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動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)E課后?提能達(dá)—M地點(diǎn)練一綠提能力練規(guī)日一、選擇題.關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,錯誤的是( )A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B.所取的組織需用胰蛋白酶等處理使其分散成單個細(xì)胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離,制成懸浮液D.動物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右,所培養(yǎng)的細(xì)胞都會衰老死亡解析:選D動物細(xì)胞培養(yǎng)傳至50代左右,若細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),就能在適宜培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去。.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的敘述,錯誤的是 ( )A.可用于檢測某種物質(zhì)的毒性B.可通過培養(yǎng)各種病變細(xì)胞,用于藥理等方面的研究C.可通過動物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素等D.經(jīng)過脫分化、再分化,可構(gòu)建人造皮膚解析:選D動物細(xì)胞培養(yǎng)沒有脫分化與再分化過程。.下列關(guān)于哺乳動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物的敘述,正確的是 ( )A.體細(xì)胞核移植過程中通常用卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞B.目前科學(xué)家可以用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動物個體C.利用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)可有選擇地繁殖某一性別的家畜D.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代 50代以內(nèi)的細(xì)胞解析:選C體細(xì)胞核移植過程中常用減n中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞, A錯;動物體細(xì)胞的全能性受到限制,不能經(jīng)過培養(yǎng)獲得動物個體, B錯;克隆動物細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)來自供體細(xì)胞,其性別與提供細(xì)胞核的動物一致,因此可有選擇地克隆某一性別的家畜,C對;用于核移植的供體細(xì)胞一般是10代以內(nèi)的細(xì)胞,D錯。.下列有關(guān)體細(xì)胞核移植技術(shù)的說法,不正確的是 ( )A.體細(xì)胞核移植技術(shù)在多種動物中獲得了成功,成功率非常高B.克隆技術(shù)的各個環(huán)節(jié)有待于進(jìn)一步改進(jìn)C.大多數(shù)克隆動物還存在一些遺傳和生理缺陷類的健康問題D.克隆動物食品的安全性問題仍然存在爭議解析:選A由于體細(xì)胞核移植技術(shù)是一項(xiàng)新的技術(shù),成功率并不高,有許多問題仍待解決。.下圖是某克隆羊的培育過程模式圖,則與獲得該克隆羊接近的生殖方式和其發(fā)育成熟時所分泌的主要性激素分別是 (A.無性生殖;雄性激素C.有性生殖;雄性激素WC系于官某克卵細(xì)胞A.無性生殖;雄性激素C.有性生殖;雄性激素WC系于官某克卵細(xì)胞B.無性生殖;雌性激素D.有性生殖;雌性激素解析:選A克隆羊的產(chǎn)生屬于無性生殖;由于此過程是雄性羊供核,故得到的克隆羊?yàn)樾坌?,所分泌的性激素是雄性激素?動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,不能從該圖獲得的結(jié)論是 ( )嗎&數(shù) 痛細(xì)胞{有血清)癌細(xì)胞(無血清)—正紫珈魅I存血清)小 正常細(xì)型無■消)壯 培養(yǎng)一間血齒時正常細(xì)胞和隔卿胞培葬的影響A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響較大C.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大解析:選A分析圖中曲線可知,對癌細(xì)胞來說,相同的培養(yǎng)時間內(nèi),培養(yǎng)基中有無血清,其細(xì)胞數(shù)目相差不大,說明培養(yǎng)基中有無血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大; 對正常細(xì)胞來說,在相同的培養(yǎng)時間內(nèi),有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于沒有血清的培養(yǎng)基中B、B、CD正確;在相同條件和相同的培養(yǎng)時間內(nèi),癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的數(shù)目差距較大, 正常細(xì)胞達(dá)到一定的數(shù)目后不再增加,而癌細(xì)胞卻能不斷增加, A錯誤。.在將動物組織塊分散成單個細(xì)胞時,可以使用胰蛋白酶。由此判斷以下推測不合理的是( )A.動物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系.處理時一定要注意處理時間、加酶量C.胰蛋白酶一定不會對動物細(xì)胞造成損傷D.動物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜 pH基本一致解析:選C胰蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解,破壞了動物細(xì)胞之間的聯(lián)系,可推測動物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系, A正確;細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì)成分,所以一定要注意處理的時間和酶的用量,以防止對動物細(xì)胞造成損傷, B正確,C錯誤;酶促反應(yīng)需要適宜的pH,所以培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致,D正確。8.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是 ( )A.細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中B.傳代培養(yǎng)時需要用胃蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞C.癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)時不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.50代以內(nèi)的細(xì)胞均能保持細(xì)胞正常的二倍體核型解析:選C細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生在傳代培養(yǎng)中, A錯;胃蛋白酶的最適pH大約為TOC\o"1-5"\h\z2,而細(xì)胞培養(yǎng)時pH一般為7.2?7.4,所以一般用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶處理細(xì)胞, B錯;癌細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象, C對;10代以內(nèi)的細(xì)胞可以保持正常的二倍體核型, D錯。9.對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),下列說法錯誤的是 ( )A.在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO勺恒溫培養(yǎng)有f中進(jìn)行,CO的作用是刺激細(xì)胞呼吸C.為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D.在合成培養(yǎng)基中,通常需加入血清、血漿等天然成分解析:選 B在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,以分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),得到單個細(xì)胞, A正確;細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO勺恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO的作用是維持培養(yǎng)液的pH,B錯誤;為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染,要求對培養(yǎng)液進(jìn)行消毒、滅菌,也可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素, C正確;合成培養(yǎng)基通常需加入血清、血漿等天然成分, D正確。10.把成年三倍體鯽魚的腎臟細(xì)胞核移植到二倍體鯽魚的去核卵細(xì)胞內(nèi), 培養(yǎng)并獲得的克隆魚是 ( )A.是二倍體B.是有性生殖的產(chǎn)物C.高度不育D.性狀與三倍體鯽魚完全相同解析:選C克隆魚的核遺傳物質(zhì)都來自三倍體鯽魚, 因此克隆魚屬于三倍體, A錯誤;克隆魚的產(chǎn)生主要采用了核移植和胚胎移植技術(shù),屬于無性生殖的產(chǎn)物, B錯誤;該克隆魚是三倍體,在減數(shù)分裂聯(lián)會時發(fā)生紊亂, 不能產(chǎn)生正常的生殖細(xì)胞,所以高度不育,C正確;該克隆魚的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來自三倍體鯽魚, 而細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自二倍體鯽魚, 因此其性狀與三倍體鯽魚相似,但不完全相同, D錯誤。11.關(guān)于哺乳動物細(xì)胞體外培養(yǎng)的難易程度,下列表述正確的是A.乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞,胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞B.乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞,胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞C.乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞,脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞D.乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞,脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞解析:選 A乳腺癌細(xì)胞能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖,乳腺細(xì)胞不能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖, 所以乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞; 胚胎細(xì)胞全能性較高, 脂肪細(xì)胞已經(jīng)高度分化,全能性低,所以胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞。12.核移植的受體細(xì)胞是MH期卵母細(xì)胞,下列有關(guān)說法錯誤的是 ( )A.MH期卵母細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)b.MH期卵母細(xì)胞體積比較大操作起來相對容易C.可以把供體細(xì)胞直接注入去核的卵母細(xì)胞中d.MH期卵母細(xì)胞對克隆動物的遺傳特性沒有任何影響解析:選 D直接把供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中也是可以的,并且這樣可以減少對細(xì)胞核的損傷,更有利于重組細(xì)胞的分裂; MH期卵母細(xì)胞提供了線粒體,所含的基因仍然能夠控制一些性狀,所以克隆動物并不是 100%的供體動物的復(fù)制。二、非選擇題某研究小組進(jìn)行藥物實(shí)驗(yàn)時, 以動物肝細(xì)胞為材料, 測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種,甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞,乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時間后,觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量 。在動物細(xì)胞培養(yǎng)時,通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是在兩種細(xì)胞生長過程中,當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時,其生長 。藥物實(shí)驗(yàn)需要大量細(xì)胞, 兩種細(xì)胞頻繁傳代, 甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更 。若用動物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液,需用 消化處理。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的 。已知癌細(xì)胞的 X基因表達(dá)過量與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。要實(shí)驗(yàn)一種抗腫瘤藥物 Y對甲細(xì)胞生長的影響,可將甲細(xì)胞分為AB兩組,A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入,B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水。經(jīng)培養(yǎng)后,從 A、B兩組收集等量細(xì)胞,通過分別檢測X基因在A、B兩組細(xì)胞中的或合成水平的差異,確定Y的藥效。解析:(1)腫瘤細(xì)胞具有無限增殖能力,細(xì)胞周期短,因此相同時間內(nèi),甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞。 (2)動物血清中含有胰島素、生長激素等,能促進(jìn)細(xì)胞的生長和增殖,是天然的培養(yǎng)基。 (3)動物細(xì)胞培養(yǎng)時為了獲得細(xì)胞懸液,需用胰蛋白酶處理組織塊,使組織塊中(4)動物細(xì)胞培養(yǎng)時需要創(chuàng)造無菌的環(huán)境, 因此為了防止細(xì)菌污染,可在培養(yǎng)基中添加抗生素。 (5)設(shè)計(jì)對照實(shí)驗(yàn)需要遵循單一變量原則,因此 A組需要加入藥物Y,可通過檢測基因是否完成轉(zhuǎn)錄和翻譯來確定 Y的藥效。答案:(1)多(2)血清中含有適合動物細(xì)胞生長增殖的各種營養(yǎng)物質(zhì) (3)產(chǎn)生接觸抑制多胰蛋白酶 (4)抗生素 (5)藥物YmRNA蛋白質(zhì)2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道,中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對非人靈長類動物進(jìn)行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。回答下列問題:“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指通過核移植方法獲得的克隆猴, 與核供體相比, 克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目 (填“減半”“加倍”或“不變”)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度 (填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植,其原因是在哺乳動物核移植的過程中,若分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體,通常,所得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目 (填“相同”或“不相同”),性染色體組合 (填“相同”或“不相同” )。解析:(1)核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎, 這個胚胎最后發(fā)育成為動物個體; 通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體,因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和供體一致。 (2)胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植, 其原因是動物胚胎細(xì)胞分化程度低, 恢復(fù)其全能性相對容易。(3)哺乳動物雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞中常染色體相同,性染色體前者是 XX,后者是XY,因此分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體,通常所得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同,性染色體組合不相同。答案:(1)將動物的一個細(xì)胞核,移入一個已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞 不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易 (3)相同不相同15.甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)可能有一定致畸、致癌作用,利用動物細(xì)胞培養(yǎng)的方法鑒定它們是否有毒性,并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果完成下列實(shí)驗(yàn)報(bào)告。(1)實(shí)驗(yàn)步驟:①制備細(xì)胞懸液: 用 處理小白鼠胚胎組織使其離散成單個細(xì)胞, 制成細(xì)胞懸浮液。②進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng):a.取AB、C三個潔凈的錐形瓶,分別加入。b.向A、B兩個培養(yǎng)瓶中分別加入等量的化學(xué)物質(zhì)甲、乙,并將其搖勻; C瓶加等量生理鹽水,作為對照。c.把3個培養(yǎng)并S放在37C的CO培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。③制作臨時裝片。④鏡檢和統(tǒng)計(jì):把臨時裝片放在顯微鏡下, 尋找處于有絲分裂中期的細(xì)胞, 與小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂高倍顯微鏡照片進(jìn)行對比,以確認(rèn)發(fā)生變異的細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:培養(yǎng)瓶ABC變異細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分比1.3%12.5%0.1%(3)請寫出實(shí)
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