藥物分析第二章藥物的鑒別試驗

藥物分析第二章藥物的鑒別試驗第一頁，共四十二頁，2022年，8月28日

藥物的鑒別試驗藥物的雜質(zhì)檢查藥物定量分析與分析方法驗證藥品檢驗工作的基本規(guī)律Basicregularityofdruginspection第二頁，共四十二頁，2022年，8月28日Identificationtestofdrug

鑒別試驗的內(nèi)涵鑒別試驗的項目鑒別試驗的方法鑒別試驗的條件藥物的鑒別試驗第三頁，共四十二頁，2022年，8月28日

根據(jù)藥物的分子結構，采用化學、物理化學或生物學方法來判斷其真?zhèn)?。鑒別試驗用方法僅用于證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所標示的藥物，而非對未知物的鑒別。鑒別試驗方法應專屬，每個品種一般2～3條。鑒別試驗的內(nèi)涵Testmeaning第四頁，共四十二頁，2022年，8月28日ChP(2010)凡例中對藥物的鑒別的定義為：鑒別項下規(guī)定的實驗方法，僅反應該藥品某些物理、化學或生物學等性質(zhì)特征，不完全代表對該藥品化學結構的確證。第五頁，共四十二頁，2022年，8月28日性狀項和物理常數(shù)確認

鑒別項下規(guī)定的試驗

原料藥鑒別制劑鑒別鑒別試驗的項目

Testitems

第六頁，共四十二頁，2022年，8月28日性狀

（Description）定義：

反映藥物特有的物理性質(zhì)，如外觀、溶解度和物理常數(shù)等。外觀溶解度物理常數(shù)第七頁，共四十二頁，2022年，8月28日外觀：指藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。如二巰基丁二鈉的描述為“本品為白色至微黃色的粉末；有類似蒜的特臭”。溶解度：一定程度上反映了藥品的純度。藥品在不同溶劑中的溶解性能用“極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶”來描述。物理常數(shù)：用于藥品鑒別，反映其純雜程度。藥典收載的物理常數(shù)包括：相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。

性狀

（Description）第八頁，共四十二頁，2022年，8月28日熔點性狀---固體熔化成液體的溫度熔融同時分解的溫度自初熔至全熔的一段溫度物理常數(shù)第九頁，共四十二頁，2022年，8月28日ChP(2010)收載三種熔點的測定方法：第一法測定易碎固體藥品第二法測定不易粉碎固體藥品（脂肪酸、石蠟）第三法測定凡士林或其他易碎物要求報告初熔和終熔的溫度第十頁，共四十二頁，2022年，8月28日比旋度：在一定波長(589.3nm)與溫度(20℃)下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度。用表示。性狀---物理常數(shù)第十一頁，共四十二頁，2022年，8月28日例如：維生素C的比旋度測定：取本品，精密稱定，加水溶解，并定量稀釋成C為0.10g/ml的溶液，依法測定旋光度為+2.05°至2.15°，求=？第十二頁，共四十二頁，2022年，8月28日吸收系數(shù)：在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度稱為吸收系數(shù)。中國藥典收載是。

這兩種物理常數(shù)可用以區(qū)別藥品、檢查純度或測定制劑的含量。第十三頁，共四十二頁，2022年，8月28日吸收系數(shù)吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度摩爾吸收系數(shù)溶液濃度

ε

液層厚度百分吸收系數(shù)溶液濃度液層厚度第十四頁，共四十二頁，2022年，8月28日A=ECLE=A/CLC=1%或1mol/L例如鹽酸甲氧明“取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋成每1ml含30ug的溶液，照分光光度法，在290nm波長處測定吸收度，吸收系數(shù)（為133-141）第十五頁，共四十二頁，2022年，8月28日依據(jù)：某一類藥物組成中的陰離子和陽離子的特殊反應或典型的有機官能團反應。中國藥典附錄收載一般鑒別試驗：無機金屬鹽類、無機酸鹽、有機酸鹽、丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機氟化物類等Generalidentificationtest一般鑒別試驗無機物有機物第十六頁，共四十二頁，2022年，8月28日陰陽離子的特殊反應酸根名稱

檢驗試劑

現(xiàn)象

反應方程式

SO42-

BaCl2溶液

白色↓加酸不溶

SO42-+Ba2+→BaSO4

CO32-

稀酸，Ca(OH)2

氣體使石灰水變混

CO32-+2H+→CO2↑+H2OCa2++CO32-→CaCO3↓

HCO3-

稀酸，Ca(OH)2氣體使石灰水變混

Cl-

AgNO3試液

白↓溶于氨水不溶稀硝酸

Cl-+Ag+→AgCl↓

Br-

AgNO3試液

黃↓微溶氨水不溶稀硝酸

Br-+Ag+→AgBr↓

第十七頁，共四十二頁，2022年，8月28日陰陽離子的特殊反應離子鑒別方法鑒別原理現(xiàn)象Na+焰色反應光譜主要譜線589nm可見光區(qū)鮮黃色（實例見⑧）K+焰色反應光譜主要譜線766nm，769nm紫色（實例見⑧）Ca2+焰色反應光譜主要譜線622nm可見光區(qū)磚紅色Ba2+焰色反應光譜主要譜線553nm，500nm黃綠色Li+焰色反應光譜主要譜線670nm胭脂紅色NH4+NaOH石蕊試液NH4++OH-→NH3↑+H2O有刺鼻氣味，濕石蕊試紙變蘭第十八頁，共四十二頁，2022年，8月28日有機氟化物

樣品經(jīng)氧瓶燃燒法進行有機破壞后，用水和堿氫氧化鈉溶液吸收為無機氟化物，與茜素氟藍和硝酸亞鈰在PH=4.3溶液中形成藍紫色絡合物。第十九頁，共四十二頁，2022年，8月28日反應原理第二十頁，共四十二頁，2022年，8月28日FeCl3反應加稀HCl，沉淀分解，生成游離白色堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀）第二十一頁，共四十二頁，2022年，8月28日酒石酸鹽取供試品的中性溶液于試管中，加氨制硝酸銀溶液幾滴，于水浴中加熱，有銀鏡生成。綜上所述，一般鑒別試驗只能證實是哪一類藥物，而不能證實是哪一種藥物第二十二頁，共四十二頁，2022年，8月28日依據(jù)：每種藥物的化學結構的差異及引起的物理化學特性的不同，選用某些特有的靈敏的定性反應鑒別藥物的真?zhèn)?。是證實某一種藥物的依據(jù)。

Specificidentificationtest專屬鑒別試驗第二十三頁，共四十二頁，2022年，8月28日例子

巴比妥類藥物：苯巴比妥含有苯環(huán)，司可巴比妥含有雙鍵，硫噴妥鈉含有硫原子。根據(jù)取代基的不同，采用各自專屬的反應進行鑒別。第二十四頁，共四十二頁，2022年，8月28日例子甾體激素類藥物含有環(huán)戊烷并多氫菲母核，主要差別在A環(huán)和D環(huán)的取代基不同，可利用這些結構特征確證。第二十五頁，共四十二頁，2022年，8月28日四、鑒別方法化學鑒別法光譜鑒別法生物學法

HPLC、GC鑒別法

薄層色譜鑒別法

紙色譜鑒別法

呈色反應鑒別法

紫外光譜鑒別法

紅外光譜鑒別法

沉淀生成反應鑒別法

色譜鑒別法

氣體生成反應鑒別法

測定生成物的熔點熒光反應鑒別法

第二十六頁，共四十二頁，2022年，8月28日1.呈色反應鑒別法指供試品溶液中加入適當?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進行反應，生成易于觀測的有色產(chǎn)物。（1）三氯化鐵呈色反應：用于酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基（2）異羥肟酸鐵反應：多用于芳酸及其酯類、酰胺類（3）茚三酮呈色反應：用于結構中含有脂肪氨基藥物（4）重氮化-偶合顯色反應：用于芳伯氨基或潛在芳伯氨基（5）氧化還原顯色反應及其它顏色反應第二十七頁，共四十二頁，2022年，8月28日2.沉淀生成反應鑒別法（1）與重金屬離子的沉淀反應（2）與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應（3）其它沉淀反應。多用于生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機堿及其鹽。第二十八頁，共四十二頁，2022年，8月28日常用的熒光發(fā)射形式：（1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光；（2）藥物溶液加硫酸后，在可見光下發(fā)射熒光；（3）藥物和溴反應后，于可見光下發(fā)射出熒光；3.熒光反應鑒別法（4）藥物和間苯二酚反應后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應后，發(fā)射熒光。第二十九頁，共四十二頁，2022年，8月28日（1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣。（2）化學結構中含硫的藥物，可經(jīng)強酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體。（3）含碘有機藥物，經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。4.氣體生成反應鑒別法第三十頁，共四十二頁，2022年，8月28日紫外光譜鑒別法

對比吸收光譜特征參數(shù)比較吸收度比值一致性對比吸收光譜一致性第三十一頁，共四十二頁，2022年，8月28日紫外法在指定溶劑中測定2-3個特定波長處的吸收度比值（峰值與峰值比，峰谷與峰谷比），以提高專屬性。例地蒽酚的鑒別取含量測定下的溶液，照分光光度法測定，于240-400nm的波長范圍測定吸收度,在257,289,356處有最大吸收.規(guī)定A257/=A289為1.06-1.10A356/=A289為0.90-0.94.第三十二頁，共四十二頁，2022年，8月28日紫外光譜鑒別法(1)最大吸收波長和最小吸收波長(2)-A(3)-吸收系數(shù)(4)-A1/A2(5)化學處理后測定產(chǎn)物的吸光度值λλλλ第三十三頁，共四十二頁，2022年，8月28日不同國家測定方法略有不同USP(32)

采用對照品法,把樣品與對照品按同法處理,在200-400nm波長范圍掃描，要求相同波長處有最大吸收，最小吸收，相同的吸收系數(shù)，或吸收比在規(guī)定的限度內(nèi)。JP(15)與ChP(2010)的UV測定方法相似。BP(2009)規(guī)定在一定波長范圍內(nèi)掃描，尋找最大吸收，測定吸收系數(shù)。第三十四頁，共四十二頁，2022年，8月28日紅外光譜法是一種專屬性很強，應用較廣（固、液、氣）的鑒別方法，主要應用于組分單一，結構明確的原料藥，特別適合于其他方法不易區(qū)分的同類藥物，如磺胺類、甾體激素類、半合成抗勝素。紅外光譜鑒別法第三十五頁，共四十二頁，2022年，8月28日紅外光譜鑒別法對比供試品紅外吸收光譜與藥品標準紅外光譜的一致性，尤其是指紋一致性。第三十六頁，共四十二頁，2022年，8月28日ChP和BP均采用標準圖譜法例中國藥典對某藥物的鑒別：本品的紅外吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集XX圖）一致。USP采用對照品法例阿莫西林的鑒別試驗：取本品，經(jīng)干燥后用溴化鉀壓片法測定，所得的圖譜與USP阿莫西林參考標準品圖譜一致。第三十七頁，共四十二頁，2022年，8月28日JP采用規(guī)定條件下測定一定波數(shù)處的特征吸收峰例氯羥去甲安定的測定：取本品，干燥后用KBr壓片法測定，其紅外吸收光譜圖中3440cm-1,3220cm-1,1695cm-1,1614cm-1,1324cm-1,1132cm-1,828cm-1處有吸收。第三十八頁，共四十二頁，2022年，8月28日試樣制備方法：1、壓片法----用于固體2、糊法----用于固體3、膜法----用于液體4、溶液法----用于液體制劑的鑒別（2005版增加）第三十九頁，共四十二頁，2022年，8月28日（1）輔料無干擾，與原料藥標準圖譜對照（2）輔料干擾不能完