第十七章合成抗菌藥物的分析2

第一節(jié)磺胺類藥物分析治療細(xì)菌感染性疾病的化學(xué)合成藥物

磺胺類藥物的發(fā)現(xiàn)，開創(chuàng)了化學(xué)治療的新紀(jì)元–使死亡率很高的細(xì)菌性傳染疾病得到控制.典型藥物第一節(jié)磺胺類藥物的分析

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與代表藥物芳伯氨基磺酰胺基磺胺異噁唑

（二）性質(zhì)

1.兩性化合物芳伯氨基（弱堿性）和磺酰胺基（酸性）2.芳伯氨基可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量3.與金屬離子反應(yīng)磺酰胺基氮原子上的氫比較活潑，可與某些金屬離子（如硫酸銅）反應(yīng)生成沉淀4.與生物堿沉淀試劑的反應(yīng)5.紫外與紅外吸收光譜特征二、鑒別試驗(yàn)

（一）芳香第一胺反應(yīng)（二）與金屬離子反應(yīng)——硫酸銅磺胺異惡唑淡棕色→暗綠色↓

（四）IR（五）色譜法（三）UV復(fù)方磺胺甲噁唑片的鑒別：

1.取本品的細(xì)粉適量（約相當(dāng)于磺胺甲噁唑0.2g），加甲醇10ml，振搖，濾過，取濾液作為供試品溶液；另取磺胺甲噁唑?qū)φ掌?.2g與甲氧芐啶對(duì)照品40mg，加甲醇10ml溶解，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅤB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-二甲基甲酰胺（20∶2∶1）為展開劑，展開，晾干，置紫外燈（254nm）下檢視。供試品溶液所顯兩種成分的主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。

2.在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液兩主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液兩主峰的保留時(shí)間一致。以上兩項(xiàng)可選做一項(xiàng)。三、含量測(cè)定

（一）亞硝酸鈉滴定法Ch.P.（2010）磺胺嘧啶鋅軟膏的含量測(cè)定：取本品約5g，精密稱定，置燒杯中，加三氯甲烷30ml，微溫?cái)嚢枋够|(zhì)溶解，放冷，照永停滴定法（附錄ⅦA），用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于30.00mg的C20H18N8O4S2Zn·2H2O。（二）非水酸量法磺胺異噁唑Ch.P.（2010）

（三）紫外-可見分光光度法

1．直接紫外分光光度法

Ch.P（2005）復(fù)方磺胺嘧啶片中的磺胺嘧啶的含量測(cè)定

308nm直接測(cè)定，TMP無干擾2.雙波長分光光度法復(fù)方磺胺甲惡唑片的含量測(cè)定

Ch.P（2000）磺胺甲惡唑甲氧芐啶

測(cè)定波長257nm239nm

參比波長～304nm～295nmCh.P（2005）HPLCCh.P.（2010）HPLC復(fù)方磺胺嘧啶片的含量測(cè)定

Ch.P（2005）磺胺嘧啶308nm直接測(cè)定甲氧芐啶測(cè)定波長～277.4nm

參比波長308nmCh.P.（2010）HPLC（四）高效液相色譜法

Ch.P.（2010）聯(lián)磺甲氧芐啶片的含量測(cè)定：

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水-三乙胺（200∶799∶1）（用氫氧化鈉試液或冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至5.9）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為240nm。理論板數(shù)按甲氧芐啶峰計(jì)算不低于4000，磺胺甲噁唑峰、磺胺嘧啶峰與甲氧芐啶峰的分離度應(yīng)符合要求。

測(cè)定法

取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于磺胺甲噁唑22mg），置100ml量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液適量，超聲處理使主成分溶解，用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取磺胺甲噁唑?qū)φ掌?、磺胺嘧啶?duì)照品和甲氧芐啶對(duì)照品各適量，精密稱定，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含磺胺甲噁唑0.22mg、磺胺嘧啶0.22mg與甲氧芐啶89μg的溶液，搖勻，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。例1.與硫酸銅生成草綠色沉淀的是A.磺胺甲惡唑B.磺胺嘧啶C.甲氧芐啶D.磺胺異惡唑E.磺胺醋酰鈉例2.中國藥典收載磺胺甲惡唑的含量測(cè)定方法是A.非水溶液滴定法B.紫外分光光度法C.氮測(cè)定法D.NaNO2滴定法E.碘量法

例3.雙波長分光光度法測(cè)定復(fù)方磺胺甲惡唑片時(shí)，選擇兩個(gè)測(cè)定波長的原則是

A.磺胺甲惡唑在兩波長處吸收度相等

B.磺胺增效劑甲氧芐啶（TMP）在兩波長處吸收度相等

C.磺胺甲惡唑在兩波長處吸收度不等

D.磺胺甲惡唑在兩波長處的吸收度的差值應(yīng)盡量大

E.磺胺增效劑甲氧芐啶在兩波長處的吸收度差值應(yīng)盡量小第二節(jié)喹諾酮類藥物的分析

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與代表藥物

吡哌酸

諾氟沙星

環(huán)丙沙星

氧氟沙星

氟羅沙星

依諾沙星

司帕沙星（二）性質(zhì)

1.酸堿兩性2.

不穩(wěn)定性

3.有機(jī)氟化物的反應(yīng)

4.紫外與紅外吸收光譜特征二、鑒別試驗(yàn)

（一）化學(xué)鑒別法1.與丙二酸的呈色反應(yīng)

鹽酸左氧氟沙星片的鑒別：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于左氧氟沙星10mg），置干燥具塞試管中，加丙二酸約10mg與醋酐0.5ml，在水浴中加熱5~10分鐘，溶液顯紅棕色。2.鹽酸鹽與甲磺酸鹽的鑒別Ch.P.（2010）甲磺酸培氟沙星的鑒別：取本品約30mg，加氫氧化鈉0.2g，加水?dāng)?shù)滴，溶解后置酒精燈上小火蒸干至炭化，加水?dāng)?shù)滴與2mol/L鹽酸溶液3～4ml，緩緩加熱，即產(chǎn)生二氧化硫氣體，能使?jié)駶櫟牡馑徕浀矸墼嚰垼ㄈV紙條浸入含有5%碘酸鉀溶液與淀粉指示液的等體積混合液中濕透后，取出干燥，即得）顯藍(lán)色。（二）光譜法（三）色譜法三、特殊雜質(zhì)檢查

（一）溶液澄清度的檢查（二）吸光度喹諾酮類藥物在可見光區(qū)無吸收，通過控制在420～450nm波長處的吸光度，以控制有色雜質(zhì)的限量。

司帕沙星中吸光度的檢查：取本品，精密稱定，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.4mg的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄ⅣA），在440nm的波長處測(cè)定吸光度，不得過0.15。（三）有關(guān)物質(zhì)HPLC（四）光學(xué)異構(gòu)體左氧氟沙星中光學(xué)異構(gòu)體的檢查：

取本品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含1.0mg的溶液，作為供試品溶液，精密量取適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1ml中約含10g的溶液，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法（附錄VD）測(cè)定。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以硫酸銅D-苯丙氨酸溶液（取D-苯丙氨酸1.32g與硫酸銅1g，加水1000ml溶解后，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至3.5）-甲醇（82∶18）為流動(dòng)相；柱溫40℃，檢測(cè)波長為294nm。取氧氟沙星對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液，取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，右氧氟沙星與左氧氟沙星依次流出，右、左旋異構(gòu)體峰的分離度應(yīng)符合要求。取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的25%，再精密量取供試品溶液和對(duì)照溶液各20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液色譜圖中右氧氟沙星峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積（1.0%）。（五）殘留溶劑（六）防腐劑

Ch.P.（2010）鹽酸環(huán)丙沙星滴眼液采用HPLC法檢查防腐劑苯扎溴銨或羥苯乙酯，規(guī)定供試品中如含苯扎溴銨或羥苯乙酯，應(yīng)為標(biāo)示量的80%～120%；氧氟沙星滴眼液亦采用HPLC法檢查防腐劑苯扎溴銨，規(guī)定供試品中如含苯扎溴銨，應(yīng)為標(biāo)示量的80%～120%。諾氟沙星滴眼液除采用HPLC法檢查防腐劑羥苯甲酯、羥苯丙酯外，還采用雙硫腙滴定法檢查硫柳汞。四、含量測(cè)定

（一）非水堿量法（二）紫外分光光度法諾氟沙星乳膏的含量測(cè)定：

精密稱取本品適量（約相當(dāng)于諾氟沙星5mg），置分液漏斗中，加三氯甲烷15ml，振搖后，用氯化鈉飽和的0.1%氫氧化鈉溶液25ml、20ml、20ml和10ml分次提取，合并提取液，置100ml量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密