第四章 清洗與消毒

第四章清洗與消毒一、清洗主要針對(duì)新的或重新使用的器皿，清除雜質(zhì)和微生物，使其不殘留任何影響細(xì)胞生長的成分。有害物質(zhì)：微生物細(xì)胞殘余物非營養(yǎng)成分的化學(xué)物質(zhì)1.玻璃器皿的清洗浸泡（清水浸泡、5%稀鹽酸浸泡過夜）→刷洗（軟毛刷、優(yōu)質(zhì)洗滌劑）→浸酸（不少于6小時(shí)，一般過夜）→沖洗（自來水十遍，蒸餾水2～3次）→晾干備用要求：干凈透明、無油跡，不能殘留任何物質(zhì)

成分強(qiáng)酸清潔液次強(qiáng)酸清潔液弱酸清潔液重鉻酸鉀（g)63120100硫酸(ml)1000200100蒸餾水(ml)2002001000

棕紅色深綠色，要重新配制2.橡膠制品的清洗自來水浸泡→

0.5mol/LNaOH煮沸10～

15min（除掉蛋白質(zhì)）→流水沖洗→0.5mol/LHCl浸泡30min→流水沖洗→自來水沖洗2次→蒸餾水清洗2～

3次

→50℃烤干備用。3.塑料器皿的清洗浸泡（洗滌劑）→沖洗（自來水10遍，蒸餾水3次）→

70%乙醇沖洗→無水乙醇沖洗1次→無菌室內(nèi)紫外線照射晾干4.不銹鋼除菌濾器的清洗新的或使用后的流水沖洗15min→三蒸水沖洗濾器2～

3次→干燥備用去離子水浸泡濾膜24h→安裝濾器→消毒滅菌。包裝:

對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)用品進(jìn)行消毒前，要進(jìn)行嚴(yán)密包裝，以便于消毒和貯存。常用的包裝材料：牛皮紙、硫酸紙、棉布、鋁飯盒、較大培養(yǎng)皿等，近幾年用鋁箔包裝，非常方便，適用。培養(yǎng)皿、注射器、金屬器械等用牛皮紙包裝后再裝入飯盒內(nèi)，較大的器皿可以進(jìn)行局部包扎。

二、消毒和滅菌主要針對(duì)微生物污染◆物理消毒法1、紫外線消毒是一種低能量的電磁輻射，可以殺滅多種微生物，多用于無菌室空氣、地面以及超凈工作臺(tái)面的消毒。消毒效果與輻射強(qiáng)度和照射劑量呈正相關(guān)，輻射強(qiáng)度隨距燈管距離的增加而降低，照射劑量和照射時(shí)間呈正比。

缺點(diǎn)：穿透力弱；產(chǎn)生臭氧，污染空氣，對(duì)身體有害。2、電離輻射滅菌以60Co、X射線和電子加速器產(chǎn)生的加速離子輻照物品殺滅微生物的方法。優(yōu)點(diǎn)：滅菌時(shí)物品不會(huì)升溫，尤其適用不耐熱物品的消毒；輻射的穿透力強(qiáng)，可直接對(duì)密封包裝的物品進(jìn)行消毒。缺點(diǎn)：由于電離輻射有較強(qiáng)的誘變作用，不適合消毒活的生物材料。適用于消毒量大和不適做高壓或?yàn)V過等培養(yǎng)用品。

3.濕熱消毒以高壓（103.4kPa）蒸汽滅菌最為常用，是最有效的一種方法。壓力蒸汽滅菌器消毒好的物品應(yīng)注意烘干。

4.干熱消毒電烤箱160℃以上，保持90～120min，才能殺死細(xì)菌芽胞，達(dá)到滅菌目的。適用于玻璃器皿的消毒。

5.過濾除菌主要用于培養(yǎng)用液的除菌?！艋瘜W(xué)消毒法采用化學(xué)消毒劑消毒那些不能用物理等方法消毒的物品和場地，如無菌室的空氣、臺(tái)面、操作者的皮膚等。常用化學(xué)消毒劑：來蘇兒、新潔爾滅、過氧乙酸、70%酒精、乳酸蒸汽等◆抗生素的應(yīng)用主要適用于培養(yǎng)用液的消毒。消毒滅菌物品壓力蒸汽干熱過濾紫外線化學(xué)化學(xué)電離抗生素氣體消毒劑輻射培養(yǎng)室、工作臺(tái)+++玻璃制品+++金屬器械++++塑料用品+++橡膠制品++++培養(yǎng)用液