫合格，方可調(diào)運(yùn)。調(diào)入的奶牛，必須隔離觀察45天以上，且經(jīng)牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)檢查陰性者，方可混群飼養(yǎng)。

3、隔離疑似結(jié)核病牛或牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)可疑牛須隔離復(fù)檢。隔離牛舍處在下風(fēng)口，并與健康牛舍相隔50米以上。奶牛場生產(chǎn)區(qū)應(yīng)與生活區(qū)隔離，場內(nèi)不應(yīng)飼養(yǎng)動(dòng)物，并應(yīng)禁止其它動(dòng)物進(jìn)入。

第三十五頁，共四十頁。牛場工作人員，每年要定期進(jìn)行健康檢查。發(fā)現(xiàn)有患結(jié)核病的應(yīng)及時(shí)調(diào)離崗位，隔離治療。

4、凈化被確診為結(jié)核病牛的牛群（場）為牛結(jié)核病污染群（場），應(yīng)全部實(shí)施牛結(jié)核病凈化。污染牛群的凈化：應(yīng)用牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)(Nei)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)對該牛群進(jìn)行反復(fù)檢測，每次間隔3個(gè)月，發(fā)現(xiàn)陽性牛及時(shí)撲殺直至凈化。（適用于低度污染發(fā)病牛場）。

假定健康牛群的建立：經(jīng)檢測撲殺病牛及陽性牛后的牛群視為假定健康牛群，假定健康牛群異地隔離飼養(yǎng)為二級(jí)凈化。高度污染發(fā)病牛場需二級(jí)凈化。

第三十六頁，共四十頁。健康牛群建立：牛群二級(jí)凈化后仍需反復(fù)監(jiān)測，每次間隔3個(gè)月，發(fā)現(xiàn)陽性牛及時(shí)撲殺，直至牛群連續(xù)兩次以上監(jiān)測結(jié)果均為(Wei)陰性者，方可認(rèn)為(Wei)是牛結(jié)核病凈化群。

健康犢牛群的培育：病牛所產(chǎn)犢牛，立即隔離飼養(yǎng)，飼喂檢疫無結(jié)核病的母牛奶或巴殺奶。犢牛應(yīng)在出生1月齡、3月齡、6月齡進(jìn)行3次檢疫。凡呈陽性者必須淘汰處理。如若均為陰性而且無任何可疑臨床癥狀，可放入假定健康牛群中培育。為了過渡到健康牛群，以后也應(yīng)每隔