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文檔簡介
實驗7胃腸運動(yùndòng)的直接觀察
離體腸段平滑肌的描記目的:動物在體胃腸運動及調(diào)節(jié)了解(liǎojiě)腸段平滑肌的生理特性學(xué)習(xí)離體腸段平滑肌的實驗方法第一頁,共24頁。原理胃腸道平滑肌經(jīng)常(jīngcháng)維持一定的緊張性收縮,在體內(nèi)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。在神經(jīng)及某些藥物的作用下,這種緊張性及運動節(jié)律可發(fā)生改變。神經(jīng)調(diào)節(jié)中,副交感神經(jīng)通過釋放乙酰膽堿使其運動加強,交感神經(jīng)通過釋放去甲腎上腺素使其運動減弱。第二頁,共24頁。第三頁,共24頁。原理2.胃腸道平滑肌以膽堿能神經(jīng)占優(yōu)勢,小劑量或低濃度的乙酰膽堿能激動M受體,產(chǎn)生與興奮膽堿能神經(jīng)節(jié)后纖維(xiānwéi)相似的作用,興奮胃腸道。阿托品與膽堿受體結(jié)合阻斷膽堿能遞質(zhì)從而產(chǎn)生抗膽堿作用。新斯的明作為膽堿酯酶的抑制劑,抑制乙酰膽堿的分解,使乙酰膽堿的作用持續(xù)加強。第四頁,共24頁。原理3.消化道平滑肌的特點是興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性,自動節(jié)律性,對化學(xué)物質(zhì),溫度和機(jī)械牽張刺激(cìjī)較敏感等特點,給予離體腸肌一接近于在體情況的適宜環(huán)境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本實驗觀察當(dāng)模擬內(nèi)環(huán)境發(fā)生變化時,離體小腸平滑肌運動的變化。第五頁,共24頁。第六頁,共24頁。第七頁,共24頁。原理4.該實驗方法不僅在理論上證明平滑肌的生理特性,而且(érqiě)還可用來測量化學(xué)物質(zhì)或藥物的生理學(xué)特性,被稱為生物學(xué)鑒定法。第八頁,共24頁。儀器設(shè)備家兔,手術(shù)臺,手術(shù)器械,恒溫(héngwēn)水浴槽,恒溫(héngwēn)水浴,RM6240,張力換能器,氧氣袋,鐵架臺,燒杯,滴管,注射器,臺氏液,阿托品(0.5mg/ml),新思的明(1mg/ml)0.01%腎上腺素,0.01%乙酰膽堿,1mol/LNaOH,1mol/LHCl,2%戊巴比妥鈉。第九頁,共24頁。第十頁,共24頁。方法(fāngfǎ)與步驟一.胃腸運動觀察:1.手術(shù)操作:(1)家兔稱重,用戊巴比妥鈉麻醉(20毫克/公斤體重)。(2)將兔子(tùzi)仰臥位固定于手術(shù)臺上。(3)剪腹部毛,沿腹中線切口,剖開腹腔,露出胃和腸。
第十一頁,共24頁。方法(fāngfǎ)與步驟2.實驗項目:(1)觀察正常情況下胃和小腸的運動。注意其緊張度(可用手觸摸(chùmō)胃測其緊張度)。(2)由耳緣靜脈靜脈注射新思的明0.2-0.3ml,或滴幾滴于胃腸漿膜上,觀察胃和小腸運動的變化。(3)在新思的明作用的基礎(chǔ)上,注射阿托品0.5ml,觀察胃和小腸運動的變化。第十二頁,共24頁。方法(fāngfǎ)與步驟二.離體小腸平滑肌的生理特性:1.實驗準(zhǔn)備:裝備麥?zhǔn)显〔?,將其放置?7℃恒溫水浴。麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)盛滿37℃臺氏液,將充滿氧氣(yǎngqì)的球膽經(jīng)橡皮管連接至麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤苌?,不斷注入氧?yǎngqì),調(diào)節(jié)氣流速度,使氣泡一個接一個注入。第十三頁,共24頁。第十四頁,共24頁。方法(fāngfǎ)與步驟2.在幽門下端分離十二指腸3-4cm,雙結(jié)扎此腸段,于雙結(jié)扎中間將腸段剪斷,用臺氏液反復(fù)沖洗腸內(nèi)容物,在其兩端穿線,將一端固定于麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤軖煦^(guà〃gōu)上,另一端與張力換能器相連。第十五頁,共24頁。方法(fāngfǎ)與步驟3.待此裝置穩(wěn)定10-20分鐘后,使用RM6240記錄小腸(xiǎocháng)段平滑肌運動曲線。第十六頁,共24頁。4.實驗項目:(1)觀察記錄37℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮(shōusuō)曲線。(2)觀察記錄25℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮(shōusuō)曲線。第十七頁,共24頁。(3)待臺氏液溫度穩(wěn)定在37℃后,用滴管向浴槽中加入0.01%乙酰膽堿3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動的變化。然后(ránhòu)用臺氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺氏液。(4)待平滑肌穩(wěn)定后,加入0.01%腎上腺素3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動的變化。然后(ránhòu)用臺氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺氏液。第十八頁,共24頁。方法(fāngfǎ)與步驟(5)滴加1mol/LHCl溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(huódòng)的變化。然后用臺氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺氏液。(6)滴加1mol/LNaOH溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(huódòng)的變化。然后用臺氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺氏液。第十九頁,共24頁。注意事項1.實驗操作過程中,注意動物保溫。經(jīng)常用溫?zé)岬纳睇}水濕潤胃腸。2.取小腸標(biāo)本時勿牽拉。3.保證(bǎozhèng)氧氣的補充。第二十頁,共24頁。實驗(shíyàn)要求描述各項實驗項目所得實驗現(xiàn)象并分析。描記小腸平滑肌運動曲線(qūxiàn),并分析各種因素對其影響的機(jī)制。第二十一頁,共24頁。表1不同處理(chǔlǐ)因素對小腸平滑肌活動的影響(次/min,g)組別頻率(次/min)振幅(g)正常(37°C)25°C乙酰膽堿腎上腺素鹽酸氫氧化鈉第二十二頁,共24頁。乙酰膽堿作用于腸道平滑肌M3受體腎上腺素主要作用于腸道平滑肌β2受體,此受體為抑制性受體,抑制胃腸道運動。PH過高、過低,收縮幅度及張力都會降低,最適PH時收縮效果最好。腸管平滑肌對溫度改變極為敏感,當(dāng)溫度降到30℃以下時,由于代謝水平的降低,興奮性減弱,可出現(xiàn)收縮曲線基線下移,頻率變慢,收縮幅度變小。有時可能會見到基線先上移后下降的現(xiàn)象。這是因為降溫本身對腸管是一種刺激,也可短暫(duǎnzàn)地加強代謝活動,所以肌張
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