紫外-可見分光光度法

第七章紫外-可見分光光度法◆學習目標⊙◆知識要求⊙◆能力要求⊙◆知識要求1．掌握光的吸收定律概念、表達式及條件，吸光系數和吸收光譜的意義，常用定量分析方法的原理和應用。2．熟悉紫外-可見分光光度計的基本結構、吸光度測量條件的選擇、偏離光的吸收定律的主要因素。3．了解光譜分析法的分類、紫外-可見吸收光譜的產生機制、定性分析的依據和方法。案例導入

在夏天參加戶外活動時，如果天氣晴朗，就應該注意保護皮膚，否則，暴露在火辣辣太陽之下的皮膚，數小時后就會出現紅腫、瘙癢、發(fā)熱、刺痛癥狀，數日后出現蛻皮現象，這表明太陽光中有一種光線能傷害生物細胞?？茖W家研究證實，這種光線是紫外線。

根據可見光、紫外光與物質分子的相互作用建立了紫外-可見分光光度法。

根據待測物質（原子或分子）發(fā)射或吸收的電磁輻射，以及待測物質與電磁輻射的相互作用而建立起來的定性、定量和結構分析方法，統(tǒng)稱為光學分析法。利用光譜進行定性、定量和結構分析的方法稱為光譜分析法，簡稱光譜法。

紫外-可見分光光度法：研究物質在紫外-可見光區(qū)（200~760nm）分子吸收光譜的光譜分析法第一節(jié)概述1．電磁輻射（電磁波，光）：以巨大速度通過空間，不需要任何物質作為傳播媒介的粒子流。

波長范圍：紫外區(qū)200-400nm可見光區(qū)400-760nm一、物質對光的選擇性吸收電磁輻射的性質：具有波、粒二象性波動性：粒子性：第一節(jié)概述單色光:

單一波長的光束復色光:

含有多種波長的光束電磁波譜:

以波長大小順序排列的電磁波譜圖波長10pm300pm200nm400nm800nm500mm1cm1m光譜射線X射線紫外光可見光紅外光微波無線電波方法

光譜法分光光度法光譜法核磁共振可見光第一節(jié)概述紅光與綠光互補、紫光與黃光互補，等等。

白光的組成白光的色散單色光復合光光的互補單一波長的光由不同波長的光組合而成的光若兩種不同顏色的單色光按一定的強度比例混合得到白光，那么就稱這兩種單色光為互補色光，這種現象稱為光的互補。藍黃紫紅綠紫黃綠青藍橙紅青一、物質對光的選擇性吸收物質的顏色與光的關系完全吸收完全透過吸收黃色光光譜示意表觀現象示意復合光第一節(jié)概述二、透光率與吸光度I0＝Ia+It+Ir

I0＝Ia+It

第一節(jié)概述透射光強度It與入射光強度I0的比值稱為透光率或透光度T透光率的負對數為吸光度A

【例題9-2】（1）透光率T為50%，其吸光度A為多少？（2）吸光度A為0.70，其透光率T為多少？解:（1）透光率T=50%=0.50,其吸光度為：A=-lgT=-lg0.50=0.30(2）吸光度A=0.70,其夠光率為：T=10-A=10-0.70=0.20=20%或0.70=-lgTlgT=-0.70,T=0.20第一節(jié)概述三、吸收光譜曲線

概念：以波長λ為橫坐標，吸光度A為縱坐標所描繪的曲線，稱為吸收光譜曲線，簡稱吸收光譜。特點：在相同條件下，同一物質的不同濃度的溶液，其吸收光譜曲線相似，且λmax相同。這是定性分析的基礎。UV-Vis吸收光譜的常見術語吸收峰→max谷→min肩峰→sh末端吸收:吸收光譜曲線波長最短的一段，吸光度相當大，但不成峰的部分。強帶：吸光度大于104的吸收峰弱帶：吸光度小于103的吸收峰特征值→定性依據第一節(jié)概述吸收光譜曲線示意圖A480520560nmmax=515第一節(jié)概述四、紫外-可見分光光度的特點課堂活動1．紫外-可見光的波長范圍是

A．200~400nmB．400~760nmC．200~760nmD．360~800nm2．下列敘述錯誤的是A．光的能量與其波長成反比B．有色溶液越濃，對光的吸收也越強烈C．物質對光的吸收有選擇性D．光的能量與其頻率成反比第一節(jié)概述課堂活動3．紫外-可見分光光度法屬于A．原子發(fā)射光譜法B．原子吸收光譜法

C．分子發(fā)射光譜法D．分子吸收光譜法4．分子吸收可見-紫外光后，可發(fā)生哪種類型的（）分子能級躍遷A．轉動能級躍遷B．振動能級躍遷

C．電子能級躍遷D．以上都能發(fā)生

第一節(jié)概述第一節(jié)概述點滴積累1．光的本質是電磁波；物質對光的吸收具有選擇性。2．吸光度與透光率的關系是:3．吸收曲線是溶液在一定條件下的吸光度隨入射光波長變化而變化的曲線。

二、Lambert-Beer定律I0Itl光的吸收定律A＝-lgT=lg（I0/It)=kclA：吸光度T：透光率，T=It/I0l：液層厚度(光程長度)c：溶液的濃度k：吸光系數朗伯(Lambert)定律：A=K1L比耳(Beer)定律：A=K2c

單色光適用范圍：可見光、紫外光和紅外光；均勻無散射的溶液、固體和氣體。

I0=It+IaA＝-lgT=klc吸收光譜法的基本定律，是定量測定的依據A與c為簡單的正比關系；T與c是指數關系A具加合性設共存物為a、b、c，則：A=kalca+kblcb+kclcc1．Lamber-Beer定律的適用條件（前提）入射光為單色光溶液是稀溶液

1、物理意義：指吸光物質在單位濃度及單位厚度時的吸光度

2、不同物質對同一波長的單色光，有不同的吸光系數，k↑，物質對光的吸收能力↑。吸光物質在一定波長和溶劑條件下的特征常數，是定性和定量的依據。

3、表示方法：k值及單位與c和l采用的單位有關

εmax表明了該吸收物質最大限度的吸光能力，它的大小反映了光度法測定某物質可能達到的靈敏度。

ε>104

靈敏度高104>ε>103

靈敏度中等ε<103

靈敏度低二、吸光系數2、比吸光系數（百分吸光系數）

在某一波長下，溶液濃度為1mol/L、液層厚度為1cm時的吸光度。單位：L/(mol·cm)在某一波長下,溶液濃度為1（g/100ml)、液層厚度為1cm時的吸光度。單位：mL/(g·cm)1、摩爾吸光系數ε吸光系數的大小，取決于物質（溶質、溶劑）本性、溫度和光的波長。1）物質不同，吸光系數不同，是物質的特征常數；2）溶劑不同，同一物質吸光系數不同，故常在描述吸光系數時需指明某溶劑；3）光的波長不同，吸光系數不同。某化合物的濃度為4.2×10-3g/L，用2.0cm的吸收池在470nm下測得的透光率為30.0%，該化合物的分子量為250，求其在470nm處的摩爾吸光系數和百分吸光系數。例：解：∵A=-lgT=-lg0.300=0.523c=4.2×10-3g/L=4.2×10-4g/100mll=2.0cm課堂互動某有色溶液的物質的量濃度濃度為c，在一定條件下用1cm比色杯測得吸光度為A，則摩爾吸光系數應為：A．cAB．cMC．A/CD．C/A第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理五、偏離Lambert-Beer定律的因素（一）化學因素吸光物質溶液的濃度稀溶液吸光性物質的化學變化溶劑的影響A＝εlc（二）光學因素(1)非單色光l對策：選擇比較好的單色器入射波長選定在待測物質的最大吸收波長處嚴格地講，吸收定律只適用于單色光。單色光指具有單一波長的光，但實際上不能得到純粹的單色光，而是波長范圍較窄的復合光。對于同一物質對不同波長的光的吸收程度不同，所以導致對光的吸收定律的偏離。(2)雜散光：單色光中混有一些不在譜帶寬度范圍內、與所需的波長不符的光，稱為雜散光(3)散射和反射光(4)非平行光吸收質點的散射（膠體、乳濁液或懸濁液）吸收池內外界面的反射測得的吸光度偏高l用參比溶液(空白溶液)對比補償對策：第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理點滴積累1．光的吸收定律表明了吸光度與液層厚度和濃度之間的關系，它是吸收光譜法定量分析的依據。2．吸光系數的表示方法有多種，隨待測溶液濃度的不同標度而不同。3．偏離光的吸收定律的因素主要有化學因素和光學因素。第三節(jié)紫外-可見分光光度計一、紫外-可見分光光度計的主要部件：光源—單色器—吸收池—檢測器—訊號處理與顯示器

一、主要部件：1、光源：發(fā)出所需波長范圍內的連續(xù)光譜，有足夠強度且穩(wěn)定（不隨λ而改變）

分光光度計中常用的光源有：熱輻射光源：鎢燈，鹵鎢燈（可見、近紅外光區(qū)）

可發(fā)射340-2500nm的連續(xù)光譜氣體放電光源：氫燈，氘燈（紫外光區(qū)）發(fā)射150-400nm連續(xù)光譜氙燈氫燈鎢燈2、單色器：是從連續(xù)光譜中獲得所需波段的單色光的裝置。（1）入射狹縫:限制雜散光進入（2）準直鏡（透鏡或凹面反射鏡），它使入射光束變?yōu)槠叫泄馐?。?）色散元件：棱鏡或光柵，它使不同波長的入射光色散開來。（4）聚焦透鏡或聚焦凹面反射鏡聚焦，它使不同波長的光聚焦在焦面的不同位置。（5）出射狹縫作用：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。但狹縫↓，光強度↓，靈敏度↓3、吸收池（比色皿或比色杯）：用于盛放溶液并提供一定吸光厚度的器皿。它由透明的光學玻璃或石英材料組成。玻璃吸收池只能用于可見光區(qū)，而石英吸收池在紫外和可見光區(qū)都可使用。光徑一般在0.1-10cm，最常用的吸收池吸光厚度為1cm。高濃度常選光徑較小的，低濃度選光徑較大的。（四）檢測器：利用光電效應，將光強度轉換成電流訊號。（光信號→電信號）

光檢測器：光電池、光電管、光電倍增管和光二極管陣列檢測器。（五）信號顯示系統(tǒng)：將信號以適當方式顯示或記錄。

常用的顯示器有直讀檢流計、微安表、電位計、數字電壓表、記錄儀、示波器及數據處理機等。很多型號的分光光度計裝配有微處理機，既可對分光光度計進行操作控制，又可進行數據處理。二、分光光度計的類型：（一）單波長單光束分光光度計：0.575光源單色器吸收池檢測器顯示只有一條光路，通過變換參比池和樣品池的位置，使它們分別置于光路來進行測定國產751型、752型、721型、722型、UV-1100型、英國SP-500型，伯克曼DU-8型這類分光光度計的特點是：一般用鎢燈或氫燈作光源，結構簡單，價格便宜。主要適用于定量分析，而不適用于作定性分析。另外，結果受電源的波動影響較大。（二）單波長雙光束分光光度計光源比值單色器吸收池檢測器顯示光束分裂器雙光束分光光度計是自動比較了透過參比溶液和樣品溶液的光的強度，它不受光源（電源）變化的影響。雙光束分光光度計還能進行波長掃描，并自動記錄下各波長下的吸光度，很快就可得到試液的吸收光譜。所以能用于定性分析。國產710型、730型、

740型、日立UV-340型、U-4100等屬于這種類型。光源單色器Ⅰ單色器Ⅱ檢測器切光器狹縫吸收池3、雙波長分光光度計：用兩種不同波長的單色光束交替照射到樣品溶液上，不需使用參比溶液，測得的是樣品在兩種波長下的吸光度之差。一個光源，兩個單色器，一個吸收池211、波長范圍2、波長準確度3、波長重現性4、狹縫或譜帶寬5、分辨率6、雜散光7、透光率測量范圍8、吸光度測量范圍9、測光準確度10、測光重現性三、分光光度計的光學性能第三節(jié)紫外-可見分光光度計點滴積累紫外-可見分光光度計的基本結構相同，都由光源、單色器、吸收池、檢測器、訊號處理與顯示器等主要部件構成，但不同型號儀器的外形差別很大，質量和價格相差懸殊，操作方法迥異，使用之前應仔細閱讀儀器使用說明書。

00.41.22.02.83.6246%A暗噪聲訊號噪聲誤差曲線從圖中可以看出：A值控制在0.2-0.7之間(或T值在20%-65%之間）相對誤差較小。方法：改變待測液的濃度選用適當厚度的吸收池1.吸光度范圍的選擇第四節(jié)分析條件的選擇（一）、儀器測量條件的選擇一般應該選擇λmax為入射光波長。如果λmax處有共存組分干擾時，則應考慮選擇靈敏度稍低但能避免干擾的入射光波長。2.選擇適當的入射波長二、顯色反應條件的選擇顯色反應：在光度分析中將試樣中的待測組分轉變成有色化合物的反應。顯色反應需滿足的條件：1．選擇性要好，與樣品可發(fā)生定量反應。2．靈敏度要高：3．有色化合物的組成要恒定，化學性質穩(wěn)定在紫外-可見光區(qū)有吸收，且max較大。

4．顯色劑的顏色與有色化合物的顏色差別要大5．反應的條件要易于控制。顯色反應條件的控制(1)顯色劑用量生成配位化合物的顯色反應可用下式表示：M+nR→MRn若配合物穩(wěn)定性好，顯色劑只需稍過量。若配合物不穩(wěn)定，顯色劑需過量很多。若可形成逐級配合物時，顯色劑用量應嚴格控制在一定范圍。例：MoMo(SCN)5Mo(SCN)6-桔紅色淺紅色2、溶液的酸度pH值對顯色反應的影響pH值不同，可形成具不同配位數、不同顏色的配合物pH值增大，引起某些金屬離子水解，甚至析出沉淀。Fe(SCN)2++OH-→Fe(OH)2++SCN-例：Fe3+與水楊酸在不同pH值生成不同配合物pH值<44-78-10配合物組成Fe(C7H4O3)+Fe(C7H4O3)2-Fe(C7H4O3)33-顏色紫紅棕橙黃pH值的確定做A-pH關系曲線，得到合適的pH值范圍（3）其他條件顯色溫度顯色時間放置時間溶劑顯色反應的速度有快有慢，快的幾乎是瞬間完成，顏色很快達到穩(wěn)定狀態(tài)，并且能保持較長時間。大多數顯色反應的速度是比較慢的，需要一定時間才能達到穩(wěn)定。而且有些有色化合物放置過久也會褪色。適宜的顯色時間、溫度要由實驗來確定。三、參比溶液選擇為什么需要使用參比溶液？所測得的吸光度要真正反映待測溶液的吸光強度。1、溶劑參比試樣組成簡單、共存組份少(基體干擾少)、顯色劑不吸收時，直接采用溶劑(多為蒸餾水)為參比。即試劑、干擾、顯色劑均無吸收，用溶劑作參比。注：采用空白對比消除因溶劑和容器的吸收、光的散射和界面反射等因素對透光率的干擾。試劑參比：當顯色劑和其它試劑在測定波長處有吸收時，采用試劑+顯色劑作參比(不加待測物)。試樣參比：如試樣基體在測定波長處有吸收，可以試樣作參比(不能加顯色劑)。平行操作參比溶液：用不含待測組分的試樣，在完全相同條件下與待測試樣同時進行處理，得到平行操作參比溶液。第四節(jié)分析條件的選擇點滴積累1．選擇吸光性物質的最大吸收波長作為測定波長。2．使用紫外-可見分光光度計時，讀數范圍應控制在吸光度為0.2～0.7，透光率為65%～

20%之間。3．待測物質在紫外-可見光區(qū)無吸收時，應加顯色劑。顯色劑不得有干擾，反應必須完全。4．一般用溶劑作參比溶液。必要時采用試樣參比溶液、試劑參比溶液或平行操作參比溶液。

第五節(jié)定性與定量分析一、定性分析依據：相同的化合物有相同的光譜方法：比較吸收光譜的一致性比較吸收光譜的特征數據比較吸光度的比值定性鑒別純度檢查和雜質限量測定（一）定性鑒別定性鑒別的依據→吸收光譜的特征(λmax和εmax）吸收光譜的形狀吸收峰的數目吸收峰的位置（波長）吸收峰的強度相應的吸光系數缺陷：不能鑒定飽和物質及結構相似的化合物。1．對比吸收光譜的特征數據（吸光度或吸光系數）2．對比吸光度或吸光系數的比值：如果化合物有幾個吸收峰，可用在不同吸收峰（或峰與谷）處測得吸光度的比值作為鑒別的依據。例：3．對比吸收光譜的一致性同一測定條件下，與標準對照物譜圖或標準譜圖進行對照比較（二）純度檢查和雜質限量測定1．純度檢查（雜質檢查）1）峰位不重疊：找λ→使主成分無吸收，雜質有吸收→直接考察雜質含量2）峰位重疊：主成分強吸收，雜質無吸收/弱吸收→與純品比較，E↓雜質強吸收>>主成分吸收→與純品比較，E↑，光譜變形雜質的存在吸收曲線形狀改變吸光系數值的大小例：乙醇中含少量的雜質苯乙醇的UV吸收光譜在256nm處沒有吸收峰而苯在256nm處有的吸收峰苯的檢出限量低達10ppm2、雜質的限量檢查測定特定波長的吸光度值，計算雜質的含量在此波長處，雜質有吸收，而藥物無吸收測定兩個特定波長的吸光度的比值二、定量分析（一）單組分的定量方法1．標準曲線法2．標準對比法：外標一點法3．吸光系數法1、標準曲線法配制一系列不同濃度的標準溶液，分別測定吸光度。繪制A-c標準曲線或計算回歸方程。測定樣品的A值，從標準曲線上或代入回歸方程得到樣品的濃度。蘆丁含量測定0.710mg/25mL標準溶液一般為5～7個點，至少不少于4個。待測樣品和標準溶液應平行處理。標準溶液濃度范圍應在溶液吸光度與其濃度呈線性關系區(qū)間內，且溶液的吸光度值控制在0.1～1.0之間。用坐標紙繪制完后應注明測定內容，如測定波長、吸收池厚度、操作時間等；長時間不用后再次使用時，以及儀器維修調整后應檢查標準曲線，必要時應重新繪制。

注意事項：2、標準對照法：在相同條件下，配制樣品和標準溶液。（兩種溶液的濃度最好相近）在選定波長處，測定兩者的吸光度。根據推導出來的下式計算樣品濃度。A標=

c標lA樣=

c樣l兩式的和l值相同外標一點法注：當樣品溶液與標準品溶液的稀釋倍數相同時max

min

A

2.對于同一待測溶液，濃度↑，吸光度↑；3.對于同一物質，不論濃度大小如何，最大吸收峰所對應的波長(最大吸收波長λmax)不變，并且曲線的形狀也完全相同。從分析吸收曲線可以知道：1.同一濃度的待測溶液對不同波長的光有不同的吸光度;3、吸光系數法利用從手冊或文獻查到的或值，根據下式定量：或特點：對儀器要求較高。例9-5:維生素B12的水溶液在處的百分吸光系數值是207，盛于1cm吸收池中，測得的溶液吸光度為0.414，則溶液的濃度為多少？

解:例9-6：維生素B12樣品20mg用水溶液配成1000ml。盛于1cm吸收池中，于361nm處測定吸光度為0.407，求B12的百分含量？（二）多組分的測定方法：在含有多種組分的溶液中，如果要測定多個組分，可以根據情況的不同，采用不同的方法來進行測定。

如果溶液中各組分之間的吸收曲線互相不干擾，可以選擇適當的不同的波長分別測定。如圖（a)：X,Y組份最大吸收波長不重迭，相互不干擾，可以按兩個單一組份處理。如果多個組分之間的吸收曲線有干擾則可利用吸光度的加和性，以解聯立方程式的方法，求得各個組分的含量或濃度。圖b在混合組分測定中，實際遇到的情況是吸收光譜雙向重疊，互相干擾，兩組份在最大吸收波長處互相吸收，如圖9-7c所示。這時可根據測定的目的要求和光譜重疊情況，采取以下方法.1、解線性方程法：2、等吸收雙波長消去法

該方法是在吸收光譜互相重疊的a、b兩組份的混合物中，先設法消去組分a的干擾而測定組分b的濃度。即選取對干擾組分a等吸收的兩個波長處廣度相等（A1a=A2a),而欲測組分b在兩波長處的吸光度則有很大的差別，這樣，混合組分在兩波長處之差△A與待測組分b的濃度有如下關系：測量原理：當試樣中組份的濃度過大時，則A值很大，會產生讀數誤差。此時若以一濃度略小于試樣組份濃度作參比（透光率為100%），則有：（三）示差分光光度法-----

高含量組分的測定第五節(jié)定性定量方法課堂互動1．在符合朗伯-比爾定律的條件下，有色物質的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關系是A．增加、增加、增加B．增加、減小、不變C．減小、增加、減小D．減小、不變、減小2．維生素D2的摩爾吸收系數264nm=18200。用2.0cm吸收池測定，如果要控制吸光度A在0.699～0.187范圍內，應使維生素D2溶液的濃度在什么范圍內？第五節(jié)定性定量方法點滴積累（1）紫外-可見分光光度法的各種定量方法的優(yōu)缺點：1．標準曲線法的優(yōu)點：測定大批量樣品時，操作簡單、準確、快速。缺點：不同人處理相同的測量數據，得到的結果不易完全相同。2．標準對比法的優(yōu)點：測量數據相同，任何人都能得到完全一致的結果。缺點：隨機誤差較大。3．吸光系數法的優(yōu)點：與標準對比法的優(yōu)點相同。缺點：測定條件不易與文獻完全一致，從而引入誤差。

第五節(jié)定性定量方法點滴積累（2）紫外-可見分光光度法的各種定量方法的優(yōu)缺點：4．解聯立方程組法的優(yōu)點：可以不經分離直接測定二元組分溶液。缺點：在兩個測定波長處，要求兩個組分的吸光系數有較大的差別。5．等吸收波長消去法的優(yōu)點：可以不經分離直接測定二元組分溶液，還適于測定混濁液的測定。缺點：要求干擾組分的吸收光譜中有一個峰或谷。6．差示分光光度法的優(yōu)點：可以直接測定高濃度溶液。缺點：需要用高精密度的儀器。

一、選擇題（一）單項選擇題1．紫外-可見光的波長范圍是：A.200~400nmB．400~760nmC．200~760nmD．360~800nm2．下列敘述錯誤的是：A．光的能量與其波長成反比B．有色溶液越濃，對光的吸收也越強烈C．物質對光的吸收有選擇性D．光的能量與其頻率成反比

【目標檢測】第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介3．紫外-可見分光光度法屬于：A．原子發(fā)射光譜B．原子吸收光譜C．分子發(fā)射光譜D．分子吸收光譜4．分子吸收紫外-可見光后，可發(fā)生哪種類型的分子能級躍遷：A．轉動能級躍遷B．振動能級躍遷C．電子能級躍遷D．以上都能發(fā)生第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介5．某有色溶液的摩爾濃度為c，在一定條件下用1cm比色杯測得吸光度為A，則摩爾吸光系數為：A．cAB．cMC．D．6．某吸光物質的摩爾質量為M，其摩爾吸收系數與比吸收系數的換算關系是A．＝·MB．＝/M

C．＝·M/10D．＝/M×10第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介7．關于光的性質，描述正確的是：A．光具有波粒二象性B．光具有發(fā)散性C．光具有顏色D．本質是單色光8．某吸光物質的吸光系數很大，則表明：A．該物質溶液的濃度很大B．測定該物質的靈敏度高C．入射光的波長很大D．該物質的分子量很大第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介9．相同條件下，測定甲、乙兩份同一有色物質溶液的吸光度。若甲溶液1cm吸收池，乙溶液2cm吸收池進行測定，結果吸光度相同，甲、乙兩溶液濃度的關系：A．c甲＝c乙B．c乙＝4c甲C．c甲＝2c乙D．c乙＝2c甲10．在符合光的吸收定律條件下，有色物質的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關系是：A．增加、增加、增加B．增加、減小、不變C．減小、增加、減小D．減小、不變、減小

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介11．吸收曲線是在一定條件下以入射光波長為橫坐標、吸光度為縱坐標所描繪的曲線，又稱為：A．工作曲線B．A-λ曲線C．A-c曲線D．滴定曲線12．標準曲線是在一定條件下以吸光度為橫坐標、濃度為縱坐標所描繪的曲線，也可稱為：A．A-λ曲線B．A-c曲線C．滴定曲線D．E-V曲線

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介13．紫外-可見分光光度計的基本結構可分為：A．二個部分B．三個部分C．四個部分D．五個部分14．722型分光光度計的比色皿的材料為：A．石英B．鹵族元素C．硬質塑料D．光學玻璃

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介15．紫外-可見分光光度法定量分析的理論依據是：A．吸收曲線B．吸光系數C．光的吸收定律D．能斯特方程16．下列說法正確的是：A．吸收曲線與物質的性質無關B．吸收曲線