《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱

第頁《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱課程名稱：細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

課程類別：專業(yè)主干課適用專業(yè)：生物技術(shù)

所屬實(shí)驗(yàn)室：細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)學(xué)時、學(xué)分：

32

學(xué)時

1

學(xué)分一、實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)通過一系列的實(shí)驗(yàn)技能和實(shí)踐操作的學(xué)習(xí)，使學(xué)生對所學(xué)基礎(chǔ)理論知識有更深刻，更直觀的理解，同時還可以掌握一些基本的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，了解有關(guān)細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞工程領(lǐng)域常用的研究手段和方法，為進(jìn)一步深造和獨(dú)立開展科研工作打下良好的基礎(chǔ)。二、實(shí)驗(yàn)教學(xué)要求細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)以設(shè)計(jì)性和綜合性實(shí)驗(yàn)為主，學(xué)生分組進(jìn)行，每組約5～8人。授課教師講解和演示實(shí)驗(yàn)儀器原理和操作使用過程，并給出實(shí)驗(yàn)任務(wù)和題目，要求學(xué)生在規(guī)定時間內(nèi)熟悉、學(xué)習(xí)儀器設(shè)備的使用，掌握正確的操作方法，并完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)任務(wù)。整個授課過程在各專業(yè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。完成過程中，指導(dǎo)教師對所出現(xiàn)的問題進(jìn)行指導(dǎo)，鼓勵學(xué)生獨(dú)立分析和解決問題，積極創(chuàng)新。對于一些重點(diǎn)的設(shè)計(jì)性、創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)前學(xué)生必須進(jìn)行預(yù)習(xí)，認(rèn)真設(shè)計(jì)并做出實(shí)驗(yàn)提綱，然后才可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)研究環(huán)境。三、對學(xué)生的指導(dǎo)和要求（一）實(shí)驗(yàn)報告要求按照統(tǒng)一格式，采用山西師范大學(xué)統(tǒng)一印制的實(shí)驗(yàn)報告紙。內(nèi)容全面，完善，敘述流暢，格式規(guī)范，圖表清晰，分析合理科學(xué)。實(shí)驗(yàn)報告主要內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)名稱、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)結(jié)果和分析。（二）實(shí)驗(yàn)報告要求下一次實(shí)驗(yàn)前按時上交指導(dǎo)老師。（三）任課教師對實(shí)驗(yàn)報告內(nèi)容要認(rèn)真批閱，對于錯誤或欠妥之處要指明，并做出正確指導(dǎo)，給出實(shí)驗(yàn)成績，并簽署姓名和日期。四、實(shí)驗(yàn)考核方式本課程考核包括四項(xiàng)內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、實(shí)驗(yàn)報告，每學(xué)期末，對各項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行綜合測試，計(jì)算出實(shí)驗(yàn)總分，將實(shí)驗(yàn)總分記作實(shí)驗(yàn)課成績。五、實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(一)：相差顯微鏡的結(jié)構(gòu)、原理及其用法（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.熟悉相差顯微鏡的構(gòu)造及其原理2.掌握相差顯微鏡的操作方法3.觀察記錄未染色的活體組織或細(xì)胞的結(jié)構(gòu)（4）主要儀器：相差顯微鏡(包括附件)、載玻片、蓋玻片、牙簽、蒸餾水、口腔黏膜細(xì)胞等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(二)：偏光、暗視野顯微鏡的原理、結(jié)構(gòu)及使用（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.了解并掌握特殊顯微鏡的構(gòu)造及原理2.熟練掌握其操作方法3.熟悉并掌握其應(yīng)用領(lǐng)域（4）主要儀器：偏光顯微鏡、暗視野顯微鏡、載玻片、蓋玻片、牙簽、濾紙、棉花纖維等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(三)：熒光顯微鏡的構(gòu)造、原理及使用（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□

驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.了解熒光顯微鏡的光學(xué)原理，結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及應(yīng)用領(lǐng)域2.掌握熒光顯微鏡的操作方法3.觀察葉綠體的熒光特性（4）主要儀器：熒光顯微鏡、綠色植物實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(四)：激光共聚焦掃描顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理和操作使用（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性■驗(yàn)證性□

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.了解激光共聚焦掃描顯微鏡的結(jié)構(gòu)和原理2.掌握激光共聚焦掃描顯微鏡的操作使用（4）主要儀器：激光共聚掃描顯微鏡，小麥細(xì)胞原生質(zhì)體，載玻片，蓋玻片，培養(yǎng)皿，熒光抗體。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(五)：葉綠體的分離、純化及熒光觀察（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.通過植物細(xì)胞葉綠體的分離與純化，了解細(xì)胞器分離與純化的原理與方法；2.觀察葉綠體的自發(fā)熒光和間接熒光。（4）主要儀器：熒光顯微鏡、菠菜嫩葉、載玻片、蓋玻片、電子天平、高速離心機(jī)、蔗糖溶液、提取緩沖液。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(六)：線粒體的活體染色及觀察（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握活體染色技術(shù)的原理及方法2.觀察并記錄動、植物細(xì)胞的線粒體（4）主要儀器：解剖器械、Ringer氏液、中性紅、黃豆幼苗根尖、兔子、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(七)：生物活體染色——觀察液泡系（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性■

設(shè)計(jì)性□

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握活體染色技術(shù)的原理及方法2.觀察并記錄動、植物細(xì)胞的液泡系分布及形態(tài)（4）主要儀器：解剖器械、Ringer氏液、JanusgreenB、蟾蜍、洋蔥、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(八)：微絲的考馬斯亮藍(lán)染色及光學(xué)顯微鏡觀察（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性□

設(shè)計(jì)性□

綜合性■（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.掌握考馬斯亮藍(lán)R250染微絲的染色方法。2.觀察光鏡下微絲的基本形態(tài)和結(jié)構(gòu)。（4）主要儀器：普通光學(xué)顯微鏡、洋蔥鱗莖、離心管、載玻片、蓋玻片、剪刀、小鑷子、小燒杯。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(九)：細(xì)胞膜滲透性的測定（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性□

設(shè)計(jì)性□

綜合性■（3）項(xiàng)目主要目的要求：學(xué)習(xí)并掌握細(xì)胞膜滲透性測定的原理及方法。（4）主要儀器：無機(jī)及有機(jī)溶液、新鮮血液、移液管、試管、吸耳球等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(十)：植物原生質(zhì)體制備與葉綠體的原位觀察（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性□設(shè)計(jì)性□

綜合性■（3）項(xiàng)目主要目的要求：1.通過酶解法制備植物細(xì)胞原生質(zhì)體，使學(xué)生掌握原生質(zhì)體制備的基本方法。2.觀察葉綠體的自發(fā)熒光和次發(fā)熒光現(xiàn)象，并且熟悉熒光顯微鏡的使用方法。（4）主要儀器：熒光顯微鏡、小麥幼苗、載玻片、蓋玻片、濾網(wǎng)等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(十一)：非生物脅迫小麥細(xì)胞有絲分裂的影響（1）項(xiàng)目類別：必做■選做□（2）項(xiàng)目性質(zhì)：演示性□驗(yàn)證性□

設(shè)計(jì)性■

綜合性□（3）項(xiàng)目主要目的要求：學(xué)習(xí)植物細(xì)胞染色體制片技術(shù)，了解非生物脅迫對植物細(xì)胞分裂的影響（4）主要儀器：光學(xué)顯微鏡，小麥材料，培養(yǎng)皿，恒溫水浴鍋，載玻片，蓋玻片，光照培養(yǎng)箱。

六、實(shí)驗(yàn)學(xué)時分配序號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目學(xué)時1相差顯微鏡的結(jié)構(gòu)、原理及其用法22偏光、暗視野顯微鏡的原理、結(jié)構(gòu)及使用23熒光顯微鏡的構(gòu)造、原理及使用34激光共聚焦掃描顯微鏡的結(jié)構(gòu)原理和操作使用35葉綠體的分離、純化及熒光觀察36線粒體的活體染色及觀察37生物活體染色——觀察液泡系28微絲的考馬斯亮藍(lán)染色及光學(xué)顯微鏡觀察39細(xì)胞膜滲透性的測定310植物原生質(zhì)體制備與葉綠體的原位觀察411非生物脅迫對小麥細(xì)胞有絲分裂的影響4合計(jì)

32七、推薦教材與輔助教學(xué)資料［1］《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》（第二版），楊漢民編，高等教育出版社，1997.［2］《細(xì)胞分子生物學(xué)技術(shù)教程》（第三版），印莉萍，祁曉廷，李鵬等編，科學(xué)出版社，2009.［3］《生物顯微技術(shù)》