標準解讀

GB/T 17999.9-1999是一項中華人民共和國國家標準，全稱為《SPF雞間接免疫熒光試驗》。該標準詳細規(guī)定了使用SPF（無特定病原體）雞進行間接免疫熒光試驗的方法、要求及判定準則，旨在為獸醫(yī)學研究、禽類疾病診斷以及疫苗效果評估提供統(tǒng)一的操作規(guī)范和技術指導。

標準內(nèi)容概覽：

  1. 范圍：明確了本標準適用的范圍，即適用于利用SPF雞作為模型，通過間接免疫熒光技術來檢測抗原或抗體的存在，特別是在研究禽類傳染病及其免疫反應時的應用。

  2. 規(guī)范性引用文件：列出了實施本標準時需要參考的其他相關國家標準或國際標準文獻，確保試驗方法的準確性和可比性。

  3. 術語和定義：對標準中涉及的專業(yè)術語進行了明確界定，如SPF雞、間接免疫熒光試驗等，幫助讀者理解基礎概念。

  4. 試劑與材料：詳細描述了進行試驗所需的各種試劑、抗體標記物、細胞培養(yǎng)基質(zhì)及其他實驗器材的具體要求和質(zhì)量標準，確保試驗的一致性和可靠性。

  5. 試驗動物與樣本處理：規(guī)定了SPF雞的選擇標準、飼養(yǎng)條件以及樣本（如血清、組織切片）的采集、保存和預處理方法，確保樣本質(zhì)量符合試驗要求。

  6. 試驗步驟：詳述了從樣本固定、抗體孵育、熒光標記次抗體應用到熒光觀察的全過程操作步驟，每一步都配有具體的操作指導和注意事項，以保證試驗的準確執(zhí)行。

  7. 結果判定：提供了判斷試驗結果陽性和陰性的標準，包括熒光信號的強度、分布模式等判讀依據(jù)，以及如何區(qū)分非特異性反應。

  8. 試驗報告：規(guī)定了試驗結束后應記錄和報告的信息內(nèi)容，如試驗條件、所用試劑批號、觀察結果及結論等，確保試驗結果的可追溯性和透明度。

  9. 安全與防護：強調(diào)了在進行間接免疫熒光試驗過程中應采取的安全措施和生物防護要求，以保護操作人員和實驗室環(huán)境的安全。

注意事項：

  • 本標準著重于標準化操作流程，確保不同實驗室間結果的可比性。
  • 實驗操作需嚴格遵守生物安全規(guī)范，防止病原體泄露和交叉污染。
  • 試驗結果的解釋需結合臨床癥狀和其他實驗室檢測結果綜合判斷。

此標準為SPF雞間接免疫熒光試驗提供了全面的技術框架，對于提升我國在禽病防控和研究領域的技術水平具有重要意義。


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  • 被代替
  • 已被新標準代替，建議下載現(xiàn)行標準GB/T 17999.10-2008
  • 1999-11-10 頒布
  • 2000-04-01 實施
?正版授權
GB/T 17999.9-1999SPF雞間接免疫熒光試驗_第1頁
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GB/T 17999.9-1999SPF雞間接免疫熒光試驗-免費下載試讀頁

文檔簡介

TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T17999.9-1999SPF雞間接免疫熒光試驗SPFchicken-Indirectimmunofluorescentassay1999-11-10發(fā)布2000-04-01實施國家質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布

GB/T17999.9-1-1999雞傳染性貧血(CIA).是近年來新發(fā)生的雞病，國外均對其進行監(jiān)測。CIA在我國雞群中也有流行，因此·SPF雞微生物學質(zhì)量控制國家標準將其列入監(jiān)測項目。目前國內(nèi)已建立了SPF雞監(jiān)測CIA的通用方法一-間接免疫熒光試驗(IFA)該方法已得到應用和驗證，在此基礎上制定本標準。SPF雞微生物學質(zhì)量控制國家系列標準.包括SPF雞微生物學監(jiān)測總則和9種SPF雞微生物學檢測方法。本標準為《SPF雞間接免疫熒光試驗》。SPF雞微生學檢測方法還包括以下部分：GB/T17999.1—1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗;GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗；GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗；GB/T17999.4—1999SPF雞瓊脂擴散試驗；GB/T17999.5—1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗;GB/T17999.6—1999SPF雞胚敏感試驗：GB/T17999.7—1999SPF雞雞白沙門氏菌檢驗；GB/T17999.8-1999SPF雞試管凝集試驗。本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部、國家科學技術部提出本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)司歸口，本標準起草單位：北京市農(nóng)林科學院畜牧獸醫(yī)研究所、農(nóng)業(yè)部實驗動物研究中心本標準主要起草人：周文平、趙立紅、陳德威

中華人民共和國國家標準SPF雞間接免疫熒光試驗GB/T17999.9-1999SPrchicken-indirectimmunofluorescentassay1范圍本標準規(guī)定了間接免疫熒光試驗試劑、材料、操作程序及結果判定等本標準適用于SPF雞感染雞傳染性貧血病毒(ChickenInfectiousAnaemiaVirus.CIAV)后的抗體監(jiān)測2原理間接免疫熒光試驗，以病毒感染細胞作抗原，與待檢血清中的特異抗體結合，再與熒光色素標記的抗抗體結合.形成抗原-抗體-抗抗體復合物。熒光色素在紫外光或藍紫光的作用下，激發(fā)出可見的熒光因此出現(xiàn)熒光就說明標記物的存在，同時也反映了特異性抗體的存在。常采用已知抗原及熒光色素標記的抗抗體檢測相應的抗體。3試驗和器材3.1試劑3.1.1陰性、陽性血清。3.1.2被檢血清。3.1.3PBS(O.01M、pH7.2)。3.1.4FITC-免抗雞IgG(按說明稀釋使用)3.1.5緩沖廿油。3.2材料3.2.1濕盒。3.2.2培養(yǎng)箱。3.2.3炎光顯微鏡。操作程序4.1感染細胞的制備用MDCC-MSB-1細胞制備雞傳染性貧血病毒感染細胞及未感染細胞(病毒培養(yǎng)技術參見有關文獻）4.2抗原片的制備4.2.1收集培養(yǎng)48h的細胞培養(yǎng)物,1500r/min離心10min,棄上清液.用PBS洗滌細胞沉淀物三歡，以少量PBS重懸細胞。4.2.2取10“L細胞懸液

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