血站技術(shù)操作規(guī)程培訓(xùn)血液檢測(cè)部分(西安)要點(diǎn)

?血站技術(shù)操作規(guī)程?2021

第4局部血液檢測(cè)

葛紅衛(wèi)學(xué)習(xí)內(nèi)容2021版技術(shù)規(guī)程血液檢測(cè)局部概要2021版技術(shù)規(guī)程血液檢測(cè)局部?jī)?nèi)容介紹第4局部血液檢測(cè)附錄B血液檢測(cè)方法確實(shí)認(rèn)附錄D血液檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控方法附錄E微板法ABO血型定型試驗(yàn)規(guī)程第4局部血液檢測(cè)1可經(jīng)輸血傳播感染的檢測(cè)工程及檢測(cè)方法2血液檢測(cè)試劑3儀器設(shè)備使用要求4實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)5血液檢測(cè)標(biāo)本6試驗(yàn)操作7試驗(yàn)性能監(jiān)控8試驗(yàn)結(jié)果的判定9ELISA初次試驗(yàn)有反響性標(biāo)本的重復(fù)試驗(yàn)10核酸初次試驗(yàn)有反響性的進(jìn)一步處理11血型檢測(cè)12血液檢測(cè)最終結(jié)論的判定13血液檢測(cè)結(jié)論的報(bào)告和利用資源管理的細(xì)化要求過(guò)程控制的細(xì)化要求檢測(cè)工程及方法資料性附錄附錄B血液檢測(cè)方法確實(shí)認(rèn)附錄D血液檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控方法附錄E微板法ABO血型定型試驗(yàn)新版技術(shù)規(guī)程血液檢測(cè)局部

參考標(biāo)準(zhǔn)?血站管理方法??血站質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)??血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)?WHO捐獻(xiàn)血液中輸血傳播傳染病的篩查建議〔2021〕WHO采供血機(jī)構(gòu)GMP指南〔2021〕97版規(guī)程框架和內(nèi)容的不適宜性?中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程－血站局部?97版血液檢測(cè)局部化驗(yàn)操作要求乙型肝炎外表抗原酶聯(lián)免疫法檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體酶聯(lián)免疫法檢測(cè)艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ抗體酶聯(lián)免疫法檢測(cè)梅毒抗體檢測(cè)：USR/RPR/TRUST/TPHAALT檢測(cè)：快速法、比色法、速率法ABO血型鑒定〔紙板法和磁板法〕97版規(guī)程檢測(cè)方法的滯后性97版檢測(cè)方法描述以手工操作為根底，沒(méi)有全自動(dòng)操作的質(zhì)量要求；HBsAg1ng的檢測(cè)靈敏度已不適用；抗-HIV為第二代檢測(cè)方法要求，現(xiàn)在是第四代方法；梅毒抗體檢測(cè)方法為非特異性檢測(cè)方法，而不是目前采用的EIA雙抗原夾心法；ABO血型檢測(cè)方法定義為玻片法，沒(méi)有涵蓋適用于全自動(dòng)血型分析的微板法。不包括NAT要求97版規(guī)程與其它新版GB的不協(xié)調(diào)性97版規(guī)程與新GB18467不能相互補(bǔ)充GB184672021?獻(xiàn)血者健康檢查要求?是針對(duì)獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前的業(yè)務(wù)行為要求。8獻(xiàn)血前血液檢測(cè)8.1血型檢測(cè)：ABO血型〔正定型〕。8.2血紅蛋白〔Hb〕測(cè)定：男≥120g/L；女≥115g/L。如采用硫酸銅法：男≥1.0520，女≥1.0510。8.3單采血小板獻(xiàn)血者：除滿(mǎn)足8.2外，還應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足：a)紅細(xì)胞比容〔HCT〕：≥0.36b)采前血小板計(jì)數(shù)〔PLT〕：≥150×109/L且＜450×109/Lc)預(yù)測(cè)采后血小板數(shù)〔PLT〕：≥100×109/L。以上不包含血液檢測(cè)程序97版規(guī)程與其它新版GB的不協(xié)調(diào)性97版規(guī)程與新GB18469的要求不相適應(yīng)GB184692021?全血成分學(xué)質(zhì)量要求?血液平安性檢測(cè)要求血型檢測(cè)ABO血型定型試驗(yàn)結(jié)果正確。RhD血型定型試驗(yàn)結(jié)果正確。人免疫缺陷病毒〔HIV-1和HIV-2〕標(biāo)志物篩查試驗(yàn)結(jié)果陰性：HIVAb(1+2)HIVAg/AbHIVRNA97版規(guī)程與其它新版GB的不協(xié)調(diào)性GB184692021?全血成分學(xué)質(zhì)量要求?血液平安性檢測(cè)要求乙型肝炎病毒〔HBV〕標(biāo)志物篩查試驗(yàn)結(jié)果陰性HBsAgHBVDNA丙型肝炎(HCV)病毒標(biāo)志物篩查試驗(yàn)結(jié)果陰性HCVAbHCVRNA丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)合格，采用1種試劑〔速率法〕進(jìn)行1次檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果合格?！矡o(wú)酮體酚法〕梅毒螺旋體標(biāo)志物篩查試驗(yàn)結(jié)果陰性，具體標(biāo)志物及其檢測(cè)方法為采用2個(gè)不同生產(chǎn)廠(chǎng)家的ELISA試劑檢測(cè)梅毒特異性抗體。〔無(wú)非特異方法〕新版規(guī)程血液檢測(cè)局部突出變化血液檢測(cè)局部與獻(xiàn)血前獻(xiàn)血者快速檢測(cè)局部分開(kāi)。血液檢測(cè)局部?jī)H針對(duì)采集后的全血和成分血檢測(cè)過(guò)程提出管理和技術(shù)要求。血液檢測(cè)局部包含了檢測(cè)前、中、后的過(guò)程控制要求。明確了標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸、交接等環(huán)節(jié)的控制要求；明確了輸血相關(guān)感染檢測(cè)的方法和程序；增加HIV抗原檢測(cè)選擇；增加HCV抗原檢測(cè)選擇；增加NAT檢測(cè)程序；增加血型自動(dòng)化檢測(cè)方法選擇要求刪除TP非特異性試驗(yàn)方法；刪除ALT快速法將資源管理，如設(shè)備、試劑、LIS的局部管理要求細(xì)化，納入規(guī)程。學(xué)習(xí)內(nèi)容2021版技術(shù)規(guī)程血液檢測(cè)局部概要2021版技術(shù)規(guī)程血液檢測(cè)局部?jī)?nèi)容介紹第4局部血液檢測(cè)附錄B血液檢測(cè)方法確實(shí)認(rèn)附錄D血液檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控方法附錄E微板法ABO血型定型試驗(yàn)規(guī)程第4局部血液檢測(cè)1可經(jīng)輸血傳播感染的檢測(cè)工程及檢測(cè)方法2血液檢測(cè)試劑3儀器設(shè)備使用要求4實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)5血液檢測(cè)標(biāo)本6試驗(yàn)操作7試驗(yàn)性能監(jiān)控8試驗(yàn)結(jié)果的判定9ELISA初次試驗(yàn)有反響性標(biāo)本的重復(fù)試驗(yàn)10核酸初次試驗(yàn)有反響性的進(jìn)一步處理11血型檢測(cè)12血液檢測(cè)最終結(jié)論的判定13血液檢測(cè)結(jié)論的報(bào)告和利用資源管理的細(xì)化要求過(guò)程控制的細(xì)化要求檢測(cè)工程及方法4.1可經(jīng)輸血傳播感染的檢測(cè)工程及檢測(cè)方法人類(lèi)免疫缺陷病毒〔HIV〕感染標(biāo)志物及其檢測(cè)方法有2種選擇，可任選其中1種：HIVAb(1+2)+HIVAg/Ab；HIVAb(1+2)1+HIVAb(1+2)2；HIVAg/Ab1+HIVAg/Ab2HIVAb(1+2)或HIVAg/Ab＋HIVRNA4.1.2乙型肝炎病毒〔HBV〕感染標(biāo)志物及其檢測(cè)方法有2種選擇，可任選其中1種：HBsAg1＋HBsAg2HBsAg＋HBVDNA可經(jīng)輸血傳播感染的檢測(cè)工程及檢測(cè)方法4.1.3丙型肝炎病毒〔HCV〕感染標(biāo)志物及其檢測(cè)方法有2種選擇，可任選其中1種：HCVAb+HCVAg/Ab；HCVAb1+HCVAb2；HCVAg/Ab1+HCVAg/Ab2HCVAb或HCVAg/Ab＋HCVRNA4.1.4ALT采用2種方法〔干化學(xué)法和速率法〕進(jìn)行2次檢測(cè)，分別在采血前和采血后進(jìn)行。4.1.5梅毒螺旋體感染標(biāo)志物及其檢測(cè)方法：采用2個(gè)不同生產(chǎn)廠(chǎng)家的ELISA試劑檢測(cè)梅毒特異性抗體。0510152025306065days103106103106103106viralloadgeq/ml354070day38day651geq/20mlday3day21eclipsephase隱蔽期day15day24day6HBV-DNAHCV-RNARNAHIV-AgAnti-HIVAnti-HCVHBsAg通過(guò)NAT檢測(cè)得到的完整的感染窗口期

day8Infectious易傳染的belowinfectivitythreshold?在易傳染域值以下核酸檢測(cè)〔NAT〕已經(jīng)實(shí)施歐盟要求所有用于生產(chǎn)的原料血漿實(shí)行NAT德國(guó)開(kāi)始對(duì)臨床供血實(shí)行NAT1999.3美國(guó)開(kāi)始對(duì)所有血液實(shí)行NAT日本開(kāi)始對(duì)所有血液實(shí)行NAT1999年后澳大利亞、法國(guó)、意大利、西班牙、德國(guó)、新加坡等相繼開(kāi)始HIV感染早期病毒血癥HIVRNA(plasma)HIVAntibody110102030405060708090100HIVp24Ag1622Ramp-upviremiaDT=21.5hrs上升期病毒血癥檢出時(shí)間

1stgen2ndgen3rdgenp24AgEIA-HIVMP-NAT-HIVID-NAT-Peakviremia:106-108gEq/mL峰值病毒血癥“blip〞viremia暫時(shí)性病毒血癥Viralset-point:102-105gEq/mL病毒調(diào)定點(diǎn)HIV檢測(cè)從抗體陽(yáng)性開(kāi)始計(jì)算HIV感染窗口期應(yīng)為20~22天當(dāng)前許多抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)是效果僅有1~3天的差異，〔5~15%的縮短〕聚集的NAT試驗(yàn)可縮短窗口期10~11天，或45~50%單個(gè)標(biāo)本NAT檢測(cè)可進(jìn)一步縮短窗口期5天，或25%感染初期出現(xiàn)的HCV病毒標(biāo)志物HCVRNAAnti-HCVEIAs1stgen150d2ndgen80d3rdgen70d0102030405060708090100

Ramp-upphase上升期DT檢出時(shí)間=17.7hrsPlateauphaseviremia:105-108gEq/mL平臺(tái)期病毒血癥Pre-ramp-up上升前期blipviremia暫時(shí)的病毒血病-HCVAgEIA-HCVMP-NAT-HCVID-NATALTViralset-point:102-107gEq/mL病毒調(diào)定點(diǎn)HCV檢測(cè)從抗體陽(yáng)性開(kāi)始計(jì)算HCV感染窗口期約為70天當(dāng)前許多抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)是效果僅有1~3天的差異，〔1.5~5%的縮短〕聚集的NAT試驗(yàn)可縮短窗口期50天，或70%單個(gè)標(biāo)本NAT檢測(cè)可進(jìn)一步縮短窗口期3天，或4%Hollinger2021Hollinger,2021HBV標(biāo)志物：血液篩查HBsAg過(guò)量的病毒抗原急性感染的最初標(biāo)志物如果出現(xiàn)，預(yù)示著感染的高風(fēng)險(xiǎn)Anti-HBc表示過(guò)去的或當(dāng)前的感染(Occult–OBI)在HBsAg出現(xiàn)后持續(xù)存在〔HBV隱形感染〕傳染性的低可變風(fēng)險(xiǎn)HBVDNA病毒復(fù)制PresHBsAg先于HBsAg出現(xiàn)在HBsAg出現(xiàn)后持續(xù)存在〔HBV隱形感染〕(Occult–OBI)傳染性的從高到低的風(fēng)險(xiǎn)HBV檢測(cè)可檢測(cè)出開(kāi)始計(jì)算窗口期為38天靈敏度高的HBsAg試驗(yàn)的與聚集法NAT試驗(yàn)的檢測(cè)范圍相重疊在疾病的高流行區(qū)域，NAT的作用是檢出HBsAg陰性的感染者WHO血液篩查建議〔2021)政策建議應(yīng)對(duì)所有血液做感染及其標(biāo)志物的強(qiáng)制性篩查：HIV-1和HIV-2：聯(lián)合檢測(cè)HIV抗原和抗體，或檢測(cè)抗-HIV；乙型肝炎：檢測(cè)乙型肝炎病毒外表抗原(HBsAg)；丙型肝炎：聯(lián)合檢測(cè)HCV抗原和抗體，或檢測(cè)抗-HCV；梅毒(蒼白密螺旋體)：檢測(cè)密螺旋體特異性抗體。在考慮將核酸檢測(cè)列入篩查策略之前，應(yīng)首先保證已經(jīng)有效建立具有質(zhì)量保證的血清學(xué)篩查技術(shù)，并對(duì)所有血液實(shí)施篩查。血液篩查方法的選擇

在各種類(lèi)型的血液篩查試驗(yàn)中，以檢測(cè)病原體抗體、抗原或者核酸的試驗(yàn)最為常用。然而每種試驗(yàn)都有其局限性，沒(méi)有任何一種試驗(yàn)適用于所有情形。血液篩查試驗(yàn)的主要類(lèi)型有：酶免疫試驗(yàn)(enzymeimmunoassays，EIAS)、化學(xué)發(fā)光免疫試驗(yàn)(chemiluminescentimmunoassays，CLIAs)、血凝試驗(yàn)〔haemagglutination，HA〕顆粒凝集試驗(yàn)(particleagglutinatior，PA)快速簡(jiǎn)便一次性試驗(yàn)核酸擴(kuò)增(nucleicacidamplificationtechniques，NAT)試驗(yàn)。WHO血液篩查建議試驗(yàn)選擇

應(yīng)考慮每種篩查系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)及其局限性，包括：1)窗口期；2)生物學(xué)假陽(yáng)性率；3)復(fù)雜性。在大多數(shù)情形，專(zhuān)門(mén)為血液篩查研發(fā)的EIAs、CLIAs和顆粒凝集試驗(yàn)是首選的試驗(yàn)，適用從較少量到大批量標(biāo)本的篩查；一般不建議將快速/簡(jiǎn)便試驗(yàn)用于血液篩查，因?yàn)槠湓O(shè)計(jì)是用于少量標(biāo)本即刻快速檢測(cè)，主要用于診斷目的。NAT檢測(cè)技術(shù)特點(diǎn)靈敏度高。用于WP標(biāo)本檢出。標(biāo)本質(zhì)量控制要求高，否那么產(chǎn)生假陰性結(jié)果。采血管：無(wú)RNAase標(biāo)本保存溫度標(biāo)本運(yùn)輸溫度容易產(chǎn)生污染：尤其是手工操作來(lái)自陽(yáng)性標(biāo)本來(lái)自擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)自試劑污染對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施和環(huán)境要求嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室溫、濕度控制實(shí)驗(yàn)室布局和氣流走向試劑價(jià)格昂貴WHO血液篩查建議引入NAT檢測(cè)在感染發(fā)生率很低的國(guó)家，其效益增加很有限。在感染發(fā)生率高的國(guó)家，可被NAT檢出的窗口期血液數(shù)量可能較多。因此采用NAT可降低輸注窗口期血液的風(fēng)險(xiǎn)基于本錢(qián)效益，需考綜合考慮實(shí)施NAT的復(fù)雜性和高本錢(qián)，以及需要的根底設(shè)施。獻(xiàn)血者人群感染發(fā)生率和感染率獻(xiàn)血者選擇過(guò)程的效果當(dāng)前實(shí)施的血清學(xué)篩查試驗(yàn)的敏感性，以及通過(guò)應(yīng)用敏感性更高的血清學(xué)試驗(yàn)(如聯(lián)合抗原和抗體試驗(yàn))來(lái)進(jìn)-步提高敏感性的可能性等。只有在抗體或抗原檢測(cè)方案已經(jīng)得到有效實(shí)施，并且具有開(kāi)展NAT能夠增加效益確實(shí)鑿證據(jù)的情況下，才應(yīng)考慮引入NAT。3-4weeksInfection感染Less-SensitiveEIA低靈敏度EIA~5-6months低靈敏度EIA試驗(yàn)SensitiveHIV-1EIA靈敏的HIV－1EIA實(shí)驗(yàn)Seroconversion

Window血清轉(zhuǎn)換窗口Jannsenetal.NewtestingstrategytodetectearlyHIV-1infectionforuseinincidenceestimatesandforclinicalandpreventionpurposes.JAMA.1998Jul1;280(1):42-8.WHO血液篩查建議(2021)4.2血液檢測(cè)試劑4.2.1試劑選擇4.2.2證照要求4.2.3進(jìn)貨檢查驗(yàn)收4.2.4隔離存放4.2.5質(zhì)量抽檢4.2.6審核批準(zhǔn)4.2.7試劑保存和質(zhì)量監(jiān)控4.2.1試劑選擇應(yīng)建立血液檢測(cè)試劑的評(píng)價(jià)、選擇和確認(rèn)程序血液篩查試驗(yàn)的敏感性和特異性應(yīng)盡可能高WHO：最好≥99.5%有條件的實(shí)驗(yàn)室可自行開(kāi)展試劑評(píng)價(jià)〔見(jiàn)附錄B〕。不具備條件的實(shí)驗(yàn)室可充分利用國(guó)家專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)的評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)。自己研究官方數(shù)據(jù)臨檢中心國(guó)家CDC權(quán)威機(jī)構(gòu)：WHO/CAP/NRL4.2.2證照要求藥品類(lèi)檢測(cè)試劑1〕?藥品生產(chǎn)許可證?或者?藥品經(jīng)營(yíng)許可證?和營(yíng)業(yè)執(zhí)照復(fù)印件；2〕?藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)?或者?藥品經(jīng)營(yíng)質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)?認(rèn)證證書(shū)復(fù)印件；3〕藥品的批準(zhǔn)證明文件復(fù)印件；4〕供貨單位藥品銷(xiāo)售委托書(shū)；5〕銷(xiāo)售人員有效身份證明復(fù)印件；6〕血源篩查試劑的批簽發(fā)文件；7〕出廠(chǎng)質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。4.2.2證照要求醫(yī)療器械類(lèi)檢測(cè)試劑1〕?醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證?或者?醫(yī)療器械經(jīng)營(yíng)企業(yè)許可證?和營(yíng)業(yè)執(zhí)照復(fù)印件，對(duì)生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)屬于?醫(yī)療器械分類(lèi)目錄?中第一類(lèi)醫(yī)療器械的企業(yè)，只需索取營(yíng)業(yè)執(zhí)照復(fù)印件；2〕醫(yī)療器械注冊(cè)證書(shū)和?醫(yī)療器械注冊(cè)登記表?復(fù)印件；3〕供貨單位醫(yī)療器械銷(xiāo)售委托書(shū)；4〕銷(xiāo)售人員有效身份證明復(fù)印件；5〕出廠(chǎng)質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。4.2.3進(jìn)貨檢查驗(yàn)收1〕驗(yàn)明藥品合格證明和其他標(biāo)識(shí)；2〕外觀(guān)檢查〔運(yùn)輸包裝箱完整無(wú)損，運(yùn)輸冷鏈符合要求，試劑包裝盒完整無(wú)損，無(wú)液體泄漏〕；3〕到貨數(shù)量和銷(xiāo)售憑證(購(gòu)貨單位、試劑、供貨商等名稱(chēng)，規(guī)格、批號(hào)、數(shù)量、價(jià)格〕4.2.4隔離存放隔離存放應(yīng)將通過(guò)進(jìn)貨檢查驗(yàn)收后的試劑進(jìn)行隔離存放，防止誤用。4.2.5質(zhì)量抽檢應(yīng)建立并執(zhí)行抽檢制度，對(duì)每次購(gòu)進(jìn)〔同批或不同批〕的試劑進(jìn)行質(zhì)量抽檢。應(yīng)將試劑說(shuō)明書(shū)列入文件控制范圍。應(yīng)對(duì)試劑說(shuō)明書(shū)版本和內(nèi)容進(jìn)行檢查。其操作要求如已變更，實(shí)驗(yàn)室的試驗(yàn)操作在試劑啟用時(shí)應(yīng)同時(shí)變更，嚴(yán)格控制未按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行試驗(yàn)操作的情形發(fā)生。試劑盒組成、組分性狀與說(shuō)明書(shū)一致，無(wú)泄漏，足量，標(biāo)識(shí)正確。4.2.5質(zhì)量抽檢質(zhì)量抽檢的樣本有：1〕試劑盒對(duì)照；2〕室內(nèi)質(zhì)控品；3〕實(shí)驗(yàn)室自制或商品化的血清盤(pán)。前2種為必須，后1種為可選。質(zhì)量抽檢結(jié)果要求：1〕試劑盒對(duì)照品檢測(cè)結(jié)果符合試劑說(shuō)明書(shū)要求，2〕室內(nèi)質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果符合既定要求；3〕如果適用，實(shí)驗(yàn)室自制或商品化的血清盤(pán)符合既定要求。4.2.6審核批準(zhǔn)應(yīng)由授權(quán)人對(duì)采購(gòu)驗(yàn)收和質(zhì)量抽檢的過(guò)程和結(jié)果進(jìn)行審核，批準(zhǔn)其用于血液檢測(cè)。應(yīng)建立和保存試劑采購(gòu)驗(yàn)收、質(zhì)量抽檢和審核批準(zhǔn)的記錄〔見(jiàn)附錄C〕。4.2.7試劑保存和質(zhì)量監(jiān)控應(yīng)對(duì)經(jīng)批準(zhǔn)使用的試劑進(jìn)行標(biāo)識(shí)和放行，宜對(duì)試劑盒粘貼“可用〞標(biāo)簽。應(yīng)按試劑說(shuō)明書(shū)要求的保存條件進(jìn)行保存，應(yīng)在有效期內(nèi)使用。應(yīng)對(duì)試劑的庫(kù)存〔批號(hào)、失效期、庫(kù)存量等〕進(jìn)行管理，防止試劑過(guò)期或者中斷。在試劑保存和使用過(guò)程中應(yīng)注意試劑性能出現(xiàn)衰減，如果試劑盒對(duì)照品和室內(nèi)質(zhì)控品的檢測(cè)值呈現(xiàn)連續(xù)走低趨勢(shì)且無(wú)法使其上升糾正，應(yīng)考慮終止使用。4.3儀器設(shè)備使用要求4.3.1新的或者經(jīng)過(guò)大修的檢測(cè)設(shè)備在正式投入正常使用之前應(yīng)經(jīng)過(guò)確認(rèn)。新設(shè)備確實(shí)認(rèn)應(yīng)包括安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)。經(jīng)過(guò)大修的設(shè)備根據(jù)需要進(jìn)行適當(dāng)確認(rèn)，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行計(jì)量檢定或校準(zhǔn)?！苍O(shè)備確認(rèn)〕4.3.2按照檢測(cè)設(shè)備用戶(hù)手冊(cè)要求進(jìn)行操作，包括使用、校準(zhǔn)、維護(hù)等工作。〔制定SOP〕4.3.3如果使用多臺(tái)設(shè)備檢測(cè)同一個(gè)工程，應(yīng)對(duì)設(shè)備之間的性能和差異進(jìn)行比較。〔設(shè)備性能比對(duì)〕4.3.4應(yīng)定期檢查自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備試驗(yàn)參數(shù)的設(shè)置，應(yīng)保存檢查記錄?！捕ㄆ趨?shù)核查〕4.3.5在試驗(yàn)過(guò)程中自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備出現(xiàn)故障需要進(jìn)行手工操作時(shí)，應(yīng)注意自動(dòng)化設(shè)備操作和手工操作的銜接及其對(duì)結(jié)果的影響。應(yīng)記錄手工操作步驟和操作者?！仓袛鄳?yīng)急〕確認(rèn)活動(dòng)遵循的原那么1.全方位原那么：確認(rèn)活動(dòng)涵蓋了設(shè)備安裝、調(diào)試運(yùn)行、性能確認(rèn)、人員培訓(xùn)及設(shè)備監(jiān)控等方面。2.全周期原那么：自動(dòng)化設(shè)備確實(shí)認(rèn)是一個(gè)過(guò)程，它涵蓋設(shè)備的整個(gè)生命周期，包括使用前、中、后。3.可測(cè)量原那么：設(shè)備的性能需要通過(guò)可測(cè)量指標(biāo)來(lái)證明是否滿(mǎn)足要求。4.風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估原那么4.4實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)

4.4.1應(yīng)使用實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)對(duì)整個(gè)檢測(cè)過(guò)程〔從標(biāo)本接收、試驗(yàn)、結(jié)果和結(jié)論判定〕進(jìn)行信息化管理。〔LIS范圍〕4.4.2實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)的功能應(yīng)包括：1〕標(biāo)本接收；2〕試驗(yàn)工程選擇；3〕試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與匯總；4〕試驗(yàn)數(shù)據(jù)的計(jì)算；5〕試驗(yàn)結(jié)果的判定；6〕血液篩查結(jié)論的判定；7〕血液篩查結(jié)論傳輸至血液管理信息系統(tǒng)并為其所利用?！睱IS功能〕4.4.3實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)運(yùn)行參數(shù)的設(shè)置應(yīng)建立權(quán)限控制。應(yīng)保存設(shè)置參數(shù)的書(shū)面記錄，并定期將其與實(shí)際設(shè)置參數(shù)對(duì)照，確保設(shè)置無(wú)誤，應(yīng)保存核實(shí)記錄?！睱IS權(quán)限及應(yīng)用程序控制〕新規(guī)程中檢測(cè)前過(guò)程控制要求2.3采血器材準(zhǔn)備2.13留取標(biāo)本2.14血袋及血液標(biāo)本標(biāo)識(shí)2.17血液標(biāo)本處理和保存4.5血液檢測(cè)標(biāo)本2.3采血器材準(zhǔn)備2.3.3標(biāo)本管1〕帶有別離膠用于檢測(cè)病毒核酸的標(biāo)本管；2〕用于酶聯(lián)免疫吸附法〔以下簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA〕、ALT和血型檢測(cè)的標(biāo)本管。2.13留取標(biāo)本2.13.1檢測(cè)結(jié)果用于判定血液能否放行的標(biāo)本只能在獻(xiàn)血時(shí)同步留取，不得在獻(xiàn)血者健康檢查時(shí)提前留取?！擦羧r(shí)點(diǎn)〕2.13.2如果使用帶留樣袋的采血袋，將留樣針插入真空采血管，留取血樣?！擦羧》绞健?.13.3如果使用不帶留樣袋的采血袋，將靜脈穿刺針插入真空采血管，留取血樣。應(yīng)單手操作，防止手被針頭刺傷?！擦羧》绞健?.13.4將標(biāo)本管內(nèi)促凝劑或抗凝劑與血液充分混勻。2.14血袋及血液標(biāo)本標(biāo)識(shí)2.14.2宜在標(biāo)本管與留樣針/靜脈穿刺針別離前開(kāi)始標(biāo)識(shí)，對(duì)采血袋和標(biāo)本管的標(biāo)識(shí)應(yīng)當(dāng)首先連續(xù)完成，不應(yīng)中斷。(貼標(biāo)簽時(shí)點(diǎn)及方式〕2.14.3宜在標(biāo)本管與留樣針/靜脈穿刺針別離前核查采血袋、血液標(biāo)本、獻(xiàn)血登記表，所標(biāo)識(shí)的獻(xiàn)血條形碼應(yīng)一致。宜采用計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行核查。(核查時(shí)點(diǎn)及方式〕2.17血液標(biāo)本處理和保存2.17.1核酸檢測(cè)標(biāo)本應(yīng)及時(shí)離心。2.17.2血液標(biāo)本采集后應(yīng)盡快處理，在適宜的溫度下保存。4.5血液檢測(cè)標(biāo)本

4.5.1血液標(biāo)本的一般要求1〕標(biāo)本與血液、獻(xiàn)血者一一對(duì)應(yīng)；2〕標(biāo)本質(zhì)量符合檢測(cè)工程技術(shù)要求；3〕標(biāo)本信息具有可追溯性。4.5.2血液標(biāo)本采集與送檢程序的制定相關(guān)方：實(shí)驗(yàn)室，標(biāo)本采集和送檢部門(mén)程序內(nèi)容采集程序送檢程序?qū)徍寺氊?zé)：質(zhì)量管理部門(mén)批準(zhǔn)職責(zé)：法定代表人〔集中化檢測(cè)過(guò)程〕4.5血液檢測(cè)標(biāo)本4.5.2血液標(biāo)本采集與送檢程序的制定4.5.2.3標(biāo)本采集和送檢程序的要點(diǎn)1〕標(biāo)本類(lèi)型及檢測(cè)工程、標(biāo)本量、標(biāo)本管、標(biāo)本運(yùn)輸及包裝要求；2〕標(biāo)本的惟一性標(biāo)識(shí)〔條形碼〕；3〕標(biāo)本的質(zhì)量要求；4〕標(biāo)本采集、送檢和接收；5〕標(biāo)本信息和檢測(cè)報(bào)告信息的傳輸與接收，檢測(cè)報(bào)告時(shí)限；6〕如為集中化檢測(cè)，檢測(cè)的委托方和受托方的標(biāo)識(shí)與聯(lián)系方式。4.5血液檢測(cè)標(biāo)本4.5.3血液標(biāo)本管的選擇〔與對(duì)應(yīng)〕4.5.3.1應(yīng)根據(jù)每項(xiàng)試驗(yàn)的技術(shù)要求，采用相應(yīng)類(lèi)型的真空采血管留取檢測(cè)標(biāo)本。試管應(yīng)無(wú)裂痕、無(wú)滲漏，容量應(yīng)滿(mǎn)足檢測(cè)工程要求。4.5.3.2將病毒核酸檢測(cè)結(jié)果列入血液放行依據(jù)的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)按照試劑說(shuō)明書(shū)要求選擇適宜的標(biāo)本管，最好采用含惰性別離膠的EDTAK2真空采血管留取核酸檢測(cè)標(biāo)本。4.5.4血液標(biāo)本的采集與標(biāo)識(shí)〔與2.13，2.14對(duì)應(yīng)〕應(yīng)對(duì)血液標(biāo)本采集前的準(zhǔn)備、標(biāo)本的采集、標(biāo)識(shí)、登記和保存過(guò)程實(shí)施有效控制，一次只對(duì)一袋血液和同源血液標(biāo)本管貼簽，確保標(biāo)本與血液、獻(xiàn)血者一一對(duì)應(yīng)，貼簽無(wú)誤。標(biāo)本質(zhì)量符合檢測(cè)工程技術(shù)要求?！操N標(biāo)簽要求〕4.5.4.2檢測(cè)結(jié)果用于血液放行的血液標(biāo)本，應(yīng)在采集血袋血液的同時(shí)或者從血袋血液中留取。〔標(biāo)本留取時(shí)點(diǎn)要求〕4.5.4.3血液標(biāo)本的采集與標(biāo)識(shí)的具體操作見(jiàn)本規(guī)程第2章全血采集?！膊僮饕笾赶虻?章采血〕4.5血液檢測(cè)標(biāo)本4.5.5血液標(biāo)本采集后的處理4.5.5.1可以電子或紙面方式登記標(biāo)本信息，應(yīng)進(jìn)行核對(duì)，防止信息錄入錯(cuò)誤。可通過(guò)網(wǎng)絡(luò)、或其它形式傳輸標(biāo)本信息?！残畔⒉杉绞健?.5.5.2核酸檢測(cè)標(biāo)本采集后，根據(jù)所采用的采血管和試驗(yàn)的技術(shù)要求實(shí)施離心。〔NAT標(biāo)本的處理需要，如離心〕4.5.5.3血液標(biāo)本在采血現(xiàn)場(chǎng)的臨時(shí)保存溫度為2～10℃?！才R時(shí)保存溫度2～10℃〕4.5血液檢測(cè)標(biāo)本4.5.6血液標(biāo)本包裝與運(yùn)輸4.5.6.1標(biāo)本應(yīng)隔離密封包裝，包裝材料應(yīng)滿(mǎn)足防水、防破損、防外泄、保持溫度、易于消毒處理。裝箱時(shí)應(yīng)保持標(biāo)本管口向上。〔標(biāo)本包裝一般要求〕4.5.6.2對(duì)于送交集中化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本的包裝要求主要有：1〕可使標(biāo)本運(yùn)輸在過(guò)程中保持在2～10℃；2〕外包裝有明確標(biāo)識(shí)〔放置朝向、易碎〕和交付接收雙方的聯(lián)系方式?！睳AT標(biāo)本包裝要求〕4.5.6.3標(biāo)本應(yīng)在2～10℃條件下運(yùn)輸，應(yīng)對(duì)運(yùn)輸過(guò)程的冷鏈效果進(jìn)行確認(rèn)并定期監(jiān)測(cè)?！策\(yùn)輸溫度的要求〕4.5.6.4應(yīng)對(duì)標(biāo)本運(yùn)輸過(guò)程進(jìn)行記錄，其要點(diǎn)有：1〕啟運(yùn)時(shí)間、地點(diǎn)；2〕運(yùn)抵時(shí)間、地點(diǎn)；3〕標(biāo)本箱編號(hào)、標(biāo)本類(lèi)型、數(shù)量；4〕運(yùn)輸包裝有無(wú)受損、有無(wú)泄漏；5〕運(yùn)輸時(shí)間2小時(shí)以上的應(yīng)記錄箱內(nèi)溫度；6〕標(biāo)本交運(yùn)人、承運(yùn)人；7〕運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生的可能影響標(biāo)本質(zhì)量的意外事件及處理措施?！灿涗浺蟆?.5血液檢測(cè)標(biāo)本4.5.7血液標(biāo)本的交接4.5.7.1接收時(shí)標(biāo)本應(yīng)核查：1〕標(biāo)本來(lái)源、數(shù)量、采集時(shí)間；2〕標(biāo)本采集管使用正確與否；3〕標(biāo)本是否滿(mǎn)足既定的質(zhì)量要求；4〕標(biāo)本與送檢單信息對(duì)應(yīng)性和完整性。〔核查內(nèi)容〕4.5.7.2如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的標(biāo)本移出，對(duì)溢出標(biāo)本管和原包裝箱進(jìn)行消毒并記錄，必要時(shí)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和送檢單位。〔事件處理〕4.5.7.3應(yīng)拒收標(biāo)本的情形有：1〕檢測(cè)申請(qǐng)關(guān)鍵信息缺失或不符；2〕標(biāo)本管上無(wú)標(biāo)識(shí)或標(biāo)識(shí)不清、不正確；3〕標(biāo)本管選用錯(cuò)誤；4〕標(biāo)本量缺乏或被稀釋?zhuān)?〕不符合試劑說(shuō)明書(shū)要求的情形?！矘?biāo)本拒收〕4.5.7.4標(biāo)本交接雙方應(yīng)在標(biāo)本交接記錄簽名?！猜氊?zé)確認(rèn)〕新規(guī)程中檢測(cè)中過(guò)程控制要求4.6試驗(yàn)操作4.7試驗(yàn)性能監(jiān)控4.8試驗(yàn)結(jié)果的判定4.9ELISA初次試驗(yàn)有反響性標(biāo)本的重復(fù)試驗(yàn)4.10核酸初次試驗(yàn)有反響性的進(jìn)一步處理〔見(jiàn)試劑說(shuō)明書(shū)〕4.11血型檢測(cè)4.12血液檢測(cè)最終結(jié)論的判定4.6試驗(yàn)操作4.6.1按照試劑生產(chǎn)方提供的試劑使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作?！膊僮鞯母疽罁?jù)〕4.6.2如需對(duì)個(gè)別試驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行修改，應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)?！沧兏刂啤?.6.3宜采用自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備操作標(biāo)本和試劑加樣以及試驗(yàn)過(guò)程。〔操作方式〕4.6.4自動(dòng)化設(shè)備運(yùn)行參數(shù)的設(shè)置應(yīng)建立權(quán)限控制。應(yīng)保存設(shè)置參數(shù)的書(shū)面記錄，并定期將其與實(shí)際設(shè)置參數(shù)對(duì)照，確保設(shè)置無(wú)誤，應(yīng)保存核實(shí)記錄?！苍O(shè)備參數(shù)控制〕4.6試驗(yàn)操作4.6.5應(yīng)保存自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備運(yùn)行記錄，并定期對(duì)運(yùn)行狀態(tài)進(jìn)行審核。〔試驗(yàn)追蹤〕4.6.6自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備運(yùn)行時(shí)，如果需要人工輔助或干預(yù)，應(yīng)對(duì)實(shí)施人工輔助或干預(yù)的人員、人工輔助或干預(yù)的時(shí)間和內(nèi)容、與自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備運(yùn)行的銜接等進(jìn)行記錄?！膊僮鞲深A(yù)控制〕4.6.7如果是采用手工操作標(biāo)本和試劑加樣或試驗(yàn)微孔板，應(yīng)完整記錄每一加樣和操作步驟。〔手工操作要求〕4.7試驗(yàn)性能監(jiān)控4.7.1.1在血液篩查過(guò)程中，應(yīng)對(duì)試驗(yàn)性能持續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以發(fā)現(xiàn)正在發(fā)生的任何性能變化，這些變化如果沒(méi)有得到及時(shí)糾正，最終可能導(dǎo)致試驗(yàn)批次的失敗，或者弱陽(yáng)性樣本的漏檢。

4.7試驗(yàn)性能監(jiān)控4.7.1.2選擇能夠及時(shí)反映試驗(yàn)性能或試驗(yàn)應(yīng)用〔試驗(yàn)或者試驗(yàn)操作者/操作系統(tǒng)〕變化的1項(xiàng)或者多項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以保證試驗(yàn)性能。這些參數(shù)包括：1〕試驗(yàn)對(duì)照的檢測(cè)值；2〕質(zhì)控品的檢測(cè)值；3〕初、復(fù)試有反響率及兩者的比例〔復(fù)試有反響性標(biāo)本數(shù)/初次試驗(yàn)有反響性標(biāo)本數(shù)〕。4.7.1.3應(yīng)當(dāng)根據(jù)質(zhì)控品的特性和用途加以選擇和使用?！彩褂媚康摹潮O(jiān)控有效性監(jiān)控穩(wěn)定性4.7試驗(yàn)性能監(jiān)控－質(zhì)控品的使用要求4.7.1.4作為試驗(yàn)有效性的外部對(duì)照應(yīng)具備：1〕經(jīng)過(guò)國(guó)際〔國(guó)家〕標(biāo)準(zhǔn)溯源；〔國(guó)際或國(guó)家溯源〕2〕以適宜的基質(zhì)進(jìn)行稀釋?zhuān)弧矞p少干擾〕3〕檢測(cè)標(biāo)志物含量接近檢測(cè)限〔S/CO值為2～5〕?！碴?yáng)性外部對(duì)照檢測(cè)限〕4.7.1.5用于監(jiān)測(cè)試驗(yàn)穩(wěn)定性的質(zhì)控品，不要求經(jīng)過(guò)國(guó)際〔國(guó)家〕標(biāo)準(zhǔn)溯源。4.7.1.6實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)盡可能使用質(zhì)控品。關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溯源國(guó)家計(jì)量局公布?標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理方法?一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用絕對(duì)測(cè)量法或兩種以上不同原理的準(zhǔn)確可靠的方法定值。在只有一種定值方法的情況下，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)室以同種準(zhǔn)確可靠的方法定值；準(zhǔn)確度具有國(guó)內(nèi)最高水平，均勻性在準(zhǔn)確度范圍之內(nèi)；穩(wěn)定性在一年以上或到達(dá)國(guó)際上同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的先進(jìn)水平；包裝形式符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的要求。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用與一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比較測(cè)量的方法或一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值方

法定值；準(zhǔn)確度和均勻性未到達(dá)一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的水平，但能滿(mǎn)足一般測(cè)量

的需要；穩(wěn)定性在半年以上，或能滿(mǎn)足實(shí)際測(cè)量的需要；包裝形式符合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的要求。關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溯源中華人民共和國(guó)制造計(jì)量器具許可證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書(shū)由國(guó)務(wù)院劑量行政部門(mén)批準(zhǔn)〔中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局〕4.7試驗(yàn)性能監(jiān)控－質(zhì)控品的使用要求4.7.1.7質(zhì)控品所含目標(biāo)檢測(cè)物的濃度應(yīng)滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求。在日常使用前應(yīng)對(duì)質(zhì)控品的種類(lèi)、規(guī)格、外觀(guān)、批號(hào)和效期進(jìn)行檢查。EIA監(jiān)控有效性的陽(yáng)性外部對(duì)照〔S/CO值為2～5〕；溯源性？反響性/非反響性監(jiān)控穩(wěn)定性QCS規(guī)格要求？是否需要？SPC陰性QCS是否需要？選擇適合不同的試驗(yàn)的QCSNAT〔是否適用？〕監(jiān)控有效性的陽(yáng)性外部對(duì)照？規(guī)格？〔分析靈敏度的2-5倍〕監(jiān)控穩(wěn)定性QCS是否需要？陰性QCS是否需要？溯源？性能穩(wěn)定？Procleix?的試驗(yàn)性能監(jiān)控系統(tǒng)試劑盒內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品：1支陰性標(biāo)準(zhǔn)品和3支陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品〔1支HIV-1陽(yáng)性、1支HCV陽(yáng)性和1支HBV陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品〕。試劑盒內(nèi)部質(zhì)控品：1支陰性質(zhì)控品和3支陽(yáng)性質(zhì)控品〔1支HIV-1陽(yáng)性、1支HCV陽(yáng)性和1支HBV陽(yáng)性質(zhì)控品〕放置位置：工作列表的兩端每個(gè)工作列表產(chǎn)生產(chǎn)生至少13個(gè)控制結(jié)果3個(gè)陰性標(biāo)準(zhǔn)品2個(gè)HIV-1陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品2個(gè)HCV陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品2個(gè)HBV陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品結(jié)果每套內(nèi)部質(zhì)控品產(chǎn)生4個(gè)檢測(cè)結(jié)果內(nèi)部質(zhì)控品總結(jié)果數(shù)取決于其總放置套數(shù)。每個(gè)檢測(cè)有內(nèi)標(biāo)每步動(dòng)作有傳感監(jiān)控cobas?TaqScreenMPX的

試驗(yàn)性能監(jiān)控系統(tǒng)MPXCTL:PC為合成的HIV-1、2，HCVRNA，HBVDNA。包裝在MS2噬菌體膜蛋白內(nèi)。1NC5PCMPXIC:合成的內(nèi)部對(duì)照RNA，包裝在MS2噬菌體膜蛋白內(nèi)每個(gè)檢測(cè)有內(nèi)標(biāo)每步動(dòng)作有傳感監(jiān)控4.7試驗(yàn)性能監(jiān)控－質(zhì)控品確認(rèn)4.7.1.7質(zhì)控品所含目標(biāo)檢測(cè)物的濃度應(yīng)滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求。在日常使用前應(yīng)對(duì)質(zhì)控品的種類(lèi)、規(guī)格、外觀(guān)、批號(hào)和效期進(jìn)行檢查。質(zhì)控品確認(rèn)的SOPALT質(zhì)控品：醫(yī)學(xué)決定水平；使用前預(yù)確認(rèn)；記錄EIA質(zhì)控品：S/CO2-5；使用前預(yù)確認(rèn)；記錄NAT質(zhì)控品配置：容器、耗材無(wú)RNA酶預(yù)試驗(yàn)穩(wěn)定性：試驗(yàn)周期1月？2月記錄4.7試驗(yàn)性能監(jiān)控－質(zhì)控品的使用要求4.7.1.8質(zhì)控品應(yīng)與血液檢測(cè)標(biāo)本在相同的檢測(cè)條件下進(jìn)行檢測(cè)。如單一微板為一批試驗(yàn)，每一微板至少包括1份外部質(zhì)控品。與標(biāo)本檢測(cè)條件相同批的概念：ALT，EIA，NAT4.7.1.9外部質(zhì)控品和內(nèi)部〔試劑盒〕對(duì)照不可相互替代。4.7.1.10外部質(zhì)控品的用途〔用于判定試驗(yàn)有效性或監(jiān)控試驗(yàn)穩(wěn)定性〕一經(jīng)確定，不應(yīng)隨意更改?！操|(zhì)控策略的穩(wěn)定性〕4.7.2ELISA室內(nèi)質(zhì)控

－附錄D血液檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控方法針對(duì)試驗(yàn)過(guò)程。基于試驗(yàn)結(jié)果和檢測(cè)數(shù)據(jù)血站血液檢測(cè)試驗(yàn)的類(lèi)型ELISA試驗(yàn)：血清學(xué)抗體或抗原檢測(cè)ALT酶學(xué)試驗(yàn)NAT試驗(yàn)：HBV/HCV/HIVDNA或RNA檢測(cè)推薦的室內(nèi)質(zhì)控方法ELISA試驗(yàn)有效性：通常采用試劑盒陰陽(yáng)性對(duì)照、弱陽(yáng)性質(zhì)控品實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的有效性穩(wěn)定性：采用弱陽(yáng)性質(zhì)控品和Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性ALT試驗(yàn)：定量試驗(yàn)。通常采用Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控ALT實(shí)驗(yàn)的精密性和有效性。NAT試驗(yàn)以及其它定性試驗(yàn)：可借鑒ELISA的質(zhì)控方法。D.2ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程穩(wěn)定性控制

質(zhì)控規(guī)那么13s：一個(gè)質(zhì)控值超過(guò)。用于提示可能存在隨機(jī)誤差。7x：7個(gè)連續(xù)的質(zhì)控值落在均值一側(cè)，用于提示可能存在系統(tǒng)誤差。質(zhì)控圖框架建立10～20天，至少20個(gè)數(shù)據(jù)累計(jì)框架的適用性？cv20％控制限關(guān)注－-3S是否低于1質(zhì)控框架的重建更換新批質(zhì)控品更換新批試劑過(guò)程變化4.8試驗(yàn)結(jié)果的判定4.8.1試驗(yàn)結(jié)果判定規(guī)那么應(yīng)制定明確的試驗(yàn)有效性和標(biāo)本試驗(yàn)結(jié)果判定規(guī)那么，將其編寫(xiě)或設(shè)置成為計(jì)算機(jī)程序，對(duì)其編寫(xiě)、設(shè)置、修改和啟用應(yīng)進(jìn)行控制，所有修改均應(yīng)保存原版本，確保其具有可追溯性。試驗(yàn)有效性規(guī)那么試驗(yàn)結(jié)果判定規(guī)那么采用LIS判定變更控制4.8試驗(yàn)結(jié)果的判定4.8.2試驗(yàn)有效的判定4.8.2.1應(yīng)核查每批試驗(yàn)所使用的試劑、設(shè)備、試驗(yàn)過(guò)程、有無(wú)人工干預(yù)或其他非正常工作步驟出現(xiàn)等關(guān)鍵控制點(diǎn)，正確無(wú)誤前方可對(duì)試驗(yàn)有效性進(jìn)行判定〔確定結(jié)果判斷的CCP〕4.8.2.2試劑盒各種試驗(yàn)對(duì)照的檢測(cè)值符合試劑說(shuō)明書(shū)的要求，是判定試驗(yàn)有效的最低要求。4.8.2.3如果外部質(zhì)控品的檢測(cè)值是作為試驗(yàn)有效性的判定依據(jù)之一，其檢測(cè)值應(yīng)符合既定要求?！餐獠抠|(zhì)控品的使用－有效性〕4.8.2.4如果外部質(zhì)控品的檢測(cè)值是作為試驗(yàn)穩(wěn)定性的監(jiān)控，其檢測(cè)值應(yīng)符合既定范圍。如果超出既定范圍，按既定程序決定試驗(yàn)是否有效?！餐獠抠|(zhì)控品的使用－穩(wěn)定性〕4.8.2.5如果采用人工判定，應(yīng)詳細(xì)記錄每一判定依據(jù)，應(yīng)雙人核查。〔人工判定的控制：記錄〕4.8.2.6如果判定一批試驗(yàn)無(wú)效，那么該批試驗(yàn)所有標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果均為無(wú)效?！操|(zhì)控結(jié)果與標(biāo)本結(jié)果的制約關(guān)系〕4.8試驗(yàn)結(jié)果的判定4.8.3標(biāo)本試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算和判定判定試驗(yàn)有效后，按照試劑說(shuō)明書(shū)的要求計(jì)算臨界值和灰區(qū)。根據(jù)標(biāo)本檢測(cè)值與臨界值的比較結(jié)果，判定為標(biāo)本檢測(cè)結(jié)論為無(wú)反響性、有反響性或不確定。關(guān)于灰區(qū)關(guān)于灰區(qū)從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度，灰區(qū)決定了cutoff的設(shè)定范圍。在這個(gè)范圍內(nèi)設(shè)定cutoff，影響試驗(yàn)靈敏性或特異性。在灰區(qū)內(nèi)設(shè)定Cutoff試劑盒說(shuō)明書(shū)指定的計(jì)算方法用戶(hù)自己的計(jì)算方法目的：提高分析靈敏度，減少假陰性方式：依據(jù)說(shuō)明書(shū)計(jì)算出的cutoff下移一定百分比cutoff下移比例的設(shè)定依據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)C50試驗(yàn)ROC曲線(xiàn)試驗(yàn)變異關(guān)于灰區(qū)

NAT與EIA結(jié)果－HBV

Dis+Dis-HBsAg（NAT+

and

EIA+）376EIA++332

29735EIA+44A202B42366NAT與EIA結(jié)果－HCV血站檢測(cè)結(jié)果羅氏電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)RIBA確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果試劑代碼初次檢測(cè)S/CO值復(fù)檢S/CO值1復(fù)檢S/CO值2檢測(cè)信號(hào)值COI檢測(cè)結(jié)果C100C33cC22pNS5hSOD結(jié)果判定B1.4571.9641.0710.113N-+-++/-PB1.5291.1071.15555.1R+2+4+--PA0.8581.2031.2060.441N--++-PA1.0321.2631.2650.177N++-+/--PA1.5541.8451.7120.092N-+2+--PB1.3861.0070.9140.169N+3+-+/--PB0.7210.5640.84316.81R

++/-

+-+/-PA0.7691.0130.9610.087N2+--4+-PA0.9731.2131.193524.5R4+4+4+3+-P4.9ELISA初次試驗(yàn)有反響性標(biāo)本的重復(fù)試驗(yàn)4.9ELISA初次試驗(yàn)有反響性標(biāo)本的重復(fù)試驗(yàn)方案1：以同一試驗(yàn)對(duì)原血樣〔或從血袋導(dǎo)管重新取樣〕做雙孔復(fù)試，如果雙孔復(fù)試結(jié)果均為無(wú)反響性，其初試有反響性可能由于假反響性或技術(shù)誤差導(dǎo)致，檢測(cè)結(jié)論為無(wú)反響性，血液可放行供臨床使用；如果雙孔復(fù)試結(jié)果中任何1孔為有反響性，那么檢測(cè)結(jié)論為有反響性，對(duì)應(yīng)的血液及由其制備的所有成分應(yīng)隔離并報(bào)廢，將血液標(biāo)本轉(zhuǎn)送相關(guān)實(shí)驗(yàn)室做進(jìn)一步確證或補(bǔ)充試驗(yàn)。重復(fù)試驗(yàn)對(duì)象：原血樣或?qū)Ч苎獦酉嗤翰捎脦源牟裳幌嗤簾o(wú)旁袋的采血袋檢測(cè)前過(guò)程控制機(jī)制不合格標(biāo)本進(jìn)一步確證的建議方案2：不做重復(fù)試驗(yàn)，初次試驗(yàn)結(jié)論即為檢測(cè)最終結(jié)論4.10核酸初次試驗(yàn)

有反響性的進(jìn)一步處理根據(jù)試劑說(shuō)明書(shū)涉及后續(xù)試驗(yàn)拆分試驗(yàn)：混樣反響性標(biāo)本鑒別試驗(yàn)：?jiǎn)螜z反響性標(biāo)本或拆分后反響性標(biāo)本重復(fù)試驗(yàn)：是否采用4.11血型檢測(cè)

4.11.1血型檢測(cè)工程GB18469?全血及成分血質(zhì)量要求?規(guī)定的強(qiáng)制檢測(cè)工程有：1)ABO血型正確定型；2〕RhD血型正確定型?！补こ碳昂细駱?biāo)準(zhǔn)〕4.11.2血型檢測(cè)方法血型篩查常用方法有平板法和微板法、血型鑒定常用試管法和微板法。按照試劑說(shuō)明書(shū)和?全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程?〔第3版〕的規(guī)定進(jìn)行具體操作和質(zhì)量控制。附錄E提供了建立微板法一般方法，可供實(shí)驗(yàn)室自行建立微板法時(shí)參考。全自動(dòng)化血型鑒定系統(tǒng)按照使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，投入使用前應(yīng)經(jīng)過(guò)充分確認(rèn)。如有必要，可增加血型基因檢測(cè)。血液檢測(cè)：ABO正反定型，RhD血型關(guān)注試劑說(shuō)明書(shū)是否明確平板法、微板法和試管法程序；是否適用于自動(dòng)化設(shè)備血型試驗(yàn)方法的變更與確認(rèn)4.11血型檢測(cè)4.11.3血型檢測(cè)結(jié)論4.11.3.1應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)2次檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)，一致時(shí)才能做出血型檢測(cè)最終結(jié)論。4.11.3.2如果2次檢測(cè)結(jié)果不一致，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行細(xì)致審慎調(diào)查，發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致不一致的原因，正確無(wú)誤加以解決。ABO血型結(jié)果的比對(duì)獻(xiàn)血者快速檢測(cè)結(jié)果〔正定型〕與實(shí)驗(yàn)室結(jié)果〔正反定型〕獻(xiàn)血者歷史血型結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室結(jié)果2次實(shí)驗(yàn)室結(jié)果Rh〔D〕血型比對(duì)：重點(diǎn)Rh〔D〕陰性結(jié)果Rh〔D〕陰性：篩查試驗(yàn)結(jié)果與確證試驗(yàn)結(jié)果Rh〔D〕陽(yáng)性血型試驗(yàn)的質(zhì)控：采用已正確定型的包含和不包含A/B抗原和Rh〔D〕抗原的血液標(biāo)本血型試驗(yàn)問(wèn)題的不同理解如何理解2次檢測(cè)結(jié)果模式1：實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行2次ABO正反定型和RhD篩查，RhD陰性和ABO血型不符均進(jìn)一步鑒定。模式2：采血前實(shí)施ABO正定型。實(shí)驗(yàn)室只需做1次ABO正反定型和RhD篩查。RhD陰性和ABO血型不符均進(jìn)一步鑒定。血型檢測(cè)目的：ABO血型和RhD正確定型確保滿(mǎn)足標(biāo)準(zhǔn)的根本方法：結(jié)果比較如何比較：沒(méi)有唯一路徑回憶性確認(rèn)：如模式2可以滿(mǎn)足要求，本錢(qián)效益較好。4.12血液檢測(cè)最終結(jié)論的判定

4.12.1血液檢測(cè)合格判定標(biāo)準(zhǔn)HIV、HBV、HCV、梅毒感染標(biāo)志物檢測(cè)的最終結(jié)論均為無(wú)反響性，ABO/RhD血型正確定型，ALT測(cè)定值符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。4.12.2血液檢測(cè)不合格的判定標(biāo)準(zhǔn)不符合條規(guī)定的情形。4.12.3應(yīng)當(dāng)建立和實(shí)施血液檢測(cè)最終結(jié)論的計(jì)算機(jī)判定程序。如果需要人工判定，應(yīng)由雙人復(fù)核。判定方式計(jì)算機(jī)判定人工判定新規(guī)程中檢測(cè)后過(guò)程控制要求4.13血液檢測(cè)結(jié)論的報(bào)告和利用4.13.1血液檢測(cè)最終結(jié)論是血液放行與否的依據(jù)。只有檢測(cè)合格的血液方可放行供臨床使用，檢測(cè)不合格的血液不得放行?！惭悍判袠?biāo)準(zhǔn)〕4.13.2血液檢測(cè)最終結(jié)論應(yīng)以電子數(shù)據(jù)傳輸，并為計(jì)算機(jī)血液放行控制程序直接利用。〔報(bào)告?zhèn)鬏敺绞健?.13.3如果需要人工錄入血液檢測(cè)最終結(jié)論，或者需要人工放行，應(yīng)由雙人復(fù)核。〔人工干預(yù)環(huán)節(jié)的控制〕4.13.4血液集中檢測(cè)的雙方應(yīng)明確血液檢測(cè)結(jié)論的報(bào)告和利用的方式、職責(zé)與分工?！布袡z測(cè)模式報(bào)告利用的程序和職責(zé)〕4.13.5發(fā)現(xiàn)血液檢測(cè)結(jié)論報(bào)告有誤，應(yīng)迅速啟動(dòng)血液檢測(cè)報(bào)告和血液收回程序。〔報(bào)告收回〕附錄B血液檢測(cè)方法確實(shí)認(rèn)血液檢測(cè)方法包括完成檢測(cè)必需的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)程序組合確認(rèn)的范圍實(shí)驗(yàn)室首次引入的檢測(cè)方法，如實(shí)驗(yàn)室從未使用過(guò)的試劑、儀器等。實(shí)驗(yàn)室首次將某工程引入現(xiàn)用檢測(cè)方法，如HBsAg工程由A儀器檢測(cè)改為由B儀器檢測(cè)。假設(shè)多臺(tái)儀器〔相同品牌和型號(hào)〕檢測(cè)同一個(gè)工程，應(yīng)對(duì)每一臺(tái)儀器的性能進(jìn)行確認(rèn)比較分析方法確實(shí)認(rèn)確認(rèn)方法性能的技術(shù)包括使用參考標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))進(jìn)行比較與其他方法所得結(jié)果進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)對(duì)影響結(jié)果的因素做系統(tǒng)性評(píng)價(jià)如需要，對(duì)所得結(jié)果不確定度進(jìn)行評(píng)價(jià)血站實(shí)驗(yàn)室分析方法定性分析方法HBsAg、抗－HCV，抗－HIV，抗－TP，NAT定性分析特性參數(shù)：靈敏度、特異性、準(zhǔn)確性、重復(fù)性、預(yù)期值、似然比和耐用性等定量分析方法ALT、細(xì)胞計(jì)數(shù)定量分析特性參數(shù)：正確度、精密度、分析靈敏性、分析特異性、檢測(cè)可報(bào)告范圍、參考區(qū)間和耐用性鑒別分析方法ABO、Rh〔D〕靈敏度、特異性、重復(fù)性等定性試驗(yàn)確實(shí)認(rèn)方法EP12-AUserProtocolforEvaluationofQualitativeTestPerformance;ApprovedGuidelineEP12-A2UserProtocolforEvaluationofQualitativeTestPerformance;ApprovedGuideline—SecondEdition定性試驗(yàn)確認(rèn)定性分析方法的特性確認(rèn)活動(dòng)的一般要求重復(fù)性試驗(yàn)〔精密性試驗(yàn)〕兩靈敏性特異性的比較〔準(zhǔn)確性試驗(yàn)〕試驗(yàn)結(jié)果一致性比較定量試驗(yàn)確實(shí)認(rèn)方法EP5-A2EvaluationofPrecisionPerformanceofQuantitativeMeasurementMethods;ApprovedGuideline—SecondEditionEP6-AEvaluationoftheLinearityofQuantitativeMeasurementProcedures：AStatisticalApproach；ApprovedGuideline EP9-A2MethodcomparisonandbiasestimationusingpatientsamplesapprovedguidelineC28-A