普通生物學實驗課件植物部分

普通生物學實驗EMAIL:glayertop2@163.comTEL物學部分王建芳Contents1.植物的徒手切片和植物各類組織的觀察2.植物葉脈標本的制作3.葉綠體色素的提取、分離及含量測定4.植物種子活力的快速測定實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察一、植物徒手切片法實驗?zāi)康?/p>

徒手切片的方法是我們從事教學、科研及生產(chǎn)技術(shù)工作中常用的最簡便的觀察植物內(nèi)部構(gòu)造的方法，這種方法不需要復(fù)雜的設(shè)備，又能隨時迅速地觀察植物的生活細胞及各器官內(nèi)部組織的生活狀況和天然的色彩，所以有很大的實用價值。實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察一、植物徒手切片材料與工具芹菜葉柄（長度2~3厘米）、刀片藥品和試劑染色劑實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察一、植物徒手切片方法和步驟（1）切片前，在小培養(yǎng)皿中盛以清水，準備好滴管和刀片等用具和欲切的材料（芹菜葉柄）。（2）切片時用左手的三個指頭拿住材料，并使其稍突出手指之上。右手持刀片，平放在左手的食指之上，刀口向內(nèi)，且與材料斷面平行，然后以均勻的動作，自左前方向右后方滑行切片，注意要用整個手臂向后拉（手腕不必用力）。切下薄片后，將薄片輕輕移入已盛水的培養(yǎng)皿中備用。（3）挑選最薄而透明的切片，取出放在載玻片上，制成臨時裝片觀察，也可制成永久性的玻片標本。實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察一、植物徒手切片實驗注意事項（1）選擇材料時不易太硬也不要太軟。（2）切片時動作要敏捷，材料要一次切下。（3）整個切片過程中應(yīng)用清水濕潤材料和刀面，使之滑潤，否則材料容易破損。實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察二、植物各類組織的觀察實驗介紹種子植物的組織結(jié)構(gòu)按照其發(fā)育特點，可分為兩大類，即分生組織和成熟組織。分生組織細胞在植物的一生中始終具有分裂能力，一方面增加新細胞到植物體中，另一方面使自己永存下去。成熟組織是由分生組織分裂的一些細胞在后來的生長發(fā)育過程中陸續(xù)分化而失去分裂能力，所形成的有特定功能的細胞。按成熟組織的功能又可以分成營養(yǎng)組織、保護組織、輸導(dǎo)組織、機械組織和分泌組織。在不同種植物、植物體不同的器官和植物發(fā)育的不同階段，組織結(jié)構(gòu)有所不同。實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察二、植物各類組織的觀察實驗介紹分生組織：植物根尖頂端有一帽狀的根冠，其內(nèi)圓錐狀的部分染色深，細胞小，細胞核相對較大，細胞質(zhì)較厚，沒有明顯的液泡，無分化，為原分生組織。原分生組織上方略有分化的組織，為初生分生組織，其表面是原表皮，表皮以內(nèi)染色較淡的是基本分生組織，中央染色較深的部位為原形成層。實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察二、植物各類組織的觀察實驗介紹

保護組織：是覆蓋在植物體表面起保護作用的組織，由一層或數(shù)層細胞構(gòu)成，其功能主要是避免水分過度散失，調(diào)節(jié)植物與環(huán)境的氣體交換，抵御外界風雨和病蟲害的侵襲，防止機械的或化學的損傷。根據(jù)其來源和形態(tài)的不同，保護組織又分為表皮（初生保護組織）和周皮（次生保護組織）。保護組織細胞排列整齊，具有保護內(nèi)部柔嫩部分的功能。實驗一植物徒手切片和植物各類組織觀察二、植物各類組織的觀察實驗介紹

輸導(dǎo)組織：是植物體中擔負物質(zhì)長途運輸?shù)闹饕M織，是植物體中最復(fù)雜的系統(tǒng)。根從土壤中吸收的水分和無機鹽，由輸導(dǎo)組織運送到地上部分。葉的光合作用的產(chǎn)物，由輸導(dǎo)組織運送到根、莖、花、果實中去。植物體各部分之間經(jīng)常進行的物質(zhì)的重新分配和轉(zhuǎn)移，也要通過輸導(dǎo)組織來進行。輸導(dǎo)組織分為二類，一類為木質(zhì)部，主要運輸水分和溶解于其中的無機鹽；另一類為韌皮部，主要運輸有機營養(yǎng)物質(zhì)。輸導(dǎo)組織細胞的特點是細胞長形，常上下相連，形成適于輸導(dǎo)的管道。木質(zhì)部有導(dǎo)管，韌皮部有篩管和伴胞。

實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察二、植物各類類組織的觀察察實驗介紹輸導(dǎo)組織植物莖的結(jié)構(gòu)木栓形成層雙子葉植物莖的結(jié)構(gòu)實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察二、植物各類類組織的觀察察實驗介紹輸導(dǎo)組織小麥莖的結(jié)構(gòu)實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察二、植物各類類組織的觀察察實驗介紹厚角組織：厚角組織是植植物機械組織的一類,厚角組織細胞胞最明顯的特特征是細胞壁壁具有不均勻勻的增厚，壁壁的增厚通常常在幾個細胞胞鄰接處的角角隔上特別明明顯，故稱厚厚角組織。厚厚角組織分布布于莖、葉柄柄、葉片、花花柄等部分，，根中一般不不存在。厚角角組織的分布布具有一個明明顯的特征，，即一般總是是分布于器官官的外圍，或或直接在表皮皮下，或與表表皮只隔開幾幾層薄壁細胞胞。在莖和葉葉柄中厚角組組織往往成連連續(xù)的圓筒或或分離成束，，常在具脊狀狀突起的莖和和葉柄中棱的的部分特別發(fā)發(fā)達，例如在在薄荷的方莖莖中，南瓜、、芹菜具棱的的莖和葉柄中中。細胞為長長柱形，相互互重疊排列。。實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察二、植物各類類組織的觀察察實驗介紹分泌組織：分泌組織是由由具有分泌作作用能分泌揮揮發(fā)油、樹脂脂、蜜汁、乳乳汁等的細胞胞所組成。根根據(jù)分泌組織織分布在植物物的體表或植植物的休內(nèi)，，可分為外部部分泌組織和和內(nèi)部分泌組組織兩大類。。

（一））外部分泌泌組織：位于于植物的體表表，其分泌物物直接排出于于體外，其中中有腺毛和蜜腺（二）內(nèi)部分分泌組織：存存在于植物體體內(nèi)，其分泌泌物貯在細胞胞內(nèi)或細胞間間隙中。按其其組成，形狀狀和分泌物的的不同，可分分為：1．分泌細胞胞；2．分泌腔；；3．分泌道；；4．乳汁管。實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察二、植物各類類組織的觀察察實驗?zāi)康哪苷f出植物的的分生組織、、薄壁組織、、保護組織、、輸導(dǎo)組織和和機械組織的的基本形態(tài)結(jié)結(jié)構(gòu)特點，并并能從植物器器官中辨認各各種植物組織織。器材和試劑1.植物材料玉米根尖縱切切永久制片、、南瓜莖縱切切永久制片、、大葉黃楊葉葉、芹菜葉柄柄、柑橘果實實。2.實驗器材顯微鏡、剪刀刀、鑷子、刀刀片、載玻片片、蓋玻片、、滴管、培養(yǎng)皿。實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察實驗步驟1.分生組織的觀觀察（1）取玉米根尖尖縱切永久制制片，先在低低倍鏡下觀察察，再用高倍倍鏡。（2）注意觀察：：初生分生組織織的細胞形態(tài)態(tài)特點，有無無正在分裂的的細胞；如果果觀察到了正正在分裂的細細胞，注意觀觀察其分裂的的方向；初生生分生組織的的細胞之間有有無細胞間隙隙？（3）細胞特點：：細胞小，細胞胞核較大，沒沒有大液泡，，細胞呈正方方形，排列整整齊緊密。因因為正在分裂裂，細胞質(zhì)密密度大，活動動旺盛，細胞胞壁薄。實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察實驗步驟2.保護組織的觀觀察（1）撕取大葉黃黃楊葉表皮制制成臨時裝片片，觀察其表表皮細胞、氣氣孔器的形態(tài)態(tài)結(jié)構(gòu)。（2）注意觀察：：細胞間的排列列、細胞間有有無間隙。（3）細胞特點：：外有細胞壁，，內(nèi)有大液泡泡；細胞之中中可觀察到綠綠色顆粒狀物物（葉綠體).另外，還可能能觀察到唇狀狀的葉孔保護護細胞實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察實驗步驟3.輸導(dǎo)組織的觀觀察（1）觀察南瓜莖莖的縱切永久久制片，找出出木質(zhì)部中的的導(dǎo)管、韌皮皮部中的篩管管和半胞，（2）注意觀察：：篩板和長形成成群分布的一一類細胞，此此為木纖維。。（3）細胞特點：：細胞長形，常常上下相連，，形成適于輸輸導(dǎo)的管道。。實驗一植植物徒手切片片和植物各類類組織觀察實驗步驟4.厚角組織的觀觀察（1）將芹菜葉柄柄制成的臨時時裝片置于顯顯微鏡下，觀觀察葉柄的棱棱角處，在表表皮和維管束束之間有一團團厚角組織，，細胞壁較厚厚，并有光澤澤。（2）細胞特特點：細胞稍長長，具有有明顯加加厚的初初生壁，，其加厚厚的部分分多在細細胞相互互毗連的的角隅處處，有的的植物細細胞壁加加厚在切切向壁或或近胞間間隙的部部位。實驗一植植物物徒手切切片和植植物各類類組織觀觀察實驗步驟驟5.分泌組織織（1）取柑橘橘外果皮皮，觀察察其上透透明的小小囊，擠擠壓果皮皮，觀察察小囊中中有什么么物質(zhì)溢溢出？將將果皮制制成切片片，在顯顯微鏡下下觀察，，小囊為為一空腔腔，其中中有什么么物質(zhì)？？（2）細胞特特點：是由細胞胞分化來來的特化化細胞。。這種細細胞的體體積一般般較相鄰鄰細胞大大，形狀狀各異，，它們常常呈單個個細胞分分散在植植物體內(nèi)內(nèi)其他較較不特化化的細胞胞間，在在各類器器官中存存在。實驗一植植物物徒手切切片和植植物各類類組織觀觀察三、思考考題1.初生分生生組織、、保護組組織的細細胞之間間有無細細胞間隙隙？2.木質(zhì)部和和韌皮部部在輸送送過程中中的作用用有什么么區(qū)別？？篩管和和導(dǎo)管的的細胞是是死細胞胞還是活活細胞？？3.厚角組織織的細胞胞是死細細胞還是是活細胞胞？實驗一植植物物徒手切切片和植植物各類類組織觀觀察作業(yè)1.完成實驗驗報告ThankYou!實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定一、植物物組織的的水勢測測定水勢表示示水的化化學勢，，水分在在滲透系系統(tǒng)中總總是由水勢高處處向水勢勢低處流流動。植植物生活活細胞是是一個滲滲透系統(tǒng)統(tǒng)，當將將植物細細胞或組組織放入入外界溶溶液中時時，水分分將以水水勢差為為動力在在兩者間間流動，，最終達達到動態(tài)態(tài)平衡。。如果植植物組織織的水勢勢小于外外界溶液液的水勢勢，植物物細胞吸吸水，使使外界溶溶液濃度度增大；；反之，，植物細細胞失水水，使外外液濃度度變小。。若植物物組織與與外界溶溶液水勢勢相同，，將不改改變外部部溶液的的濃度，，此時外外液的滲滲透勢就就等于植植物組織織的水勢勢。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定一、植物物組織的的水勢測測定實驗原理理利用外界界溶液的的濃度不不同其比比重也不不同的原原理來確確定與植植物組織織水勢相相同的外外液，根根據(jù)公式式計算植植物組織織的水勢勢。實驗方法法小液流法法實驗?zāi)康牡恼莆罩参镂锝M織水水勢的測測定方法法，并了了解滲透透系統(tǒng)中中水勢大大小是水水分移動動方向的的決定因因素。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定一、植物物組織的的水勢測測定實驗器材材吸水紙、、容量管管（或10ml量筒）、、試管、、帶蓋小小瓶、膠膠頭細玻玻璃彎管管、移液液管、剪剪刀、橡橡皮塞、、試管架架、溫度度計、鑷鑷子。試劑與材材料植物葉片片（大葉葉黃楊葉葉）、1mol/L蔗糖溶液液、染色色試劑。。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定一、植物物組織的的水勢測測定實驗步驟驟1.外界溶液液的配制制與滲透透作用①配制0.1~0.8mol/L8個梯度的的蔗糖溶溶液各10ml，注入8只試管中中，并分分別加上上塞子后后編號，，作為對對照組。。②將8只帶蓋小小瓶編號號，分別別從對照照組中相相同編號號的試管管中取蔗蔗糖溶液液4ml注入各瓶瓶，加上上塞子作作為實驗驗組。③用剪刀刀將植物物葉片剪剪成大小小相同（（約0.5cm2）的小塊塊，每瓶瓶中投入入40小塊（約約占1/4溶液體積積），塞塞好塞子子，放置置30min。在此期期間搖動動小瓶數(shù)數(shù)次。④用針尖尖挑取少少許染色色劑加入入上述帶帶蓋小瓶瓶中，搖搖勻，此此時溶液液為淺藍藍色。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定一、植物物組織的的水勢測測定實驗步驟驟2.等滲溶液液確定①用膠頭頭細玻璃璃彎管從從各帶蓋蓋小瓶中中依次吸吸取少量量的淺藍藍色溶液液，并用用吸水紙紙吸掉管管外壁上上的溶液液，然后后將彎管管伸入相相同的編編號的對對照組試試管液體體中部，，緩慢放放出溶液液一滴，，觀察有有色液滴滴的移動動方向。。②若有色色液滴向向上移動動，表明明組織失失水，使使蔗糖溶溶液濃度度降低、、比重減減??；若若有色液液滴向下下移動，，表明組組織吸水水，使蔗蔗糖溶液液濃度升升高、比比重增大大；如果果有色液液滴靜止止不動，，則表明明蔗糖溶溶液與植植物組織織水勢相相等，記記錄該蔗蔗糖溶液液的濃度度。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定一、植物物組織的的水勢測測定實驗步驟驟3.結(jié)果計算算依據(jù)上述述蔗糖溶溶液的濃濃度，根根據(jù)公式式計算植植物組織織的水勢勢。計算公式式：ψw=-iRTc式中ψw為植物組組織水勢勢，以bar表示；i為解離系系數(shù)，蔗蔗糖是1；R為氣體常常數(shù)，0.083L··bar/mol·K；T為絕對溫溫度，K（即273℃+t，t為實驗室室溫度））；c為等滲溶溶液濃度度，mol/L。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定一、植物物組織的的水勢測測定思考1.小液流法法測定植植物組織織水勢時時,為什么操操作時,應(yīng)強調(diào)所所用試管管、毛細細管應(yīng)保保持干燥燥?2.剪取植物物葉片，，并投入入試管中中時動作作為什么么要迅速速？3.加入甲烯烯藍不應(yīng)應(yīng)太多？？實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定二、植物物組織滲滲透勢的的測定實驗原理理當植物組組織細胞胞內(nèi)的汁汁液與其其周圍的的某種溶溶液處于于滲透平平衡狀態(tài)態(tài)，植物物細胞內(nèi)內(nèi)的壓力力勢為零零時，細細胞汁液液的滲透透勢就等等于該溶溶液的滲滲透勢。。這種滲滲透勢相相等的溶溶液稱為為等滲溶溶液。該該溶液的的濃度稱稱為等滲滲濃度。。當一系列列梯度濃濃度溶液液觀察細細胞質(zhì)壁壁分離現(xiàn)現(xiàn)象時，，細胞的的等滲濃濃度介于于剛剛引引起初始始質(zhì)壁分分離的最最低濃度度和尚不不能引起起質(zhì)壁分分離的最最高濃度度之間的的溶液濃濃度。代代入公式式即可計計算其滲滲透勢。。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定二、植物物組織滲滲透勢的的測定試驗方法法質(zhì)壁分離離法實驗?zāi)康牡挠^察植物物組織在在不同濃濃度溶液液中細胞胞質(zhì)壁分分離的產(chǎn)產(chǎn)生過程程，了解解其用于于測定植植物組織織滲透勢勢的原理理與方法法。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定二、植物物組織滲滲透勢的的測定實驗器材材顯微鏡、、載玻片片、蓋玻玻片、鑷鑷子、解解剖針、、刀片、、酒精燈燈、濾紙紙、滴管管、移液液管、小小培養(yǎng)皿皿。材料與試試劑洋蔥鱗片片、1mol/L蔗糖溶液液。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定二、植物物組織滲滲透勢的的測定方法步驟驟1.配制0.1~0.8mol/L濃度的8個梯度的的蔗糖溶溶液各10ml，分別盛盛于小培培養(yǎng)皿中中，并加加上蓋子子。2.從部位相相近的鱗鱗片上斯斯取大小小相近（（約幾個個平方毫毫米）的的內(nèi)表皮皮，從濃濃度高的的蔗糖溶溶液開始始，依次次每隔3min投放3片內(nèi)表皮皮到一種種濃度的的溶液中中（以便便有充足足的時間間觀察，，并使組組織在不不同的溶溶液中處處理時間間一致）），并使使之完全全浸沒，，室溫下下放置30min。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定二、植物物組織滲滲透勢的的測定方法步驟驟3.按濃度由由高到低低依次取取出處理理過的表表皮，放放在有1~2滴相應(yīng)濃濃度蔗糖糖溶液的的載玻片片上，蓋蓋上蓋玻玻片，在在顯微鏡鏡下觀察察質(zhì)壁分分離的情情況（每每次鏡檢檢約100個細胞）），并記記錄不同同濃度溶溶液處理理下質(zhì)壁壁分離的的程度。。4.依據(jù)不同同溶液中中植物細細胞質(zhì)壁壁分離的的程度，，確定一一個引起起50%的細胞角角隅上出出現(xiàn)質(zhì)壁壁分離（（作為初初始質(zhì)壁壁分離））的溶液液濃度，，或確定定引起細細胞質(zhì)壁壁分離最最低濃度度和不引引起質(zhì)壁壁分離最最高濃度度的平均均值，作作為等滲滲濃度。。用新的的溶液和和植物材材料進行行重復(fù)試試驗過程程，以確確保結(jié)果果的準確確性。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定二、植物物組織滲滲透勢的的測定結(jié)果計算算依據(jù)所確確定的等等滲濃度度，根據(jù)據(jù)下式計計算該植植物組織織的平均均滲透勢勢。計算公式式ψs=-iRTc式中ψs為平均滲滲透勢，，以bar表示；i為解離系系數(shù)，蔗蔗糖是1；R為氣體常常數(shù)，0.083L··bar/mol·K；T為絕對溫溫度，K（即273℃+t，t為實驗室室溫度））；c為等滲溶溶液濃度度，mol/L。實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定二、植物物組織滲滲透勢的的測定思考題1.如何提高高質(zhì)壁分分離法測測定植物物組織滲滲透勢試試驗的準準確性？？2.不同濃度度的NaCl可否用于于測定植植物組織織的滲透透勢？實驗二植植物物組織的的水勢和和滲透勢勢的測定定作業(yè)完成試驗驗報告實驗三葉葉綠體色色素的提提取、分分離及含含量測定定一、葉綠綠體色素素的提取取、分離離實驗原理理植物色素素包含脂脂溶性的的葉綠體體色素和和水溶性性的細胞胞液色素素。葉綠綠體色素素是植物物進行光光合作用用吸收光光能的重重要物質(zhì)質(zhì)基礎(chǔ)。。葉綠體體色素主主要包括括葉綠素素a、葉綠素b、葉黃素和和胡蘿卜素素，它們與與類囊體膜膜蛋白結(jié)合合成色素蛋蛋白復(fù)合體體而存在。。根據(jù)葉綠體體色素的脂脂溶性特性性，常用乙乙醇、丙酮酮等有機溶溶劑離析而而從植物材材料將其提提取。葉綠綠體色素是是由化學結(jié)結(jié)構(gòu)和相對對分子質(zhì)量量不同的多多種成分組組成，依據(jù)據(jù)它們在有有機溶劑中中的溶解性性和在吸附附劑上的吸吸附性差異異，可分離離出它們的的各組分。實驗三三葉葉綠體體色素素的提提取、、分離離及含含量測測定一、葉葉綠體體色素素的提提取、、分離離實驗?zāi)磕康囊灾参镂锶~片片組織織為材材料，，提取取葉綠綠體色色素；；以紙紙層析析法分分離其其成分分。實驗器器材天平、、剪刀刀、研研缽、、離心心機、、玻璃璃棒、、量筒筒、燒燒杯、、濾紙紙、小小燒杯杯。材料與與試劑劑植物葉葉片、、丙酮酮、碳碳酸鈣鈣粉、、石英英砂、、層析析液[按石油油醚：：丙酮酮（25：3）比例例配置置（V/V）]。實驗三三葉葉綠體體色素素的提提取、、分離離及含含量測測定一、葉葉綠體體色素素的提提取、、分離離實驗步步驟1.葉綠體體色素素的提提?、俜Q取取新鮮鮮的植植物葉葉片2g，洗凈凈，擦擦干，，去中中脈，，剪碎碎后放放入研研缽中中。②加入入少許許石英英砂和和CaCO3，再加加入無無水丙丙酮10ml，研磨磨成勻勻漿，，再加加丙酮酮15ml，搖勻勻。③離心心，取取上清清液，，即可可得到到葉綠綠體色色素提提取液液（保保存于于暗處處備用用）。。實驗三三葉葉綠體體色素素的提提取、、分離離及含含量測測定一、葉葉綠體體色素素的提提取、、分離離實驗步步驟2.葉綠體體色素素的分分離——紙層析析法①層析析樣紙紙制備備將優(yōu)質(zhì)質(zhì)濾紙紙剪成成3cm×9cm的長條條，將將一端端剪成成高約約1cm的三角角形。。②點樣樣用細玻玻璃棒棒蘸取取葉綠綠體色色素提提取液液，于于層析析紙的的三角角形一一端在在三角角形底底邊上上劃一一條樣樣線，，風干干后在在原處處重復(fù)復(fù)點樣樣幾次次。③展層層在在小小燒杯杯中加加入3~5ml層析液液，然然后將將層析析紙已已經(jīng)點點樣的的一端端放入入小燒燒杯里里，注注意層層析液液不可可觸及及樣線線，并并蓋好好蓋子子，于于陰暗暗處展展層約約10min，即可可在層層析紙紙上分分辨出出4種不同同的清清楚色色層。。④用鉛鉛筆在在層析析紙上上指出出4種色層層的輪輪廓，，并注注明色色層的的名稱稱和顏顏色，，附在在實驗驗報告告中實驗三葉葉綠體色素素的提取、分分離及含量測測定一、葉綠體色色素的提取、、分離思考1.嚴密提取色素素時加入CaCO3有什么作用？？2.色素擴散速度度與什么有關(guān)關(guān)？實驗三葉葉綠體色素素的提取、分分離及含量測測定二、葉綠體色色素含量的測測定實驗原理葉綠體色素溶溶液各組成成成分在可見光光譜中具有不不同的特征吸吸收峰。因此此，應(yīng)用分光光光度計在某某一特定波長長下所測定的的吸光度，根根據(jù)經(jīng)驗公式式即可計算出出色素溶液中中各色素濃度度，不同溶劑劑所提取的色色素吸收光譜譜有差異，因因此，應(yīng)使用用不同的計算算公式。葉綠體色素的的提取常用丙丙酮和乙醇有有機溶劑。用用80%丙酮提取葉綠綠素a和葉綠素b以及類胡蘿卜卜素分別在663nm、646nm和470nm波長下有最大大吸收峰，而而用95%乙醇提取則在在665nm、649nm和470nm波長下具有最最大吸收峰，，據(jù)此所測得得的吸光度值值代入不同的的經(jīng)驗公式，，計算出葉綠綠素a和b的濃度，及葉葉綠素總濃度度和類胡蘿卜卜素的總濃度度，并依據(jù)所所使用的單位位植物組織（（鮮重、干重重、或面積）），計算出色色素的含量。。實驗三葉葉綠體色素素的提取、分分離及含量測測定二、葉綠體色色素含量的測測定實驗?zāi)康恼莆辗止夤舛榷扔嫹▽χ参镂锶~綠體色素素提取液中葉葉綠素a和b的濃度及其葉葉綠素總濃度度和類胡蘿卜卜素的總濃度度測定與計算算方法，以及及植物材料中中各種色素含含量的計算方方法。實驗器材分光光度計實驗三葉葉綠體色素素的提取、分分離及含量測測定二、葉綠體色色素含量的測測定實驗步驟1.吸光度的測定定①將色素提取取液重新混勻勻。②以丙酮溶液液做空白對照照，分別在波波長為663、646和470nm下測定提取液液的吸光度值值，即A663、A646和A470。實驗三葉葉綠體色素素的提取、分分離及含量測測定二、葉綠體色色素含量的測測定實驗步驟2.結(jié)果計算①葉綠素濃度度的計算計算公式：Ca=12.21A663-2.81A646Cb=20.13A646-5.03A663CT=Ca+Cb=17.32A646-7.18A663Cx.c=（1000A470-3.27Ca-104Cb）/229式中中，，Ca、Cb和CT、Cx.c分別別為為葉葉綠綠素素a、b濃度度和和葉葉綠綠素素及及類類胡胡蘿蘿卜卜素素的的總總濃濃度度，，mg．L-1。實驗驗三三葉葉綠綠體體色色素素的的提提取取、、分分離離及及含含量量測測定定二、、葉葉綠綠體體色色素素含含量量的的測測定定實驗驗步步驟驟2.結(jié)果果計計算算②葉葉綠綠體體色色素素含含量量的的計計算算葉綠綠體體色色素素的的含含量量實驗驗三三葉葉綠綠體體色色素素的的提提取取、、分分離離及及含含量量測測定定作業(yè)業(yè)完成成實實驗驗報報告告實驗驗四四植植物物種種子子活活力力的的快快速速測測定定植物物種種子子的的活活力力是是指指種種子子萌萌發(fā)發(fā)出出芽芽的的潛潛能能，，它它決決定定種種子子的的品品質(zhì)質(zhì)和和實實用用價價值值大大小小。。測測定定種種子子活活力力的的常常規(guī)規(guī)方方法法是是測測定定種種子子的的發(fā)發(fā)芽芽率率。。種種子子發(fā)發(fā)芽芽率率是是指指在在適適宜宜的的條條件件下下，，規(guī)規(guī)定定時時間間內(nèi)內(nèi)發(fā)發(fā)芽芽的的種種子子占占供供試試種種子子的的百百分分率率。。常常規(guī)規(guī)發(fā)發(fā)芽芽率率的的測測定定所所需需時時間間長長，，限限制制了了在在實實際際生生產(chǎn)產(chǎn)實實踐踐中中的的應(yīng)應(yīng)用用。。實驗驗四四植植物物種種子子活活力力的的快快速速測測定定試驗驗方方法法TTC法（（氯氯化化三三苯苯基基四四氮氮唑唑法法））BTB法（（溴溴麝麝香香草草酚酚藍藍法法））紅墨墨水水染染色色法法實驗驗四四植植物物種種子子活活力力的的快快速速測測定定TTC法是是利利用用具具有有活活力力的的種種子子呼呼吸吸時時所所產(chǎn)產(chǎn)生生的的NADH2和NADPH2與滲滲入入胚胚細細胞胞內(nèi)內(nèi)的的TTC反應(yīng)應(yīng)，，將將無無色色TTC還原原成成紅紅色色的的三三苯苯基基甲甲腙腙（（TTF），，從從而而使使種種胚胚著著色色（（無無生生活活力力的的種種子子浸浸泡泡TTC時種種胚胚不不著著色色）），，以以鑒鑒別別種種子子活活力力的的方方法法。。BTB法是是利利用用具具有有活活力力的的種種子子呼呼吸吸時時所所釋釋放放的的CO2溶于于水水后后所所解解離離成成的的H+和HCO3-，使使活活細細胞胞周周圍圍的的酸酸度度增增加加，，導(dǎo)導(dǎo)致致藍藍色色的的BTB轉(zhuǎn)變變?yōu)闉辄S黃色色（（死死種種子子不不能能使使BTB變色色）），，以以鑒鑒別別種種子子活活力力的的方方法法。。紅墨墨水水染染色色法法是是依依據(jù)據(jù)活活種種子子的的胚胚細細胞胞具具有有物物質(zhì)質(zhì)選選擇擇性性吸吸收收，，用用紅紅墨墨水水浸浸泡泡活活種種子子其其胚胚不不被被染染色色（（而而死死種種子子胚胚細細胞胞膜膜喪喪失失半半透透性性其其胚胚可可被被染染色色）），，來來鑒鑒別別種種子子活活力力的的方方法法。。實驗驗四四植植物物種種子子活活力力的的快快速速測測定定實驗驗?zāi)磕康牡恼莆瘴罩仓参镂锓N種子子活活力力測測定定的的基基本本原原理理，，及及幾幾種種快快速速測測定定種種子子活活力力的的方方法法。。實驗驗器器材材燒杯杯、、培培養(yǎng)養(yǎng)皿皿、、刀刀片片、、鑷鑷子子、、恒恒溫溫箱箱、、電電爐爐、、瓊瓊脂脂。。材料料與與試試劑劑植物物種種子子0.5%TTC溶液液（（以以少少量量酒酒精精溶溶解解后后再再以以水水定定容容））、、0.1%BTB溶液液（（配配制制后后需需用用濾濾紙紙過過濾濾，，濾濾液液若若為為黃黃色色，，可可滴滴加加數(shù)數(shù)滴滴氨氨水水使使之之變變?yōu)闉樗{藍色色或或藍藍綠綠色色，，棕棕色色瓶瓶保保存存?zhèn)鋫溆糜茫?、?%紅墨墨水水。。實驗驗四四植植物物種種子子活活力力的的快快速速測測定定實驗驗步步驟驟氯化化三三苯苯基基四四氮氮唑唑法法（（TTC法））①將將種種子子在在30~35℃℃溫水水中中浸浸泡泡6~8h，使使種種子子充充分分吸吸漲漲，，呼呼吸吸加加強強。。②取取吸吸漲漲種種子子100粒，