中草藥飼料添加劑對(duì)肉雞免疫指標(biāo)的作用分析,畜牧獸醫(yī)論文

中草藥飼料添加劑對(duì)肉雞免疫指標(biāo)的作用分析,畜牧獸醫(yī)論文中草藥飼料添加劑具有天然性、安全性、無(wú)殘留和藥源廣泛等特點(diǎn)，完全知足綠色飼料添加劑的要求:對(duì)畜禽無(wú)毒害;在畜禽產(chǎn)品中無(wú)殘留，對(duì)人類健康無(wú)危害，畜禽排泄物對(duì)環(huán)境無(wú)污染。2018年5月國(guó)家發(fā)布的(綠色食品畜禽飼料及飼料添加劑使用準(zhǔn)則〕(NY/T471－2018)中，將天然植物飼料添加劑單列一條，鼓勵(lì)使用天然植物飼料添加劑。河南工業(yè)大學(xué)研發(fā)的預(yù)防和治療禽類病毒性疾病的中藥組合物(專利:201810149022)，具有高效防控病毒性疾病、促進(jìn)肉雞生長(zhǎng)及提高機(jī)體免疫力的性能。將抗病中草藥組方轉(zhuǎn)化成中草藥飼料添加劑(CHA－PT)，根據(jù)肉雞的生長(zhǎng)特點(diǎn)，以不同比例添加到全價(jià)肉雞顆粒飼料中，全程飼喂，研究其對(duì)肉雞免疫性能、血清生化指標(biāo)及抗氧化特性的影響，為其在生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供理論根據(jù)。1材料與方式方法1.1試驗(yàn)動(dòng)物1日齡科寶500肉雛雞:自河南開(kāi)封正大種雞場(chǎng)購(gòu)買，300只，公母不限。1.2試驗(yàn)方式方法1.2.1CHA－PT粉末的制備根據(jù)專利中草藥組方，購(gòu)買中草藥(市售)，經(jīng)粉碎過(guò)50目的篩，按比例配制均勻混合制成中草藥粉末，自封袋密封，4℃貯藏待用。1.2.2肉雞全價(jià)飼料日糧的配制肉雞日糧為玉米－豆粕型日糧，日糧的組成見(jiàn)表1。配合全價(jià)日糧所到達(dá)的營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。【表1-2】1.2.3肉雞全價(jià)顆粒料的制備對(duì)購(gòu)入飼料原料用錘片式粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，過(guò)2.5mm直徑的篩子，按配方稱取各種原料，用臥式螺旋葉片混合機(jī)進(jìn)行混合，再參加不同量的添加劑，再次混勻10min;加水5%調(diào)質(zhì)約2min，采用環(huán)模壓縮比為1∶8，以環(huán)模直徑為3.0mm制1～3周齡顆粒飼料，以環(huán)模直徑為4.5mm制4～6周齡顆粒飼料。制出的1～3周齡顆粒飼料經(jīng)粉碎機(jī)二次破碎。冷卻至料溫＜20℃后裝袋，陰涼枯燥處貯藏。1.2.4試驗(yàn)設(shè)計(jì)及動(dòng)物分組將購(gòu)入的1日齡科寶500肉雞雛逐只稱質(zhì)量，根據(jù)體質(zhì)量，將肉雞分成5個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每重復(fù)10只雞。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表3?！颈?】1.2.5肉雞的飼養(yǎng)管理采用塑料網(wǎng)平面籠養(yǎng)形式，按科寶500飼養(yǎng)管理規(guī)程飼養(yǎng)。試驗(yàn)期為42d。1.2.6肉雞的免疫程序根據(jù)河南開(kāi)封正大種雞場(chǎng)建議的免疫程序進(jìn)行修改。1日齡進(jìn)行母源抗體的檢測(cè)，根據(jù)母源抗體的水平?jīng)Q定新城疫－傳支首免日齡，詳細(xì)的免疫程序見(jiàn)表4。所用雞新城疫－傳支二聯(lián)疫苗(LaSota株+H120株)和雞傳染性法氏囊病活疫苗(B87株)均購(gòu)買于青島易邦生物工程有限公司(YE-BIO)?！颈?】1.2.7抗體檢測(cè)根據(jù)表4所列的檢測(cè)程序，刺破翅靜脈采血。采血后，3500r/min離心10min，汲取上層血清于4℃保存，第2天檢測(cè)抗體水平。采用血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行新城疫抗體檢測(cè)，以瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)進(jìn)行法氏囊抗體檢測(cè)。每個(gè)重復(fù)采3只雞，每組采18只雞進(jìn)行檢測(cè)。1.2.8免疫器官指數(shù)測(cè)定飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)抽取18只一共抽取60只雞進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。稱取活質(zhì)量后，頸動(dòng)脈放血致死。解剖觀察各臟器變化;采集解剖雞只的胸腺、脾和法氏囊，沖淋去血污，在濾紙上吸去水份，修剪組織周圍的脂肪，稱質(zhì)量獲得各免疫器官的質(zhì)量，根據(jù)活質(zhì)量計(jì)算免疫器官指數(shù)。免疫器官指數(shù)/(mgg－1)=免疫器官質(zhì)量/活質(zhì)量。1.2.9生化指標(biāo)測(cè)定收集1.2.8抽取雞只的頸動(dòng)脈血，3500r/min離心10min，汲取上層血清于4℃保存，第2天送鄭州大學(xué)校醫(yī)院檢驗(yàn)科采用日立7150全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)與肝功能相關(guān)的生化指標(biāo):丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)及白球比(A/G)。檢測(cè)與脂肪代謝相關(guān)的指標(biāo):三酰甘油(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)。1.2.10抗氧化能力的測(cè)定收集1.2.9抽取雞只的頸動(dòng)脈血清，以南京建成生化檢測(cè)試劑盒測(cè)定血清中總抗氧化能力(T－AOC)、總超氧化物歧化酶(T－SOD)和復(fù)原型谷胱甘肽(GSH)的水平。測(cè)定方式方法參照試劑盒講明書(shū)操作。1.2.11數(shù)據(jù)的分析和統(tǒng)計(jì)所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel初步整理后，使用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS18.0進(jìn)行處理和單因素(Duncan氏法)分析，各組數(shù)據(jù)采用平均值標(biāo)準(zhǔn)誤的形式表示，以P＜0.05為差異顯著，以P＜0.01為差異極顯著。2結(jié)果與分析2.1抗體檢測(cè)效價(jià)在42d的肉雞飼養(yǎng)中，僅對(duì)嚴(yán)重影響雞群生長(zhǎng)的新城疫－傳染性支氣管炎和法氏囊疾病進(jìn)行防疫。因而，在整個(gè)飼養(yǎng)經(jīng)過(guò)中，對(duì)新城疫進(jìn)行2次免疫和3次抗體效價(jià)檢測(cè);對(duì)法氏囊進(jìn)行2次免疫和2次抗體檢測(cè)。【表5】從表5可見(jiàn):新城疫母源抗體水平在5.4左右，相對(duì)較低，因而，確定首免的日齡為5日齡。新城疫疾病的首免以新－支二聯(lián)弱毒疫苗滴鼻和點(diǎn)眼的方式進(jìn)行，以刺激機(jī)體產(chǎn)生黏膜免疫。在免疫9d后檢測(cè)抗體水平，中草藥添加劑組(Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組)的抗體水平維持在抗體臨界水平4.0以上，平均為4.43，明顯高于2個(gè)對(duì)照組(P＜0.05);華而不實(shí)，黃霉素陽(yáng)性對(duì)照組的抗體水平最低為3.0;Ⅴ組的新城疫水平最高為5.0，高于正常對(duì)照1.7，提高了抗體的水平;新城疫二免免疫后14d檢測(cè)各組抗體水平，各組的抗體水平較首免均有所升高。中草藥添加組(Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組)的平均抗體水平升高0.57個(gè)滴度，與正常組差異明顯(P＜0.05);黃霉素藥物對(duì)照組升高明顯，同時(shí)結(jié)合臨床死亡雞數(shù)增加，懷疑有個(gè)別雞只感染隱性新城疫疾病，導(dǎo)致監(jiān)測(cè)抗體水平升高。對(duì)法氏囊抗體的檢測(cè)采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)進(jìn)行。2次免疫后檢測(cè)，法氏囊抗體均未出現(xiàn)明顯的沉淀線，講明法氏囊免疫刺激機(jī)體沒(méi)有產(chǎn)生高的抗體水平，同時(shí)，也講明臨床未發(fā)生法氏囊疾病的感染。2.2免疫器官指數(shù)試驗(yàn)結(jié)束后，各組抽取30%(18/60)的雞只進(jìn)行解剖，觀察各組免疫器官均未出現(xiàn)明顯的病理變化;采取胸腺、脾和法氏囊，稱質(zhì)量，計(jì)算各組免疫器官指數(shù)。胸腺、法氏囊和脾是禽類重要的免疫器官，其質(zhì)量與其免疫細(xì)胞數(shù)量及功能密切相關(guān)，故免疫臟器指數(shù)可在一定程度上反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱。從表6可見(jiàn):Ⅳ組的胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)、脾質(zhì)量和脾指數(shù)及法氏囊質(zhì)量和法氏囊指數(shù)顯著高于其他組(P＜0.05)，胸腺質(zhì)量較正常組高5.2g，超過(guò)正常組胸腺質(zhì)量的86.7%，胸腺指數(shù)較正常組高1.53mg/g，超過(guò)正常組胸腺指數(shù)的60.5%;脾質(zhì)量較正常組多1.7g，超過(guò)正常組脾質(zhì)量的94.4%，脾指數(shù)較正常組高0.51mg/g，超過(guò)正常組脾指數(shù)的68.0%;法氏囊質(zhì)量較正常組高1.4g，超過(guò)正常組法氏囊質(zhì)量的140.0%，法氏囊指數(shù)較正常組高0.44mg/g，超過(guò)正常組法氏囊指數(shù)的104.8%，同時(shí)，中劑量組肉雞的生長(zhǎng)較快和病死率較低等生產(chǎn)指標(biāo)最好;正常飼料的Ⅰ組的免疫指數(shù)最低，黃霉素藥物添加的Ⅱ組也在一定程度上刺激免疫功能。【表6略】2.3肝功能指標(biāo)從表7可見(jiàn):中草藥飼料添加劑可極顯著提高血清蛋白水平，表現(xiàn)為提高TP、ALB和GLO含量，且隨著添加量的逐步增加而明顯增加(P＜0.01)。華而不實(shí)，3個(gè)中草藥添加組血清TP含量平均為33.53g/L，較正常組提高1.83g/L，提高了5.8%;ALB含量平均為12.52g/L，較正常組提高0.42g/L，提高了3.4%。【表略】ALT和AST代表肝細(xì)胞的受損程度，與I、III、IV和V組相比II組能提高血清中AST(P＜0.01)水平，證實(shí)在肉雞全價(jià)飼料中添加120mg/kg劑量的黃霉素能造成肝的稍微損傷，講明在肉雞生長(zhǎng)迅速和肝代謝負(fù)擔(dān)加重的情況下，添加化學(xué)藥物對(duì)肝功能具有損傷作用;添加中草藥各組的ALT和AST水平低于正常對(duì)照組(P＞0.05)，講明中草藥添加劑對(duì)肉雞肝具有一定的保衛(wèi)功能。2.4脂肪代謝的指標(biāo)檢測(cè)血清中TG、TC、LDLC和HDLC的水平，以觀察中草藥飼料添加劑對(duì)肉雞脂肪代謝的影響。肉雞養(yǎng)殖具有生長(zhǎng)快和生產(chǎn)周期短的特點(diǎn)，同時(shí)，肉雞的快速生長(zhǎng)也使得肉雞易出現(xiàn)肝腹水和胸囊腫等多種疾病。因此，添加促進(jìn)蛋白和脂肪代謝以及保衛(wèi)肝功能的中草藥添加劑，對(duì)肉雞養(yǎng)殖具有重要的作用。飼料添加中草藥后，對(duì)肉雞血清中TG、TC和LDLC含量有不同程度的影響，能促進(jìn)HDLC結(jié)合體內(nèi)多余血脂，轉(zhuǎn)運(yùn)并去除血液垃圾;以Ⅳ組與I組相比降低TG、TC和LDLC分別為0.11、0.68和0.22mol/L，降低了29.7%、18.5%和28.6%，而提高HDLC0.41mol/L，提高了16.4%。2.5抗氧化指標(biāo)以試劑盒檢測(cè)血清中T－AOC、T－SOD和GSH的水平，以檢測(cè)中草藥飼料添加劑對(duì)肉雞抗氧化能力的影響。從表9可見(jiàn):Ⅳ組能極顯著地提高血清中T－AOC能力(P＜0.01)和T－SOD的水平(P＜0.01)，也具有提高GSH水平的趨勢(shì)(P＞0.05)。與正常組相比，提高T－AOC和T－SOD分別為8.06和9.15mol/L，提高了68.2%和23.0%;黃霉素添加組的T－AOC和T－SOD最低，能夠看出中草藥飼料添加劑比化學(xué)藥物添加劑對(duì)肉雞機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的抗氧化作用，這與邢廣林和馬得瑩的研究結(jié)論類似。3討論肉雞生產(chǎn)企業(yè)多以大規(guī)模集約化的飼養(yǎng)模型進(jìn)行肉雞飼養(yǎng)，飼養(yǎng)密度過(guò)大、室內(nèi)空氣容易污濁、溫度高、濕度大且衛(wèi)生環(huán)境惡劣，易使肉雞生長(zhǎng)發(fā)育不整潔和免疫力遭到抑制，導(dǎo)致多種疾病感染，病死率上升。課題組配伍研制的具有預(yù)防和治療效果的中草藥抗病添加劑，主要由金銀花、板藍(lán)根、蒲公英、黃連、淡竹葉、穿心蓮、玄參、生地、麻黃和甘草等10多味清熱解毒中草藥配合而成，華而不實(shí)含有多種有效活性成分，如多糖、黃酮類、甙類、生物堿和有機(jī)酸等，針對(duì)多種致病因素和途徑，發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，多環(huán)節(jié)、多層次及多靶點(diǎn)地全方位抵御疾病，提高機(jī)體的抗病能力。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物試驗(yàn)和青島動(dòng)物檢疫研究所攻毒試驗(yàn)和臨床治療等多方面驗(yàn)證，該添加劑對(duì)多種禽類疾病具有高效防控效果。肉雞具有生長(zhǎng)快和飼養(yǎng)周期短的特點(diǎn)，其肌肉的生長(zhǎng)速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于內(nèi)臟的生長(zhǎng)發(fā)育，尤其是心臟、肝和肺的發(fā)育延遲緩慢于肌肉，經(jīng)常導(dǎo)致多種代償性疾病的發(fā)生，如肝腹水、胸囊腫和腿骨變形等;同時(shí)，快的生長(zhǎng)率和高的營(yíng)養(yǎng)代謝水平，使得機(jī)體連續(xù)不斷地產(chǎn)生自由基，自由基的消除主要依靠于機(jī)體完好的抗氧化防御系統(tǒng)，即SOD、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽復(fù)原酶等酶類和非酶類抗自由基物質(zhì)，不斷地去除自由基使機(jī)體免受損害。中草藥添加劑含有多種生物活性物質(zhì)和抗氧化成分，通過(guò)驅(qū)邪扶正調(diào)整機(jī)體的失衡狀態(tài)，能夠起到健脾理氣、幫助消化吸收、加強(qiáng)新陳代謝、提高機(jī)體免疫能力和抗氧化的作用。從綠色原生態(tài)可持續(xù)發(fā)展農(nóng)業(yè)的角度來(lái)看，中草藥飼料添加劑的開(kāi)發(fā)和研究具有廣闊的前景。在當(dāng)前疾病冗雜多發(fā)的情況下，中草藥多種有效成分的互相作用、多環(huán)節(jié)、多臟器、多靶點(diǎn)和多途徑地發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)作用，可有效地防控疾病發(fā)生、提高機(jī)體的免疫和抵抗能力，這是當(dāng)代西醫(yī)藥治療無(wú)法到達(dá)的;適量的中草藥添加劑，不僅能提供生物活性成分，同時(shí)，可增加植物性營(yíng)養(yǎng)，增加風(fēng)味物質(zhì)沉積，顯現(xiàn)出原始自然的飼養(yǎng)效果，提高產(chǎn)品品質(zhì)并凈化生態(tài)環(huán)境。4結(jié)論中草藥飼料添加劑CHA－PT，能提高機(jī)體的免疫能力，通過(guò)促進(jìn)脂肪代謝，提高機(jī)體抗氧化作用，保衛(wèi)肝功能，提高機(jī)體的生長(zhǎng)能力。以下為參考文獻(xiàn)［1］陳倩．(綠色食品畜禽飼料及飼料添加劑使用準(zhǔn)則〕標(biāo)準(zhǔn)解讀［J］．中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化，2018(12):57－59．［2］陳雁南，羅有文