實驗二影響酶促反應的因素

關于實驗二影響酶促反應的因素第一頁，共十七頁，2022年，8月28日一、實驗目的1．通過實驗，觀察溫度、pH值、激活劑與抑制劑對酶促反應速度的影響。2．能運用所學的生化知識對實驗結果進行正確的分析。第二頁，共十七頁，2022年，8月28日二、實驗原理利用淀粉及其水解產物的顏色反應，來比較唾液淀粉酶在不同條件下催化淀粉水解的程度，從而判斷溫度、pH、激動劑和抑制劑對酶的活性影響。淀粉糊精麥芽糖和葡萄糖藍色碘紫色→紅色→無色無色碘碘＋＋＋↓↓↓第三頁，共十七頁，2022年，8月28日二、實驗原理在低溫時，酶活性降低，酶促反應速度較慢，甚至停止；隨著溫度升高，酶的活性恢復，反應速度加快；當達到最適溫度時，酶的活性最大，酶促反應速度達到最大。人體內大多數的酶的最適溫度在37℃左右。溫度過高，酶變性失活，酶促反應速度下降，甚至停止。每種酶都有最適的pH值，在最適pH值時，酶的活性最大，酶促反應速度最快；偏離酶的最適pH均可引起酶蛋白變性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最適pH值為6.8。氯離子對唾液淀粉酶有激活作用；銅離子對唾液淀粉酶有抑制作用。第四頁，共十七頁，2022年，8月28日三、實驗材料1.1%淀粉溶液取可溶性淀粉1g,加5ml蒸餾水,調成糊狀,再加80ml蒸餾水,加熱并不斷攪拌,使其充分溶解,放冷,最后用蒸餾水稀釋至100ml。緩沖液取0.2mmol/LNa2HPO4溶液205ml，0.1mol/L檸檬酸溶液795ml,混合即成.緩沖液取0.2mmol/LNa2HPO4溶液772ml，0.1mol/L檸檬酸溶液228ml,混合即成.緩沖液取0.2mmol/LNa2HPO4溶液972ml，0.1mol/L檸檬酸溶液28ml混合即成.第五頁，共十七頁，2022年，8月28日5.0.9%NaCl溶液6.1%CuSO4溶液7.碘液9.試管架11.試管夾12.滴管13.白瓷板14.恒溫水浴箱15.電爐16.燒杯第六頁，共十七頁，2022年，8月28日【注意事項】1.注意實驗器材的干凈，避免雜質影響反應結果2.各管反應時間應嚴格控制，保證一致。第七頁，共十七頁，2022年，8月28日四、實驗方法稀釋唾液制備用水漱口，含蒸餾水咀嚼2分鐘后，把唾液吐進燒杯中備用。（注：唾液淀粉酶活性具有個體差異，按下述各實驗方法進行實驗，有部分同學可能失敗，可重新操作，但在重做過程中，要根據第一次實驗結果改變稀釋唾液的用量，反應太慢，則增加稀釋唾液用量，如果反應太快，則減少稀釋唾液的用量）煮沸唾液的制備取上述唾液約5ml，放入沸水中煮沸5分鐘，取出備用。第八頁，共十七頁，2022年，8月28日（一）溫度對酶促反應速度的影響管號123緩沖液（pH6.8）20滴20滴20滴1%淀粉溶液10滴10滴10滴把三支管溶液搖勻，然后分別放至相應的溫度中水浴預溫預溫溫度0℃37℃37℃預溫5分鐘后取出，繼續(xù)向各管加入相應唾液稀釋唾液10滴10滴—煮沸唾液——10滴把三支管搖勻，然后分別放至相應的溫度中水浴10分鐘，加碘2滴水浴溫度0℃37℃37℃結果與分析第九頁，共十七頁，2022年，8月28日取白瓷板一塊，向各凹分別加1滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，直至與碘不呈色時（即只顯棕黃色時），向各管加碘液1滴，搖勻觀察顏色變化(切記勿搖動)。搖勻再觀察。第十頁，共十七頁，2022年，8月28日（二）pH對酶促反應速度的影響管號1231%淀粉溶液10滴10滴10滴pH5.0緩沖液10滴——pH6.8緩沖液10滴—pH8.0緩沖液——10滴稀釋唾液5滴5滴5滴把三支管搖勻，然后放至37℃水浴10分鐘，加碘2滴搖勻結果與分析第十一頁，共十七頁，2022年，8月28日將各管混勻，放進37℃水浴箱中保溫。取白瓷板一塊，向各凹分別加1滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，直至與碘不呈色時（即只顯棕黃色時），向各管加碘液1滴，搖勻觀察顏色變化。第十二頁，共十七頁，2022年，8月28日（三）激活劑與抑制劑對酶促反應速度的影響管號12341%淀粉溶液10滴10滴10滴10滴pH6.8緩沖液10滴10滴10滴10滴蒸餾水2滴———氯化鈉溶液—2滴——CuSO4溶液——2滴—Na2SO4溶液———2滴稀釋唾液5滴5滴5滴5滴把三支管搖勻，然后放至37℃水浴10分鐘，加碘2滴搖勻結果與分析第十三頁，共十七頁，2022年，8月28日將各管搖勻，放進37℃水浴箱中保溫。取白瓷板一塊，向各凹分別加1滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，直至與碘不呈色時（即只顯棕黃色時），向各管加碘液1滴，搖勻，觀察各管顏色變化。

激活劑與抑制劑第十四頁，共十七頁，2022年，8月28日激活劑與抑制劑五、思考題1.什么是酶的最適溫度？2.什么是酶的最適pH?3.激活劑與抑制劑對酶活性影響實驗中設置第四管的作用是什么？4.什么是酶的特異性？第十五頁，共十七頁，2022年，8月28日（四）酶的專一性對酶促反應的影響。加入物1號管2號管3號管PH值6.8緩沖液20滴20滴20滴1%的淀粉10滴10滴——1%的蔗糖————10滴煮沸唾液——5滴——

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