GB/T 27621-2011馬鼻肺炎病毒PCR檢測方法

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27621—2011

馬鼻肺炎病毒PCR檢測方法

ProtocolofPCRforequinerhinopneumonitisvirus

2011-12-30發(fā)布2012-04-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T27621—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人冉多良單文魯馬偉王傳鋒張偉

:、、、、。

Ⅰ

GB/T27621—2011

馬鼻肺炎病毒PCR檢測方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了馬鼻肺炎病毒的檢測方法

PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于馬匹的流通和進(jìn)出境檢疫實(shí)施馬鼻肺炎的現(xiàn)場檢疫和后續(xù)監(jiān)管工作一步法

。PCR

檢測技術(shù)適用于實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞毒樣品檢測巢式檢測技術(shù)適用于臨床疑似樣品及細(xì)胞毒樣品檢測

;PCR。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

馬傳染性鼻肺炎

EHV:equinerhinopneumonitis,。

核糖核酸

RNA:ribonucleicacid,。

細(xì)胞病變

CPE:cytopathiceffect,。

溴化乙錠

EB:ethidiumbromide,。

乙二胺四乙酸

EDTA:ethylenediaminetetraaceticacid,。

十二烷基磺酸鈉

SDS:sodiumdodecylsulfate,。

倉鼠幼腎細(xì)胞

BHK-21:babyhamsterkidneycell,。

磷酸鹽緩沖液

PBS:phosphatebuffersodium,。

4試劑和材料試劑不經(jīng)注明均為分析純

(,)

41水符合中一級水的規(guī)格

.:GB/T6682。

42酶

.RNAA。

43酚三氯甲烷

.-。

44瓊脂糖凝膠見

.2%:A.1。

45溴化乙錠見

.(10μg/μL):A.2。

46聚合酶

.DNA(5U/μL)。

47電泳緩沖液見

.50×TAE(pH8.5):A.3。

482+

.10×PCRBuffer(plusMg)。

49

.2.5mmol/mLdNTP。

410蛋白酶

.K(20mg/mL)。

411細(xì)胞

.BHK