探討益氣活血法治療盆腔炎性疾病的作用機(jī)理,中醫(yī)婦科論文

探討益氣活血法治療盆腔炎性疾病的作用機(jī)理,中醫(yī)婦科論文盆腔炎性疾病是婦科常見疾病之一，世界衛(wèi)生組織估計(jì)，性傳播疾病泛濫導(dǎo)致全世界每年新增3億3千多萬患者，華而不實(shí)有10%～20%將發(fā)展成為盆腔炎性疾病，已成為社會(huì)公共問題。盆腔炎性疾病是指女性上生殖道的一組感染性疾病。若沒有能及時(shí)、徹底治療，可致不孕、輸卵管妊娠、慢性盆腔痛及炎癥反復(fù)發(fā)作。因患者體質(zhì)較差，病情拖延以及妊娠產(chǎn)褥感染、術(shù)后、慢性炎癥所致的瘢痕粘連以及盆腔充血而致下腹疼痛，痛引腰骶。進(jìn)而嚴(yán)重影響婦女的生殖健康，且增加家庭與社會(huì)負(fù)擔(dān)。近年來，中醫(yī)藥研究得到了較大進(jìn)展，并得到婦科界的重視。本研究從瘀、虛為主要病機(jī)立論，改變中藥中益氣與活血藥物配伍的比例，通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用補(bǔ)中益氣、活血化瘀為主要成效的益氣活血湯劑治療盆腔炎性疾病，研究益氣活血湯劑對(duì)機(jī)械損傷加混合菌感染法制備的盆腔炎性疾病大鼠模型的病理組織形態(tài)學(xué)及炎性因子變化，進(jìn)一步驗(yàn)證其有效性及藥物安全性，討論此方治療盆腔炎性疾病的作用機(jī)理，為益氣活血法防治盆腔炎性疾病在臨床上進(jìn)一步推廣使用奠定理論基礎(chǔ)。1材料與方式方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar雌性大鼠100只，體重(20020)g(北京華阜康生物科技股份有限公司)。動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(京)2018－0004。1.2藥品與試劑。1.2.1中藥。益氣活血湯劑A方1∶2:炙黃芪10g，參10g，甘草6g，丹參20g，赤芍15g，延胡索10g，沒藥10g，紅藤30g，白芍10g，忍冬藤30g，川楝子10g，香附10g，柴胡6g。益氣活血湯劑B方1∶1:炙黃芪30g，參10g，甘草6g，丹參15g，赤芍15g，延胡索10g，沒藥6g，紅藤30g，白芍10g，忍冬藤30g，川楝子10g，香附10g，柴胡6g。益氣活血湯劑C方2∶1:炙黃芪30g，參20g，甘草10g，丹參10g，赤芍10g，延胡索10g，沒藥3g，紅藤30g，白芍10g，忍冬藤30g，川楝子10g，香附10g，柴胡6g。由天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院統(tǒng)一熬制成湯劑。1.2.2菌液埃希氏大腸桿菌和金黃色葡萄球菌以2∶1比例溶于無菌超純水，配制濃度為3.0109個(gè)/mL混合菌懸液(購(gòu)于北京標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng)－北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院)。1.2.3試劑盒白介素－2(IL－2)、白介素－6(IL－6)、白介素－10(IL－10)、TNF－、IgG及IgM酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒(購(gòu)于天津?yàn)笊锛夹g(shù)有限公司)。1.2.4麻醉劑10%水合氯醛溶液。1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器ELX800酶標(biāo)儀、石蠟包埋機(jī)、石蠟切片機(jī)、光學(xué)顯微鏡、電子天平、恒溫水浴鍋、高速低溫離心機(jī)、－30℃超低溫冰箱。1.4實(shí)驗(yàn)方式方法1.4.1模型制備用10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉大鼠(0.3mL/100g)，麻醉滿意后，動(dòng)物取仰臥位，固定頭和四肢于操作臺(tái)上，腹中部皮膚去毛，碘伏消毒。取下腹正中切口，長(zhǎng)約1cm，沿腹正中線剪開進(jìn)腹，在膀胱后方找出子宮，暴露并固定住子宮，用1mL注射器抽取0.4mL混合細(xì)菌懸液，向雙側(cè)宮腔內(nèi)各注入0.2mL菌液。在注入菌液之前用注射器機(jī)械損傷子宮內(nèi)膜組織，然后注入菌液至雙側(cè)子宮內(nèi)，注射完成后抽出注射器，用直鑷捏住針眼，停留半分鐘左右，以防止菌液流出。將子宮回納腹腔，用1絲線分別縫合腹壁和皮膚。假手術(shù)組動(dòng)物開腹后，不做任何處理，隨即關(guān)腹。術(shù)后動(dòng)物自由飲水，普通飼料飼養(yǎng)，不使用抗生素。1.4.2分組分組:未孕成年Wistar大鼠100只，體重(20020)g。按體重用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件完全隨機(jī)法隨機(jī)取15只用做空白組(D組)、10只用做假手術(shù)組(E組)，其余用于造模。飼養(yǎng)14天后用隨機(jī)方式方法分為4組，即益氣活血比為1∶1組(B組)20只、益氣活血比為1∶2組(A組)20只、益氣活血比為2∶1組(C組)20只、和模型組(F組)15只，共計(jì)6個(gè)實(shí)驗(yàn)組。1.4.3給藥治療組A組、B組、C組于造模后的第14天開場(chǎng)給藥，以人的標(biāo)準(zhǔn)體重60kg換算成250～300g體重大鼠的每日用藥量，采用人與動(dòng)物的體外表積計(jì)算法換算，治療組給予藥液，每日1次，連續(xù)給藥。正常組、模型組、假手術(shù)組均給予相應(yīng)的蒸餾水灌胃，正常飼養(yǎng)，無特殊處理。1.4.4取材與標(biāo)本制備取材訂于給藥后的第15d清晨以及第22d清晨?jī)纱巍５谝淮稳〔碾S機(jī)從每組中取出一半的大鼠，剩下的動(dòng)物繼前飼養(yǎng)，直到第22d全部取材為止。取材前一天禁食，取材時(shí)10%水合氯醛溶液腹腔麻醉，抽取腹主動(dòng)脈血液約8mL置于無抗凝劑的試管內(nèi)，37℃水浴30min，離心機(jī)(2500r/min)離心20min取上清液分裝，置－30℃保存。1.5觀察指標(biāo)及測(cè)定取血后的大鼠暴露子宮，取雙側(cè)子宮，剔除結(jié)締組織，放入10%中性福爾馬林溶液固定，觀察子宮組織病理學(xué)的變化。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方式方法采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件。先從對(duì)大鼠成活率進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1宏觀上觀察實(shí)驗(yàn)中死亡大鼠統(tǒng)計(jì):造模當(dāng)天無死亡大鼠，從第2天開場(chǎng)到第10天，平均天天死亡大鼠為1.9只，除了兩只因肺炎以及另外3只發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)被啃食無法做死亡的分析外，其余大鼠均因盆腔感染致死;造模的第14天開場(chǎng)灌藥，此后無因盆腔感染死亡的大鼠。見表1。結(jié)論:可以為益氣活血藥物在治療模型的Wsitar大鼠的盆腔炎性疾病有效。2.2子宮組織學(xué)肉眼觀察空白組:子宮未見明顯充血及水腫，子宮構(gòu)造清楚明晰，無宮腔增粗及積液，與腹腔周圍組織無粘連;假手術(shù)組:子宮未見明顯異常，構(gòu)造清楚明晰，與腹腔及周圍組織無粘連;模型組:子宮充血水腫嚴(yán)重，有炎性液體滲出，隱約可聞及腥臭味;治療14d，子宮外表輕度充血、水腫，少數(shù)模型出現(xiàn)纖維組織粘連;治療21d，子宮未見充血水腫，少數(shù)有纖維組織粘連，大部分痊愈。光鏡觀察:模型組可見腺體萎縮，間質(zhì)輕度增生，少量淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，較多嗜酸性粒細(xì)胞侵潤(rùn)，波及基層;治療14d內(nèi)膜間質(zhì)纖維組織輕度增生，腺體輕度擴(kuò)張，可見少量淋巴細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞;治療21d，間質(zhì)輕度增加，較多淋巴、嗜酸、少量中性粒細(xì)胞侵潤(rùn)，肌層灶性炎癥，甚至近正常，偶見淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞。2.3鏡下觀察(HE染色100和HE染色成400)見插頁圖1～9。2.4實(shí)驗(yàn)大鼠死亡分析灌藥前共死亡19只，平均天天1.9只，詳細(xì):模型組1只因手術(shù)傷口縫線開裂;3只同類被啃食，無法詳細(xì)分析死亡原因;其余均死于盆腔感染。假手術(shù)組1只死于肺炎。灌藥后共死亡3只，華而不實(shí)2只因灌藥時(shí)灌入肺中死亡，另外1只因死于肺炎。分析死于盆腔感染的原因有3點(diǎn):(1)手術(shù)操作不當(dāng)，注射菌液不小心流到盆腔;(2)混合菌溶液濃度不穩(wěn)定，同一只注射器反復(fù)使用;(3)縫合時(shí)操作未注意無菌操作，感染了盆腔組織。3討論本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示清楚此益氣活血湯劑治療盆腔炎性疾病具有較顯著的療效，通過組織學(xué)觀察結(jié)果還可講明，益氣活血藥物能夠治療盆腔炎性疾病，并且很大程度上提高了模型大鼠的生存率。益氣活血湯劑可有效抑制炎性子宮組織水腫及內(nèi)膜腺體擴(kuò)張，講明此方藥可減輕炎癥反響，進(jìn)而有效地修復(fù)受損組織，加快機(jī)體生理功能恢復(fù)。研究中采用了三組治療方藥，益氣活血B方為基礎(chǔ)方，其藥物組成是根據(jù)名老中醫(yī)治療盆腔炎性疾病的經(jīng)歷體驗(yàn)方銀紅丸(天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院院內(nèi)制劑)加減化裁而成，且銀紅丸經(jīng)過三十多年的臨床應(yīng)用，療效確切。益氣活血B方藥物組成由健脾益氣(炙黃芪、參、甘草)、活血化瘀(丹參、赤芍、延胡索、沒藥)和清熱解毒、疏肝理氣(紅藤、白芍、忍冬藤、川楝子、香附、柴胡)三組藥物組成，華而不實(shí)益氣組比活血組為1∶1，其劑量為臨床常用劑量。而益氣活血A方和益氣活血C方是在益氣活血B方基礎(chǔ)上的改進(jìn)方，益氣活血A方中益氣組比活血組為1∶2，益氣活血C方中益氣組比活血組為2∶1，這兩種比例也是有據(jù)可循，均為臨床上安全劑量范圍內(nèi)且為常用劑量，整個(gè)劑量加減變化經(jīng)過中，清熱解毒藥及疏肝理氣藥物組成和劑量均保持不變。益氣活血A方中用活血藥重，意重在活血兼顧益氣。丹參，味苦，性微寒，入心、心包、肝經(jīng)，具有活血調(diào)經(jīng)，祛瘀止痛、涼血消癰，除煩安神之成效。(本草綱目〕謂其能破宿血，補(bǔ)新血。(本草便讀〕中:丹參，功同四物，能祛瘀以生新味甘苦以調(diào)經(jīng)，不過專通營(yíng)分為調(diào)理血分之首藥。除此之外因盆腔炎性疾病纏綿難愈，易反復(fù)發(fā)作，患者常伴有焦慮情緒，丹參入心包經(jīng)有除煩安神之功。赤芍:味苦，性微寒，歸肝經(jīng)，有清熱涼血、散瘀止痛之功。(神農(nóng)本草經(jīng)〕:主邪氣腹痛，除血痹，破堅(jiān)積，寒熱疝瘕，止痛，利小便。(本草求真〕:赤則止有散邪行血之意赤則能于血中活滯。治療血滯之痛經(jīng)、癥瘕之腹痛，常與延胡索等配伍，加強(qiáng)散瘀止痛之成效。延胡索味辛、苦，性溫。歸心、肝、脾經(jīng)。具有活血，行氣，止痛之成效，是活血行氣止痛之良藥。(本草綱目〕:延胡索，能行血中氣滯，氣中血滯，故專治一身上下諸痛，用之中的，妙不可言。蓋延胡索活血化氣，第一品藥也。無論何種痛癥，均可配伍應(yīng)用。配伍香附等藥可治氣滯血瘀之痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)后瘀滯腹痛。沒藥:味辛、苦，性平，歸心、肝、脾經(jīng)，具有活血止痛，消腫生肌之成效。(本草綱目〕曰:沒藥散血，皆能止痛。(醫(yī)學(xué)衷中參西錄〕中:又善治女子行經(jīng)腹疼，產(chǎn)后瘀血作痛，月事不能時(shí)下。臨床多用于治療血瘀氣滯較重之痛癥。益氣活血C方中用益氣藥比例大，意重在益氣兼顧活血。參:味甘，性平，歸脾、肺經(jīng)。具有補(bǔ)脾肺氣，補(bǔ)血，生津之成效。(本草從新〕曰:補(bǔ)中益氣，和脾胃，除煩渴。中氣微虛，用以調(diào)補(bǔ)，甚為平安。(本草正義〕曰:補(bǔ)脾養(yǎng)胃，潤(rùn)肺生津，健運(yùn)中氣，本于人參不相甚遠(yuǎn)。炙黃芪:味甘，性微溫，歸脾、肺經(jīng)，具有健脾補(bǔ)中升陽舉陷，益衛(wèi)固表，利尿，托毒生肌之成效。為補(bǔ)中益氣要藥。(醫(yī)學(xué)衷中參西錄〕曰:能補(bǔ)氣，兼能升氣，善治胸中大氣(即宗氣)下陷。白芍:苦、酸，微寒。歸肝、脾經(jīng)。主養(yǎng)血斂陰，柔肝止痛。常配伍柴胡治療血虛肝郁之疼痛。(本草求真〕:(白芍)有斂陰益營(yíng)之力;能于土中瀉木。香附:辛、微苦、微甘，性平，歸肝、脾、三焦經(jīng)。主有疏肝解郁，調(diào)經(jīng)止痛，理氣調(diào)中之成效。善解肝氣之郁結(jié)，味苦疏泄以平肝氣之橫逆，為疏肝解郁，行氣止痛之要藥。其(本草求真〕謂之能入肝膽二經(jīng)，開郁散滯，活血通經(jīng)，兼行諸經(jīng)氣分。(本草綱目〕謂之氣病之總司，女科之主帥是血中之氣藥，善走能守，調(diào)經(jīng)理氣止痛。慢性盆腔炎患者常因病情拖延難愈而肝氣不舒，導(dǎo)致氣逆而上，故使用本品以疏理肝氣，行氣止痛。大血藤:苦，平。歸大腸、肝經(jīng)。主清熱解毒，活血，祛風(fēng)，止痛。(本草圖經(jīng)〕:攻血，治血塊。常與香附等藥配伍，用治經(jīng)閉痛經(jīng)。柴胡:苦、辛，微寒。歸肝、膽經(jīng)。疏肝解郁，升舉陽氣。本品性善條達(dá)肝氣，疏肝解郁。(本草綱目〕:平肝、膽、三焦、包絡(luò)相火，婦人熱入血室，經(jīng)水不調(diào)。川楝子:苦，寒，有小毒。歸肝、胃、小腸、膀胱經(jīng)。主行氣止痛。每與延胡索配伍，用于肝郁氣滯之胸腹諸痛。忍冬藤:又名銀花藤，味甘，性寒。歸肺、胃經(jīng)。清熱解毒，疏風(fēng)通絡(luò)。甘草:甘、平。歸心、肺、脾、胃經(jīng)。補(bǔ)脾益氣，緩急止痛，調(diào)和諸藥。常隨證配伍用于血虛、血瘀等原因?qū)е碌碾涓箶伡弊魍础２l(fā)揮調(diào)和藥性的作用，亦可矯正藥味。(本草正〕:(甘草)得中和之性，有調(diào)補(bǔ)之功，隨氣藥入氣，隨血藥入血，無處不往，故稱國(guó)老。常與黃芪等補(bǔ)脾益氣配伍治療脾氣虛弱之證。諸藥合用，共行肝、脾、心之氣滯，益脾肺之氣血，氣血同治，動(dòng)靜結(jié)合，寒溫并用，攻補(bǔ)兼施，既治又防，使本方充分具體表現(xiàn)出祛瘀而不傷正，扶正而不斂邪，虛實(shí)、氣血兼顧的配伍特點(diǎn)，共奏活血化瘀，理氣止痛，益氣之成效。以下為參考文獻(xiàn)。［1］周玉海，李克湘．中醫(yī)藥治療慢性盆腔炎的臨床研究進(jìn)展［J］．湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2002，6(8):316．［2］黃麗，孫培文，羅雋，等．慢性盆腔炎模型的建立與評(píng)價(jià)［J］．中南藥學(xué)，2018，8(6):469－472．［3］華宙佳，丁彩飛．膈下逐瘀湯在治療婦科疾病中的應(yīng)用進(jìn)展［J］