藥物分析維生素類藥物的分析課件

第九章維生素類藥物的分析(AnalysisofVitamin)§1.前言(Preface)維生素是人們生活中必需的營養(yǎng)要素，是一些具有調(diào)節(jié)和管制新陳代謝過程的生物活性物質(zhì)。中國藥典2005年版收載了維生素A、B1、B6、B12、C、D2、D3、E、K1、葉酸、煙酸、煙酰胺。ABCDEKF水溶性脂溶性公元前一千年我國周漢時(shí)代古書記載瘺厥、緩風(fēng)、濕癢、腫等腳氣病的綜合癥狀，到晉代取名為腳氣。1911年從米糠中分離出抗腳氣病因子，將此成分命名為維生素(Vitamin)。此后，分離出各種營養(yǎng)因子，統(tǒng)稱為維生素，發(fā)展至今，已有60多種。干眼癥、夜盲癥缺VitaminA佝僂病、軟骨化癥缺VitaminDVitaminB1治療腳氣病、多發(fā)性神經(jīng)炎和胃腸道疾病存在于米糠、麥麩和酵母中VitaminC化學(xué)合成物參與機(jī)體代謝，可幫助酶將膽固醇轉(zhuǎn)化為膽酸而排泄，減低毛細(xì)管的脆性，增加機(jī)體的抵抗力。防治壞血病，預(yù)防冠心病，大量靜脈注射用于克山病的治療§2.VitaminA(魚肝油中)(3)(4)(2)(1)UV吸收(325~328nm)易氧化變質(zhì)與SbCl3呈藍(lán)色不溶于水，溶于CHCl3、乙醚、環(huán)己烷鑒別？Identification(1)SbCl3反應(yīng)即Carr-price反應(yīng)加飽和無水SbCl3無醇CHCl3溶液

藍(lán)色紫紅色TLC法(2)(3)UV法取VitA加無水乙醇－鹽酸(100:1)溶液溶解，立即在300~400nm波長范圍內(nèi)紫外掃描，應(yīng)僅在326nm出有單一吸收峰。水浴加熱30秒，迅速冷卻，同法掃描，則應(yīng)在348，367和389nm波長處有三個(gè)尖銳的吸收峰，且在波長332nm處有較低的吸收峰或拐點(diǎn)。(nm)A(1%,1cm)12389367348326如ChP測VitA醋酸酯時(shí)，規(guī)定1=328nm,2=316nm,3=340nmb.等吸光度法：在1的左右各選一點(diǎn)2和3，使A2=A3=6/7A1如ChP測VitA醇時(shí)，規(guī)定1=325nm,2=310nm,3=334nm3.雜質(zhì)的吸收(1)VitA2(3－去氫維生素A)和VitA3(去水維生素A)VitA2在345~350nm波長范圍內(nèi)有吸收；(2)VitA的氧化產(chǎn)物：環(huán)氧化物、VA醛和酸；(3)光照下產(chǎn)生的無生物活性的聚合物鯨醇；(4)VitA的異構(gòu)體；(5)合成時(shí)產(chǎn)生的中間體。

4.測定方法(1)第一法(適用于VA醋酸酯)VA醋酸酯環(huán)己烷在300,316,328,340,360nm波長處測A值(max=328nm),計(jì)算各波長下的吸收度與328nm波長下的吸收度之比值。(max326~329nm)差值±0.02，直接在328nm處測A328

差值>±0.02，A328(校正)＝3.52(2A328-A316-A340)-15%-3%+3%0皂化法皂化法A328(校正)A328直接算算效價(jià)(IU/g)：算VA醋酸酯膠丸占標(biāo)示量的百分含量：占標(biāo)示量的百分含量%膠丸的平均內(nèi)容物重量W內(nèi)容物重量D稀釋倍數(shù)L比色池厚度(cm)(2)第二法(適用于VA醇)皂化法VitA醇KOH乙醇溶液回流乙醚提取干燥異丙醇溶解在300,310,325,334nm處測A值確定max§3.VitaminE(藥典收載：-生育酚醋酸酯)(3)(2)(1)易水解成游離生育酚H+或OH-Ce(SO4)2滴定檢查游離生育酚UV吸收max284溶于乙醇、丙酮、醋酸乙酯、石油醚中，不溶于水VitE鑒別Identification(1)(4)(3)(2)硝酸反應(yīng)(無水乙醇＋硝酸，750C顯橙紅色)UV法(284)TLC法水解后氧化反應(yīng)加KOH醇試液，加熱，加水、乙醚，取乙醚液再加2,2'-聯(lián)吡啶的乙醇溶液和FeCl3的乙醇液，應(yīng)顯血紅色。

VitE含量=?

Assay(1)(6)(5)(4)(3)(2)GC法HPLC法UV法95%乙醇溶解，max292nm熒光法羥肟酸鐵比色法鹽酸羥胺+FeCl3生成羥肟酸鐵絡(luò)合物，于480及510nm處有最大吸收，測A值。鈰量法用硫酸加熱回流，水解成生育酚，用Ce(SO4)2定量地氧化為對－生育醌，過量的Ce(SO4)2氧化二苯胺指示劑而指示終點(diǎn)。VitB1含量＝?Assay非水堿量法冰HAc和Hg(Ac)2HClO4滴定硅鎢酸重量法(H+)硫色素?zé)晒夥?VB1專屬反應(yīng))OH－K3Fe(CN)6硫色素異丁醇提取365nm照射藍(lán)色熒光比較熒光強(qiáng)度含量UV法(max246nm)酸性染料比色法鹽酸硫胺與酸性染料(溴麝香草酚藍(lán))形成鹽，在420nm處測A值。HPLC法流動注射法(FIA)離子選擇性電極法制劑中VB1用鉛離子電極直接測定示波極譜滴定法123689547§5.VitaminC(抗壞血酸Ascorbicacid)(4)(3)(2)(1)旋光性溶于水，酸性強(qiáng)還原性UV吸收max245nmVitC鑒別15432UV法