微生物限度檢查方法適用性試驗課件

微生物限度檢查方法適用性試驗方案PAGEPAGE10驗證方案組織與實施組，參與實施。部門/職務(wù)簽部門/職務(wù)簽名日期質(zhì)量管理部QC部門/職務(wù)簽部門/職務(wù)簽名日期質(zhì)量管理部QC經(jīng)理部門/職務(wù)批準(zhǔn)人部門/職務(wù)批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期質(zhì)量管理部質(zhì)量總監(jiān)目 錄一、概述二、驗證目的和風(fēng)險評估三、驗證內(nèi)容四、方法判定六、參考文獻(xiàn)七、結(jié)果評價及結(jié)論1、概述：母菌計數(shù)方法的適用性試驗和控制菌檢查方法的適用性試驗，以確認(rèn)所采用的方法適合于該產(chǎn)品的需氧菌、霉菌和酵母菌數(shù)的測定和控制菌檢查。由于依照中國藥典2010版的檢查方法驗證,需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌均采用平皿法。故現(xiàn)升級為中國藥典2015版，需氧菌、霉菌和酵母菌及控制菌均采用平皿法進(jìn)行方法適用性試驗。2、試驗?zāi)康暮惋L(fēng)險評估：物限度檢查。風(fēng)險評估：項目未按方案執(zhí)行試驗過程操作不當(dāng)3、驗證內(nèi)容：

潛在失效模式試驗部分項目出現(xiàn)偏差和漂移未達(dá)到試驗標(biāo)準(zhǔn)

失效影響正確性試驗失敗

采取措施嚴(yán)格執(zhí)行經(jīng)批準(zhǔn)的試驗方案未嚴(yán)格遵循試驗方案規(guī)定品名批號規(guī)格來源胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基無菌檢查和微生物限度檢查用中檢所沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所麥康凱瓊脂培養(yǎng)基微生物限度檢查用中檢所麥康凱液體培養(yǎng)基確認(rèn)人：微生物限度檢查用確認(rèn)日期：中檢所培養(yǎng)基名稱配制方法培養(yǎng)基名稱配制方法PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液取本品14.63g，加水1000ml，加熱溶解，分裝，121℃，15分鐘滅菌，備用。胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基40g1000ml，加熱溶解，分裝沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基65.0g1000ml，加熱溶解，分裝胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基29.8g1000ml，加熱溶解，分裝沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基30.0g1000ml，加熱溶解，分裝麥康凱瓊脂培養(yǎng)基50.0g1000ml，加熱溶解，分裝麥康凱液體培養(yǎng)基35.01000ml，加熱溶解，分裝確認(rèn)人： 確認(rèn)日期：名稱型號名稱型號校驗單位有效期至生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱確認(rèn): 確認(rèn)日期：、驗證試驗用菌種：菌種名稱代號傳代代數(shù)來源金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003中檢所大腸埃希菌CMCC（B）44102中檢所銅綠假單胞菌CMCC（B）10104中檢所枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501中檢所白色念珠菌CMCC（F）98001中檢所黑曲霉菌CMCC（F）98003中檢所確認(rèn)人：確認(rèn)日期：試驗方法：取供試品10 g加PH7.0氯化蛋白胨緩沖液至100ml→1:10供試液。需氧菌、霉菌和酵母菌控制菌采用常規(guī)法。菌液的制備：取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的胰酪大豆胨瓊脂斜面培物一鉑金餌，加入胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中置30～3518～24h1ml加入9ml0.910-11010～71ml20ml各菌懸液平行制備兩個平皿，平皿法培養(yǎng)計數(shù)，取小于100CFU/ml和1000CFU/ml的菌液備用。取白色念珠菌的沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)物，加入沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中置20～2524～48h1ml9ml0.910-1的菌液，依法1010～7，1ml注入平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基25ml液平行制備兩個平皿，平皿法培養(yǎng)計數(shù)，取小于100CFU/ml和1000CFU/ml的菌液備用。5-73-5ml0.05%聚800.9%1ml0.05%809ml0.9%10-11010～71ml25ml100CFU/ml1000CFU/ml的菌液備用。需氧菌、霉菌和酵母菌計數(shù)方法適用性試驗：供試液制備：取供試品10（ml或c2，加PH7.0100m1:10供試液。實驗條件：需氧菌培養(yǎng)溫度3～5天 培養(yǎng)箱：霉菌和酵母菌培養(yǎng)溫度5～7天 培養(yǎng)箱：試驗方法：試驗組：0.1ml1000CFU的銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯1ml45℃20ml30～35℃320.1ml1000CFU白色念珠菌、黑曲霉菌液，混勻后分別1ml45℃20ml30～35℃521ml45℃的沙氏葡萄20ml20～25℃529.9ml0.1ml1000CFU的菌液，按試驗組操作,傾注溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，置與試驗組相同條件下培養(yǎng),計數(shù)。每株試驗菌平行制備2個平皿。供試品對照組：取供試液1ml，傾注溫度不超過45℃2實驗結(jié)果范圍內(nèi)。比值=試驗組菌落數(shù)～供試品對照組的菌落數(shù)*對照組菌落數(shù)需氧菌計數(shù)方法適用性試驗結(jié)果供試品菌種類型試驗組菌液組比值對照組供試品菌種類型試驗組菌液組比值對照組銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期：供試品菌種類型試驗組菌液組比值對照組供試品菌種類型試驗組菌液組比值對照組銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期：試驗次數(shù)供試品批:供試品菌種類型 試驗組 菌液組對照組比值銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉檢驗人：日期：復(fù)核人：日期：3.7.4.3霉菌和酵母菌計數(shù)方法適用性試驗結(jié)果試驗次數(shù)供試品批:供試品菌種類型 試驗組 菌液組對照組比值白色念珠菌黑曲霉檢驗人：日期：復(fù)核人：日期：試驗次數(shù)供試品批:供試品供試品菌種類型試驗組菌液組比值對照組白色念珠菌黑曲霉檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期供試品菌種類型試驗組菌液組比值對照組供試品菌種類型試驗組菌液組比值對照組白色念珠菌黑曲霉檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期結(jié)論:檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期：控制菌微生物檢測方法適用性試驗：實驗方法：10ml100cfu培養(yǎng)18-24小時,取上述培養(yǎng)物1ml100ml24-4830～35℃18-72小時。試驗組應(yīng)生長良好。10ml,加入胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，置30～35℃18-24對照應(yīng)無菌生長。100cfu大腸埃希菌菌液加入胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，置30～35℃培養(yǎng)18-24小時,取上述培養(yǎng)物1ml接種至100ml麥康凱液體培養(yǎng)基中，42～44℃培養(yǎng)24-48小時。取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上30～35℃培養(yǎng)18-72小時。陽性對照組應(yīng)生長良好。3.8.2實驗結(jié)果：試驗次數(shù)：1供試品批號:控制菌項目常規(guī)法試驗組大腸埃希菌陽性對照組陰性對照組檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期：試驗次數(shù)：2供試品批號:控制菌項目常規(guī)法試驗組大腸埃希菌陽性對照組陰性對照組檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期：控制菌項目常規(guī)法試驗組大腸埃希菌陽性對照組控制菌項目常規(guī)法試驗組大腸埃希菌陽性對照組陰性對照組3.8.3結(jié)論：檢驗人： 日期：復(fù)核人： 日期：