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血細(xì)胞分析復(fù)檢規(guī)則及操作流程五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀器復(fù)檢規(guī)則制定的原則●根據(jù)該儀器對(duì)細(xì)胞形態(tài)的識(shí)別能力?!駨?fù)檢規(guī)則涉及的參數(shù)該儀器均能提供?!駨?fù)檢范圍應(yīng)涵蓋儀器的所有參數(shù)及形態(tài)學(xué)特征?!裨诖_保病理細(xì)胞不漏檢、保證篩選質(zhì)量的基礎(chǔ)上盡量降低復(fù)檢率,使患者能在較短的時(shí)間內(nèi)獲得正確的檢驗(yàn)報(bào)告?!窦訇幮允侵贫◤?fù)檢規(guī)則的關(guān)鍵參數(shù),具有診斷意義的重要參數(shù)不能出現(xiàn)假陰性,其他參數(shù)的假陰性率應(yīng)〈5%。●在較低假陰性率的前提下降低假陽(yáng)性率,假陽(yáng)性率過高會(huì)增加工作量,延遲報(bào)告發(fā)放時(shí)間?!癜籽』颊呒芭R床醫(yī)生提出閱片需求的樣本必須鏡檢。復(fù)檢規(guī)則制定的依據(jù)●根據(jù)2005年國(guó)際血液學(xué)復(fù)檢專家組推薦的41條自動(dòng)血細(xì)胞分析和分類復(fù)檢規(guī)則?!窀鶕?jù)本實(shí)驗(yàn)室的具體情況及SysmexXE-2100的性能特點(diǎn),參考國(guó)際41條復(fù)檢規(guī)則,制定了適合本實(shí)驗(yàn)室的17條顯微鏡復(fù)檢規(guī)則。○與全血細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)的規(guī)則○1.WBC:<2.5或>30.0×109/L(首次結(jié)果)○2.PLT:〈50或>500×109/L(首次結(jié)果,且直方圖異常)○3.HGB:〈60或>200g/L○4.MCV:〈60fl或>120fl(首次結(jié)果)○5.MCHC:>380○6.RDW-CV:>22%(首次結(jié)果)○與白細(xì)胞分類相關(guān)的規(guī)則○1.無(wú)DC結(jié)果或DC結(jié)果不全○2.Mono>15%(首次結(jié)果)○3.Lymph>60%(首次結(jié)果,兒童除外)○4.Eos>20%(首次結(jié)果)○5.Baso>3%(首次結(jié)果)●根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的具體情況及SysmexXE-2100的性能特點(diǎn),參考國(guó)際41條復(fù)檢規(guī)則,制定了適合本實(shí)驗(yàn)室的17條顯微鏡復(fù)檢規(guī)則?!鹋c儀器報(bào)警信息相關(guān)的規(guī)則○1.RBC直方圖出現(xiàn)雙峰或多峰○2.提示NRBC○3.幼稚細(xì)胞報(bào)警○4.原始細(xì)胞報(bào)警○5.異型淋巴細(xì)胞報(bào)警○6.明確為血液病或服務(wù)對(duì)象要求分片復(fù)檢規(guī)則的驗(yàn)證●儀器操作及結(jié)果判斷由1名有經(jīng)驗(yàn)的主管技師負(fù)責(zé)●涂片和染色由1名技師完成,鏡下檢查分別由另外8名高年資主管技師負(fù)責(zé),進(jìn)行雙盲檢驗(yàn)統(tǒng)一人工顯微鏡復(fù)檢的內(nèi)容○選擇500份標(biāo)本,每份標(biāo)本制備1張血涂片○WBC分類計(jì)數(shù):每人每張血涂片分類200個(gè),并觀察形態(tài)○WBC和PLT數(shù)量估計(jì)○RBC及PLT的大小、形態(tài)○有無(wú)巨大PLT及PLT聚集○有無(wú)有核RBC及血液寄生蟲陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)●儀器陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)儀器檢測(cè)結(jié)果符合17條顯微鏡復(fù)檢規(guī)則中任一條即為陽(yáng)性●鏡檢陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)內(nèi)血液學(xué)復(fù)檢專家小組將國(guó)際制定的12條鏡檢陽(yáng)性規(guī)則進(jìn)一步量化,內(nèi)容包括:1.RBC明顯大小不均(大小相差一倍以上),中空淡染(大于1/2淡染區(qū)的RBC>30%)2.巨大PLT>15%3.見到PLT聚集4.有小體的粒細(xì)胞>10%5.有中毒顆粒的中性粒細(xì)胞>10%6.空泡變性粒細(xì)胞>10%7.原始和幼稚細(xì)胞≥1%8.早幼和中幼粒細(xì)胞≥1%9.晚幼粒細(xì)胞>2%10.異型淋巴細(xì)胞>5%11.NRBC≥1%12.漿細(xì)胞≥1%○鏡檢結(jié)果符合上述12條中任何一條即為陽(yáng)性一、WBC,RBC,HGB,PLT無(wú)結(jié)果觀察樣本量少?抗凝劑錯(cuò)?小凝塊?是退還樣本否混勻后復(fù)測(cè)通過終止無(wú)結(jié)果換儀器檢測(cè)或者更換檢測(cè)方法學(xué)二、WBC,RBC,HGB,PLT超出線性稀釋樣本后復(fù)測(cè),只使用復(fù)測(cè)結(jié)果中的(上述四項(xiàng)結(jié)果之一×稀釋倍數(shù))其他項(xiàng)目結(jié)果使用初次的檢測(cè)結(jié)果例如:初次檢測(cè)中WBC為500,超出線性,其他項(xiàng)目結(jié)果正常稀釋4倍后,檢測(cè)WBC為105。最終報(bào)告結(jié)果WBC為105*4=420,其他結(jié)果仍然沿用初次的檢測(cè)結(jié)果三、WBC,RBC,HGB,PLT周內(nèi)△>30%謹(jǐn)慎使用這條規(guī)則RBC,HGB周內(nèi)波動(dòng)>30%儀器吸血量不足標(biāo)本弄錯(cuò)與病情相符WBC,PLT周內(nèi)波動(dòng)>30%WBC,PLT數(shù)值極低時(shí)忽略WBC,PLT數(shù)值正?;蛟龈邥r(shí)復(fù)檢或復(fù)片無(wú)需記錄需填記錄表記錄并重測(cè)記錄但無(wú)需重測(cè)四、WBC首次檢測(cè)>30或<3WBC>30復(fù)片,分類100個(gè)WBCWBC<3復(fù)片未見異常細(xì)胞報(bào)告可見異常細(xì)胞分類100個(gè)WBC并報(bào)出異常細(xì)胞的比例,有能力的情況下報(bào)告異常細(xì)胞的種類和做簡(jiǎn)要的形態(tài)描敘,必要時(shí)打電話通知臨床注:異常細(xì)胞包括“原始細(xì)胞、異淋、幼稚淋巴、惡性淋巴瘤細(xì)胞、漿細(xì)胞或多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞、幼稚紅細(xì)胞、幼稚粒細(xì)胞、幼稚單核、小巨核細(xì)胞、噬血細(xì)胞、轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞等”五、PLT首次檢測(cè)<50或>1000PLT>1000復(fù)片,大致估算一下血小板PLT<50復(fù)片,并大致估算血小板相符,未見聚集報(bào)告可見聚集1、少量聚集:備注”血小板可見少量聚集,結(jié)果僅供參考。2、大量聚集:退還樣本相符報(bào)告不相符復(fù)測(cè),或者改變檢測(cè)方法學(xué)注:估算血小板方法:平均油鏡視野數(shù)×6見較多大血小板換光學(xué)通道復(fù)測(cè)六、HGB首次檢測(cè)<70或>200HGB>200檢查血樣血凝?血稠?脂血?HGB<70無(wú)異常直接報(bào)告或復(fù)測(cè)退還臨床無(wú)異常復(fù)測(cè)血凝退還樣本脂血血漿置換檢查血樣血凝?血少?血稀?血凝或血少七、MCV首次檢測(cè)<75或>105MCV首次檢測(cè)<75或>105檢查血樣新鮮,血量足復(fù)片退還樣本或重測(cè)不新鮮,或者血量不足RBC形態(tài)大小不均,淡染區(qū)擴(kuò)大,易見小或大RBC描述報(bào)告未見異常復(fù)測(cè)并尋找原因八、MCHC<300,且MCV>80MCHC<300,且MCV>80檢查血樣血樣無(wú)污染檢查儀器試劑或者儀器狀態(tài)退還樣本血樣污染試劑污染儀器狀態(tài)不穩(wěn)更換試劑或調(diào)整儀器后復(fù)測(cè)未見異常追蹤采血時(shí)有無(wú)輸液注:同時(shí)滿足MCHC<300,且MCV>80兩個(gè)條件,最常見原因是輸液時(shí)采血,輸液時(shí)對(duì)機(jī)體的RBC與HGB影響是同步的,但對(duì)HCT的影響要比較小.MCV=HCT/RBCMCHC=HGB/HCTMCH=HGB/RBC有輸液稀釋重新采血九、MCHC>380MCHC>380檢查血樣脂血?溶血?血漿置換脂血否復(fù)片觀察是否存在球形RBC注:脂血導(dǎo)致HGB假性增高,溶血導(dǎo)致HCT假性減低,冷凝集導(dǎo)致RBC假性減低,均可引起MCHC的假性增高。而血液中存在球形RBC是導(dǎo)致MCHC增高的真實(shí)病理因素。溶血退還MCHC=HGB/HCT九、MCV↑MCH↑MCHC-MCHC>380檢查血樣冷凝集?否復(fù)片觀察是否存在許多大RBC溫育,解聚后重測(cè)注:冷凝集導(dǎo)致MCV假性增高,而RBC假性減低,也會(huì)導(dǎo)致MCH假性增高。而血液中存在真正的大RBC才是導(dǎo)致MCV和MCH增高的真實(shí)病理因素。MCV=HCT/RBCMCHC=HGB/HCTMCH=HGB/RBC是十、白細(xì)胞分類不全高度提示可能存在儀器無(wú)法識(shí)別的原始幼稚細(xì)胞復(fù)片,分類100個(gè)WBC,盡量明確指出異常細(xì)胞的比例和類別十一、NEUT#首次檢測(cè)<1或>20NEUT#>20復(fù)片,分類100個(gè)WBC并盡量找出異常細(xì)胞NEUT#<1復(fù)片,盡量找出異常細(xì)胞未見異常細(xì)胞直接報(bào)告可見異常細(xì)胞建議盡量分類計(jì)數(shù)50個(gè)WBC,并算出異常細(xì)胞百分比報(bào)告注:異常細(xì)胞包括“原始細(xì)胞、異淋、幼稚淋巴、惡性淋巴瘤細(xì)胞、漿細(xì)胞或多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞、幼稚紅細(xì)胞、幼稚粒細(xì)胞、幼稚單核、小巨核細(xì)胞、噬血細(xì)胞、轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞等”十三、LYMPH#首次檢測(cè)>5(成人)或>7(兒童)LYMPH#檢測(cè)>5(成人)或>7(兒童)復(fù)片,分類100個(gè)WBC觀察有無(wú)幼稚淋巴細(xì)胞,異型淋巴細(xì)胞盡量分清是病毒感染還是淋巴系統(tǒng)的惡性增殖引起的淋巴細(xì)胞絕對(duì)值增高十四、MONO#首次檢測(cè)>1.5(成人)或>3(兒童)MONO#檢測(cè)>1.5(成人)或>3(兒童)相對(duì)三分類要較為準(zhǔn)確,復(fù)片分類100個(gè)WBC,盡量分出異常細(xì)胞的比例三分類儀器高度提示存在幼稚細(xì)胞復(fù)片,分類100個(gè)WBC留心尋找異常原始幼稚細(xì)胞并分出比例五分類儀器注:三分類儀器實(shí)為三分群,其中報(bào)告的單核細(xì)胞群其實(shí)為中間細(xì)胞群,也就注定導(dǎo)致單核細(xì)胞比例增高為假性增高,更多可能為其他幼稚細(xì)胞類。五分類儀器分類相對(duì)較準(zhǔn),但要注意cdsapphire型儀器對(duì)所有類型的細(xì)胞都會(huì)強(qiáng)制性給出一個(gè)五分類比例,而幼稚細(xì)胞類往往容易歸類于單核細(xì)胞類中,所以當(dāng)這類型號(hào)儀器結(jié)果單核比例增高時(shí),強(qiáng)烈提示存在幼稚細(xì)胞,應(yīng)引起高度注意。十五、EOS#首次檢測(cè)>2EOS#檢測(cè)>2復(fù)片,分類100個(gè)WBC報(bào)告比例,確認(rèn)是否嗜酸性粒細(xì)胞比例增高,并努力尋找異常細(xì)胞十六、BASO#首次檢測(cè)>0.5BASO#檢測(cè)>0.5復(fù)片,分類100個(gè)WBC報(bào)告比例,確認(rèn)是否嗜堿性粒細(xì)胞比例增高,并努力尋找異常細(xì)胞十七、WBC旗標(biāo)出現(xiàn)BLAST WBC旗標(biāo)出現(xiàn)BLAST復(fù)片,分類100個(gè)WBC報(bào)告比例,確認(rèn)是否存在原始幼稚細(xì)胞,并努力尋找十八、RBC旗標(biāo)出現(xiàn)NRBC RBC旗標(biāo)出現(xiàn)NRBC復(fù)片,觀察有無(wú)有核紅細(xì)胞如有則分類計(jì)數(shù)、校正白細(xì)胞計(jì)數(shù)值復(fù)片,觀察有無(wú)NRBC因儀器有自動(dòng)校正功能,無(wú)需校正白細(xì)胞計(jì)數(shù)值Sysmex系列cd3700cdsapphire十九、RBC旗標(biāo)出現(xiàn)rstRBC CD-SAPPHIRERBC旗標(biāo)出現(xiàn)rstRBC換難溶通道復(fù)測(cè),直到不出現(xiàn)rstRBC旗標(biāo)為止并注意與前次結(jié)果相比,淋巴細(xì)胞比例是否降下來?二十、PLT旗標(biāo)出現(xiàn)PLT-clump PLT旗標(biāo)出現(xiàn)PLT-clump(聚集)復(fù)片檢查樣本標(biāo)本凝集退還標(biāo)本無(wú)凝集未發(fā)現(xiàn)PLT聚集直接報(bào)告發(fā)現(xiàn)PLT聚集住院部標(biāo)本,報(bào)告“鏡下可見PLT

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