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文檔簡介

第六章消化道感染的細菌ENTEROBACTERIACEAE1.腸道桿菌的共性。2.大腸埃希菌的致病性。3.沙門菌引起的疾病及分離與鑒定程序。4.Widaltest,結果判斷。要點:腸道桿菌寄生于腸道的一大群生物學性狀相似的G-中等大小桿菌的總稱。多數正常菌群部分條件致病菌少數致病菌腸道桿菌2.培養(yǎng):兼性厭氧,普通培養(yǎng)基生長良好,中等大小光滑型菌落,腸道SS培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。(Salmonella-ShigellaAgarMedium)結果:腸道非致病菌:紅色大菌落,腸道致病菌:無色透明小菌落。

腸道桿菌的共同特征形態(tài)與染色:中等大小的G-桿菌,無芽胞,多數有周鞭毛及菌毛,少數有莢膜。腸道SS培養(yǎng)基(選擇培養(yǎng)基)

成分 作用 致病性菌 非致病菌膽鹽和煌綠抑制非致病菌乳糖 底物 不分解 分解,產酸中性紅

指示劑 不顯色 顯紅色傷寒桿菌大腸桿菌(Salmonella-ShigellaAgarMedium)伊紅美蘭平板基礎培養(yǎng)基,乳糖(底物),伊紅、美蘭(指示劑、抑制)。伊紅美蘭培養(yǎng)基大腸埃希菌(EMB,EosinMethyleneBlue)3.生化反應:活潑,鑒別意義。乳糖發(fā)酵試驗初步鑒別腸道致病菌與非致病菌。

代表種動力葡萄糖乳糖靛基質H2S尿素酶埃希菌屬大腸埃希菌++++--志賀菌屬痢疾志賀菌-+-+/---沙門菌屬傷寒沙門菌++---/+-變形桿菌屬變形桿菌++-+++雙糖鐵培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基葡萄糖固體培養(yǎng)基乳糖鐵鹽(H2S)指示劑:酚紅接種方法:穿刺、斜面接種觀察:培養(yǎng)基顏色氣泡有否黑色沉淀動力菌體抗原(O-Ag)鞭毛抗原(H-Ag)毒力抗原(Vi-Ag、K-Ag)5.抵抗力:弱。膽鹽和煌綠對非致病性腸道桿菌有選擇性抑制作用。4.抗原構造6.變異:耐藥性變異。第一節(jié)大腸埃希菌(大腸桿菌,Escherichiacoli)維生素(營養(yǎng))細菌素(拮抗)免疫力寄居部位改變2.特殊菌株:腹瀉。正常菌群:人類出生后不久進入腸道,并延

續(xù)終身,合成條件致病菌腸外感染。一、生物學特性形態(tài)染色:G-中等大小桿菌,周鞭毛及

普通菌毛和性菌毛,部分有微莢膜。2.培養(yǎng)特性:SS培養(yǎng)基上形成紅色大菌落。3.生化特點:葡萄糖+、乳糖+,動力+,H2S-O抗原:>170種4.抗原構造

H抗原:>56種

K抗原:>100種血清型表示方式:O:K:H如:O111:K58:H21.黏附素定植因子抗原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(CFA/Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ

)集聚黏附菌毛Ⅰ、Ⅲ(AAFⅠ、Ⅲ

)緊密黏附素Ⅰ型菌毛使細菌黏附在泌尿道和腸道上皮細胞,特異性高。

二、致病性(一)致病物質AAF:aggregativeadherencefimbriaeCFA:colonizationfactorantigen腸毒素不耐熱腸毒素(LT)耐熱腸毒素(ST)2.外毒素志賀毒素溶血素ALT激活腺苷環(huán)化酶cAMP ST激活鳥苷環(huán)化酶cGMP腹瀉①腸毒素性;②細胞毒性;③神經毒性。3.其他65oC×30min滅活耐100oC×20min內毒素、莢膜、載鐵蛋白、III型分泌系統(tǒng)

不耐熱腸毒素(LT):B亞單位與腸黏膜上皮細胞膜表面GM1神經節(jié)苷脂結合,A亞單位穿過細胞膜激活腺苷酸環(huán)化酶,使ATP→cAMP→

腸液分泌→致瀉。Ⅲ型分泌系統(tǒng)

猶如分子注射器,是指細菌接觸宿主細胞后,能向宿主細胞內輸送毒性基因產物的細菌效應系統(tǒng),約由20余種蛋白組成。1.腸外感染(條件致病菌):(二)所致疾病寄居部位改變腸外感染化膿性感染泌尿道感染腸內正常菌群腹膜炎闌尾炎敗血癥新生兒腦膜炎尿道炎膀胱炎腎盂腎炎ETEC:嬰幼兒、旅游者腹瀉EIEC:大兒童、成人腹瀉EPEC:嬰兒腹瀉EHEC:O157:H72.腸內感染(某些血清型):胃腸炎(腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐)外源性大腸桿菌污染的食物、飲水腸產毒型大腸埃希菌(ETEC)致病物質:定植因子和腸毒素(ST、LT),引起5歲以下嬰幼兒和旅游者腹瀉。腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC)致病物質:質粒攜帶侵襲性基因,能侵入結腸上皮細胞。所致疾病:較大兒童和成人菌痢樣癥狀腹瀉。(enterotoxigenicE.coli)(enteroinvasiveE.coli)腸致病型大腸埃希菌(EPEC)質粒編碼的黏附素細菌黏附于十二指腸、空腸、回腸細菌大量繁殖上皮細胞黏膜刷狀緣破壞、微絨毛萎縮、上皮細胞排列紊亂,功能紊亂嚴重腹瀉(主要為嬰幼兒腹瀉)(enteropathogenicE.coli)腸出血型大腸埃希菌(EHEC)致病物質:菌毛、志賀毒素所致疾病:出血性結腸炎、溶血性尿毒綜合征主要血清型:O157:H7經污染的食品傳播5歲以下兒童易感(enterohemorrhagicE.coli)腸集聚型大腸埃希菌(EAEC)所致疾病:嬰兒和旅行者持續(xù)水樣腹瀉。致病物質:集聚黏附菌毛、束形成菌毛。(enteroaggregativeE.coli)三、衛(wèi)生細菌學檢查大腸菌群數:作為飲水、食品等糞便污染的指標之一。我國衛(wèi)生標準規(guī)定:每1000ml飲水<3個(大腸菌群指數)每100ml瓶裝汽水、果汁<5個大腸菌群細菌總數飲用水每ml樣品<100個第二節(jié)志賀菌屬

Shigella一、生物學性狀(1)無鞭毛、有菌毛。(2)培養(yǎng)特性:SS培養(yǎng)基上長成無色菌落。(3)生化反應:葡+、乳—、動力—根據O抗原不同分為4群40多個血清型:

A群——痢疾志賀菌:10個血清型B群——福氏志賀菌:8個血清型C群——鮑氏志賀菌:18個血清型D群——宋內志賀菌:1個血清型(4)抗原構造1)O抗原2)K抗原(5)抵抗力對理化因素抵抗力較弱,一般消毒劑敏感。對酸敏感(糞便中產酸菌可使志賀菌在數小時死亡)。對自然環(huán)境有較強的抵抗力(污物上存活10~20d)。對多種抗生素敏感,但易產生耐藥性。二、致病性(一)致病物質1.侵襲力黏附于回腸末端和結腸的黏膜上皮M細胞表面,侵入細胞內增殖。菌毛2.內毒素內毒素血癥高熱等中毒癥狀破壞腸黏膜、促進炎癥膿血便腸道植物神經腹痛、里急后重腸蠕動失調和痙攣3.外毒素志賀毒素(shigatoxin,St)主要由A群產生。腸毒性類似霍亂腸腸毒素,引起早期水樣腹瀉細胞毒性對人的肝細胞等多種細胞具有毒性神經毒性引起中樞神經系統(tǒng)病變傳染源:菌痢病人、帶菌者傳播途徑:糞口傳播我國流行型別:福氏志賀菌和宋內志賀菌疾?。杭毦粤〖?。志賀菌感染一般不侵入血流,只局限于腸道。(二)所致疾病三、病原菌分離步驟糞便SS培養(yǎng)基無色菌落雙糖鐵培養(yǎng)基生化反應玻片凝集試驗革蘭染色、鏡檢標本:膿血黏液便四、特異性預防2.疫苗接種:特異性預防主要采用口服減毒活疫苗,目前采用口服多價志賀菌鏈霉素依賴株。1.糞便、水源、食品衛(wèi)生管理。第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)沙門菌屬:血清型>2500余種甲型付傷寒沙門菌肖氏沙門菌(乙型)希氏沙門菌(丙型)傷寒沙門菌付傷寒沙門菌鼠傷寒~腸炎~豬霍亂~常見致病性沙門菌:一、生物學性狀1.形態(tài)染色:G-,有菌毛及周鞭毛。2.培養(yǎng)特性:SS培養(yǎng)基:無色透明小菌落。3.生化反應:

葡乳尿靛H2S動力

傷寒沙門菌+----/++

甲型副傷寒沙門菌----/++

乙型副傷寒沙門菌---++++

沙門菌屬4.抗原結構:O抗原/菌體抗原(脂多糖):耐熱100oC×1h,數種沙門菌共有,誘導

IgM抗體。H抗原/鞭毛抗原(蛋白質):不耐熱60oC×30min滅活,具特異性,誘導IgG抗體。Vi抗原/毒力抗原:抗原性弱,Vi抗體可用于檢測帶菌者。二、致病性與免疫性(一)致病物質1.侵襲力菌毛Ⅲ型分泌系統(tǒng)侵襲蛋白Vi抗原:抗吞噬、阻斷O抗體與O抗原的結合2.內毒素:體溫↑、白細胞↓、中毒癥狀、休克3.外毒素:腸毒素(某些菌株產生)M細胞細菌細菌被吞入,生長繁殖菌毛輸入侵襲蛋白M細胞(microfoldcell)是一種特化的抗原轉運細胞。1.腸熱癥(傷寒、副傷寒)沙門菌糞口途徑腸壁、腸系膜淋巴結血(第一次菌血癥)全身(肝、脾、腎、膽囊等)血(第二次菌血癥)腸道部分菌侵入腸壁淋巴組織部分菌隨糞便排出體外局部組織死、潰瘍、出血第3周后病情開始好轉(二)所致疾病第1w第2w第2~3w3~4w后并發(fā)癥:腸出血,腸穿孔最常見的沙門菌感染:鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌2.食物中毒3.敗血癥 4.無癥狀帶菌者鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌1~5%(三)免疫性胞內寄生菌,細胞免疫為主,腸熱癥后獲牢固免疫力。三、微生物學檢查(一)病原菌的分離與鑒定1.標本采?。?.步驟:1W→血發(fā)病第2~3W→糞便或尿全程→骨髓糞便、尿SS培養(yǎng)基無色可疑菌落

血、骨髓肉湯培養(yǎng)基雙糖鐵培養(yǎng)基(增菌)生化反應

玻片凝集反應(二)血清學診斷:肥達試驗(Widaltest)概念:用已知傷寒桿菌O、H抗原和甲副、肖氏、希氏傷寒桿菌H抗原與病人血清作試管凝集試驗,檢查患者血清中有無相應抗體及其效價。原理:試管凝集試驗診斷菌液(已知)未知抗體定性、定量

肥達試驗實驗方法傷寒O-Ag→TO傷寒H-Ag→TH甲副H-Ag→PA乙副H-Ag→PB正??贵w水平:當TO≥1:80TH≥1:1

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