微生物檢驗(yàn)重點(diǎn)知識(shí)

微生物知識(shí)要點(diǎn)：一、葡萄球菌：TSST-1；耐熱核酸酶； 葡激酶；透明質(zhì)酸酶；脂酶。內(nèi)膜炎；全身感染敗血癥、膿毒血癥； （毒素相關(guān)）食物中毒燙傷樣皮膚綜合癥；毒性休克綜合癥；假膜性腸炎。鑒定： 細(xì)菌和菌落形態(tài)； 生化實(shí)驗(yàn)：觸+微陽性；鏈+腸陰性葡：桿菌肽R，呋喃唑酮S金黃色葡萄球菌特征：普通平板-脂溶性黃色色素；血瓊脂-β溶血；

血漿凝固酶+； 耐熱核酸酶甘露醇發(fā)酵+2）.如何確定從標(biāo)本中分離的細(xì)菌為葡萄球菌？并確定其有無致病性。72-3mm、產(chǎn)生不同色素的菌落。金葡菌菌落周圍有透明溶血環(huán)。③試驗(yàn)鑒定：血漿凝固酶試驗(yàn)，甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)，耐熱核酸酶試驗(yàn)，腸毒素測(cè)定，SPAA二、鏈球菌：致病因素：M血素；致熱外毒素。III48h幾中鏈球菌特征：A群：血平板β溶血;桿菌肽-敏感BβCAMP+；膽汗七葉苷（—試驗(yàn)（+）草綠色鏈球菌：血平板α溶血；optochin（—；αoptochin（+莢膜腫脹實(shí)驗(yàn)（+）三、大腸埃希菌致病因素：侵襲力（K；內(nèi)毒素；腸毒素（LT，ST）臨床意義：腸道外感染（等；腸道感染：EHEC、ETEC、EPEC、EIEC、EaggEC鑒定：普通平板（濕潤、光滑、灰白中等大小菌落）葡萄糖發(fā)酵（+，硝酸鹽還原（+，氧化酶（—，觸酶（+）中國蘭平板（藍(lán)色，伊紅美藍(lán)（紫黑色）SS（紅色）四、志賀菌屬致病因素：侵襲力（菌毛；內(nèi)毒素；外毒素（ST，Vero）臨床意義：1）急性細(xì)菌性痢疾：腹痛腹瀉膿血粘液便，里急后重，發(fā)WBC；中毒性菌痢多見于小兒，2）疾；3）攜帶者鑒定：葡萄糖發(fā)酵（+，硝酸鹽還原（+，氧化酶（—，觸酶SS清學(xué)鑒定。簡(jiǎn)述對(duì)疑似痢疾患者進(jìn)行病原學(xué)診斷的常規(guī)與快速方法。答：常規(guī)鑒定：①初步鑒定②最后鑒別③鑒別試驗(yàn)④血清學(xué)鑒定⑤非典型菌株可用傳代法與毒力試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。生物學(xué)方法五、沙門菌屬致病因素 侵襲力（Vi抗原，內(nèi)毒素，腸毒素。臨床意義 胃腸炎（食物中毒；菌血癥和敗血癥；腸熱癥（傷寒副傷寒）SS菌，需進(jìn)一步生化反應(yīng)鑒定，3．如何根據(jù)O抗體和H抗體的變化特點(diǎn)判斷肥達(dá)試驗(yàn)的結(jié)果？答：若OHOHOHO4．對(duì)腸熱癥患者進(jìn)行微生物學(xué)檢查時(shí)標(biāo)本采集應(yīng)注意什么？答:根據(jù)不同的疾病、不同的病程取不同的標(biāo)本。腸熱癥第1、2周取外周血，第2、3周取糞便、尿液，全程可取骨髓分離培養(yǎng)細(xì)菌。六、銅綠假單胞菌4℃42℃5鑒定：革蘭陰性桿菌，葡萄糖氧化發(fā)酵（氧化型，動(dòng)力陽性，氧化酶+，.觸酶（+，專性需氧，營養(yǎng)要求不高，麥康凱上生物良好，初始分離培養(yǎng)基特征性菌落（擴(kuò)展性，平坦，具有鋸齒邊緣，金屬性光澤，產(chǎn)生藍(lán)綠色色素，玉米面氣味）42度長(zhǎng)，4度不長(zhǎng)。七、嗜血桿菌簡(jiǎn)述流感嗜血桿菌的生物學(xué)特點(diǎn).答：革蘭陰性短小球桿菌，無芽胞、無鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)，多數(shù)菌有莢膜。需氧或兼性厭氧最適生長(zhǎng)溫度35℃，最佳培養(yǎng)基是巧克力瓊脂。臨床意義：腦膜炎、鼻咽炎、關(guān)節(jié)炎、心包炎，鼻竇炎，中耳炎CO2力平板，露滴狀菌落。八、霍亂弧菌霍亂患者為什么會(huì)出現(xiàn)劇烈腹瀉與嚴(yán)重脫水的癥狀？1A5B，BAAcAMP導(dǎo)致腸粘膜細(xì)胞內(nèi)的水、氯和碳酸氫鉀等過度分泌到腸腔，同時(shí)鈉的吸收減少，導(dǎo)致嚴(yán)重的腹瀉和嘔吐.九白喉棒狀桿菌簡(jiǎn)述白喉棒狀桿菌的致病過程。白喉棒狀桿菌在鼻咽部粘膜處繁殖并產(chǎn)生外毒素，引起局部炎癥和全身中毒癥狀。白喉?xiàng)U菌在侵犯局部增殖，產(chǎn)生外毒素致病2．簡(jiǎn)述白喉?xiàng)U菌體外毒力試驗(yàn)的原理、方法與結(jié)果判斷。答：①瓊脂平板毒力試驗(yàn)。將含有20%牛血清肉湯瓊脂分注與平皿中，每只平皿(Elek平板)。在與濾紙條相垂直的方向?qū)⒋龣z菌畫直線接種，劃6-7mm，10mm37℃24-48②SPAIgGSPASPA-IgG30min. .一，直或微彎，一端或兩端膨大，排列呈B九結(jié)核桿菌2D3D結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁中脂質(zhì)含量高，這一特點(diǎn)有何意義？答：結(jié)核分枝桿菌胞壁含脂質(zhì)多，與其染色性、抵抗力、生長(zhǎng)速度與致病性等特性有密切關(guān)系，脂質(zhì)中的分枝菌酸使其具有抗酸性；細(xì)胞壁含大量脂質(zhì)，可故生長(zhǎng)緩慢，且脂質(zhì)中的磷脂、索狀因子、蠟質(zhì)D、硫酸腦苷脂等毒性成分以不同機(jī)制致病。簡(jiǎn)述從標(biāo)本中檢驗(yàn)結(jié)核分枝桿菌的方法。答：1．顯微鏡檢查(1)直接涂片染色鏡檢：是一種臨床常用的簡(jiǎn)易快速的檢查方法。直接涂片法是用接種環(huán)取病人痰液中濃厚部分或離心沉淀(3000r／min，20min)的尿沉淀物2—3接種環(huán)涂片，涂片要厚。經(jīng)自然于燥和火焰固定后進(jìn)行齊-尼抗酸染色，或作金胺熒光染色。前法用油鏡檢查，后法用熒光顯微鏡高倍鏡檢查鏡檢時(shí)應(yīng)仔細(xì)查遍整個(gè)涂片或觀察至少100個(gè)視野結(jié)核分枝桿菌抗酸染色后呈紅色其它細(xì)菌和細(xì)胞為藍(lán)色經(jīng)熒光染色的結(jié)核分枝桿菌在黑色背景中呈亮黃色。涂片鏡檢結(jié)果應(yīng)報(bào)告“找到抗酸性桿菌’或“未找到抗酸性桿菌，而不能報(bào)告“找到結(jié)核分枝桿菌。(2濃縮集菌涂片檢查法：如果直接涂片鏡檢不易檢出結(jié)核桿菌應(yīng)采用濃縮集菌涂片檢查法以提高結(jié)核桿菌的檢出率所謂濃縮集菌涂片即為將采集標(biāo)本離心取沉淀涂片或是采用漂浮集菌法，集菌后標(biāo)本經(jīng)反復(fù)多次使涂層加厚，一般取3—4個(gè)接種環(huán)，涂抹面積大約直徑在15mm即可，干燥固定后染色鏡檢2．核酸檢測(cè)用PCR法快速診斷結(jié)核分枝桿菌感染設(shè)計(jì)結(jié)核分枝桿菌特異rRNA片段的引物進(jìn)行擴(kuò)增然后用結(jié)核分枝桿菌rRNA序列特異的DNA探針與之雜交PCR技術(shù)的特異性與敏感性均大于95％抗PPDIgG的檢測(cè) 用ELlSA法檢測(cè)患者血清中抗可作為活動(dòng)性結(jié)核分枝桿菌感染的快速診斷方法之一肺結(jié)核病人的血清陽性率為80％—90％。簡(jiǎn)述抗酸染色的步驟與結(jié)果，并舉出兩種抗酸菌。5min②脫色：31min③1min桿菌均為抗酸菌5．一患者懷疑患有肺結(jié)核，如何進(jìn)行微生物學(xué)檢查？（包括標(biāo)本采集至報(bào)告）答：1）標(biāo)本采集：根據(jù)感染部位不同，采集不同的標(biāo)本。2）標(biāo)本直接檢查：PPDIgG3）分離培養(yǎng)與鑒定4）5）6）動(dòng)物接種.梅毒螺旋體獲得性梅毒（TP）官肉芽腫。標(biāo)本直接檢測(cè)1、 暗視野顯微鏡檢查2、免疫熒光染色3、鍍銀染色法4、核酸檢測(cè)抗體檢測(cè)1、 性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)2、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡試驗(yàn)（RRR）3、苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）熒光梅毒螺旋抗體吸收試驗(yàn)FTA-ABS；熒光梅毒螺旋抗體吸收試驗(yàn)FTA-ABS；熒光梅毒螺旋抗體雙染色試驗(yàn)FTA-ABS-DS;抗梅毒螺旋抗體的微量血凝檢測(cè)MHA-TP ;抗梅毒螺旋抗體明姣顆粒凝集試驗(yàn)TPPA; ELISA1.L（表格自制μμm}{細(xì)胞膜--不含固醇--含高濃度固醇}{細(xì)胞--缺乏或無--無}{細(xì)胞壁缺失的原因--青霉素、溶菌酶和膽汁等作用所致，去除條件可恢復(fù)--遺傳}{通過濾器--能通過濾器--能通過濾器}{對(duì)青霉素的作用--抵抗--抵抗}{液體培養(yǎng)--有一定混濁度，可附壁---混濁度極低}{致病性--引起慢性感染，如骨髓炎、尿路感染和心內(nèi)膜炎等--原發(fā)性非典型性肺炎，泌尿生殖道感染和條件致病}簡(jiǎn)述衣原體獨(dú)特的發(fā)育周期。沙眼的病原體與其傳播方式。答：沙眼的病原體是沙眼衣原體，傳播方式主要通過眼-眼或眼-手-眼傳播衣原體有哪些重要特點(diǎn)？答：①形態(tài)多為球型，革蘭染色陰性原體小，介于細(xì)菌和病毒之間，始體大，大小與細(xì)菌相似。②代謝，缺乏能量來源，故嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生DNARNA抗生素敏感。衣原體引起哪些重要疾??？答：能引起人類的沙眼、泌尿生殖道的感染和呼吸系統(tǒng)等疾病2.簡(jiǎn)述白色念珠菌感染的微生物檢查方法與結(jié)果分析。. .ELISA1ml等有膿腫。白色念珠菌檢驗(yàn)：1標(biāo)本直接檢查直接顯微鏡檢查；G1-3-B-D-抗原檢測(cè)，ELISA免疫印跡；核酸檢測(cè)；2培養(yǎng)鑒定接種沙氏培養(yǎng)基，25371-4可見假菌絲和芽生孢子。鑒定試驗(yàn)：1芽管形成試驗(yàn)2厚膜孢子形成試驗(yàn)3糖同化或發(fā)酵試驗(yàn)。白色念珠菌鑒定的依據(jù)有哪些與35℃均生長(zhǎng)并形成頂端厚膜孢子，42℃也能生長(zhǎng)。③芽管形成試驗(yàn)陽性。④驗(yàn)，培養(yǎng)基不變色或淡紅色。橋。新生隱球菌主要侵犯部位為肺、腦、腦膜，也可侵犯皮膚，骨，關(guān)節(jié)致病物質(zhì)為莢膜；標(biāo)本直接檢測(cè)：1顯微鏡檢查2抗原檢測(cè)3抗體檢測(cè)4核酸檢測(cè)簡(jiǎn)述流行性感冒病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)與其主要結(jié)構(gòu)成分的功能。流感病毒呈球形或絲狀⑴流感病毒的內(nèi)部結(jié)構(gòu)核衣殼：病毒分片段的RNA，NPRNARNAMM特異性。外膜：來自宿主細(xì)胞的脂質(zhì)雙層膜。⑵流感病毒的輔助結(jié)構(gòu)血凝素(HA：HA（病毒吸附）保護(hù)性抗原，血凝抑制抗體(保護(hù)性抗體)神經(jīng)氨酸酶NA（核衣殼釋放）與病毒釋放有關(guān)。簡(jiǎn)述分離與鑒定流感病毒常用的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法有哪些。..主要包括病毒分離培養(yǎng)、血清學(xué)診斷和快速診斷方法3.甲型流感病毒為何容易引起大流行？RNA87HANA4.簡(jiǎn)述流感病毒的抗原變異。（antigenicHANA引起局部中、小型流行?？乖D(zhuǎn)換（antigenicshift）因HANA輪狀病毒臨床意義：4-2424-72，80%患兒先10-20性便呀白色米湯樣便，無粘液和膿血，惡臭。簡(jiǎn)述輪狀病毒的微生物檢驗(yàn)方法⑴標(biāo)本采集與處理⑵標(biāo)本直接檢查①電鏡和免疫電鏡檢查②抗原檢測(cè)③病毒RNA聚丙烯酰胺凝膠電泳分析④核酸檢測(cè)⑶病毒分離培養(yǎng)簡(jiǎn)述乙型肝炎病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)。球形,雙層衣殼。外衣殼=包膜(脂質(zhì)雙層+蛋白質(zhì))HBsAg等內(nèi)衣殼：HBcAg、HBeAg內(nèi)部：DNA---環(huán)狀雙鏈、DNA多聚酶4ORF,7基因簡(jiǎn)述乙型肝炎病毒的抗原組成與其意義。HBV抗原組成⑴、HBsAgHBVHBs。⑵、HBcAg：HBcAgHBcAgCTLHBcAgHBc，HBcIgMHBVHBeAgHBVHBeAgHBeHbeHBe（是預(yù)后良好的征象）簡(jiǎn)述乙型肝炎病毒抗原抗體系統(tǒng)檢測(cè)的用途⑴乙型肝炎的診斷⑵判斷傳染型⑶判斷預(yù)后⑷篩選獻(xiàn)血員⑸檢測(cè)乙肝疫苗接種效果⑹流行病學(xué)調(diào)查巨細(xì)胞病毒感染的病原學(xué)直接檢查方法有哪些？⑴檢測(cè)病毒顆粒⑵檢測(cè)病毒包涵體⑶檢測(cè)病毒抗原⑷檢測(cè)病毒核酸疑似人巨細(xì)胞病毒先天性感染的診斷依據(jù)是什么？3HCMV天性感染最敏感和特異的診斷依據(jù)。HIV的形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài)：球形病毒，80-120nm結(jié)構(gòu)1、核衣與核心——呈圓錐狀、兩條相同的正. .RNA、有衣殼蛋白和核衣殼蛋白、有逆轉(zhuǎn)錄酶，蛋白酶和整合酶22、糖蛋白刺突（gP120gP41）2.簡(jiǎn)述HIV的復(fù)制過程。⑴逆向轉(zhuǎn)錄為DNA，形成DNA復(fù)制中間體，⑵形成前病毒DNA⑶轉(zhuǎn)錄為病毒RNAmRNARNA3AIDSAIDS癥、艾滋病4.HIV感染的常用臨床檢測(cè)方法有哪些？⑴標(biāo)本直接檢查①抗原檢查②核酸檢查⑵抗體檢測(cè)①初篩試驗(yàn)②確證試驗(yàn)⑶CD4T細(xì)胞計(jì)數(shù)4.人乳頭瘤病毒診斷方法有哪些？