自身免疫性疾病的免疫學檢驗課件

第十五章

自身免疫性疾病的免疫學檢驗1第十五章1返回總目錄目錄

概述

1自身免疫性疾病的免疫學檢查

2自身抗體的檢測實驗選擇的原則

3小結(jié)42返回總目錄目錄概述1自身免疫性疾病的免疫學檢查2自

自身耐受(self-tolerance)

：正常情況下，免疫系統(tǒng)對宿主自身的組織和細胞不產(chǎn)生免疫應(yīng)答。自身免疫

(autoimmunity)：當某種原因使自身耐受

性破壞時，免疫系統(tǒng)就會對自身組織成分、細胞成分及其產(chǎn)物發(fā)生免疫應(yīng)答。第一節(jié)概述3自身耐受(self-tolerance)：正常情況下，免

自身免疫病(autoimmunedisease,AID)：是自身免疫應(yīng)答過強或持續(xù)時間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常，所產(chǎn)生的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞對表達自身靶抗原的細胞和組織發(fā)動攻擊，導致?lián)p傷或功能障礙，并出現(xiàn)相應(yīng)臨床癥狀。4自身免疫病(autoimmunedisease,AID)一、自身免疫病與風濕性疾病

風濕性疾?。╮heumaticdiseases）泛指影響骨、關(guān)節(jié)及周圍軟組織等一組疾病，簡稱風濕病。5一、自身免疫病與風濕性疾病風濕性疾?。╮heumatic結(jié)締組織病(connectivetissuedisease,CTD)

是指病變主要發(fā)生于結(jié)締組織，有組織黏液樣水腫、纖維蛋白樣變性及壞死性血管炎等基本病理變化的一組疾病。以往所指的結(jié)締組織病或膠原病是風濕性疾病的一部分，它們和風濕性疾病不可完全等同。

6結(jié)締組織病(connectivetissuediseas1.發(fā)生與感染、遺傳、性激素等因素有關(guān)，屬AID；2.結(jié)締組織及血管的慢性炎癥為其基本病理變化；3.病變可累及多系統(tǒng)、多器官；發(fā)病情況差異大，為異質(zhì)性疾??；5.以關(guān)節(jié)、肌肉、軟組織等疼痛為主要癥狀；6.血清中可查出多種自身抗體；7.對糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑藥物治療有療效；8.病程慢性、反復、進行性，最終可導致殘疾或死亡。風濕病的臨床特點71.發(fā)生與感染、遺傳、性激素等因素有關(guān)，屬AID；風濕病的臨二、自身免疫病的共同特征血中測到高效價的自身抗體/自身應(yīng)答性T淋巴細胞自身抗體/自身應(yīng)答性T淋巴細胞作用于表達自身抗原的組織細胞，造成其損傷或功能障礙動物實驗可復制與AID相似的動物模型，并能通過血清或致敏的淋巴細胞可使疾病被動轉(zhuǎn)移大多數(shù)自身免疫病是自發(fā)性或特發(fā)性的，外因可有一定影響

，病情的轉(zhuǎn)歸與自身免疫應(yīng)答強度相關(guān)有遺傳傾向，反復發(fā)作和慢性遷延，部分自身免疫性疾病易發(fā)于女性，應(yīng)用免疫抑制劑治療有效

8二、自身免疫病的共同特征血中測到高效價的自身抗體/自身應(yīng)答性三、自身免疫病的分類按自身抗原分類

器官特異性自身免疫性疾病器官非特異性自身免疫性疾病患者的病變常局限于某一特定的器官，由對器官的特異性抗原的免疫應(yīng)答引起全身性或系統(tǒng)性自身免疫性疾??；患者的病變可見于多種器官及結(jié)締組織（結(jié)締組織病或膠原病）9三、自身免疫病的分類按自身抗原分類器官特異性自身免疫性疾器官特異性病名自身抗原橋本甲狀腺炎甲狀腺球蛋白和甲狀腺微粒體甲狀腺功能亢進(Graves病)TSH受體Addison病腎上腺皮質(zhì)細胞自身免疫性萎縮性胃炎胃壁細胞、內(nèi)因子潰瘍性結(jié)腸炎結(jié)腸黏膜細胞重癥肌無力乙酰膽堿受體交感性眼炎眼晶狀體蛋白胰島素依賴型糖尿病胰島β細胞胰島素抵抗型糖尿病胰島素受體原發(fā)性膽汁性肝硬化小膽管上皮細胞10器官特異性病名自身抗原橋本甲狀腺炎甲狀腺球蛋白和器官非特異性病名自身抗原系統(tǒng)性紅斑狼瘡細胞核成分、細胞漿成分類風濕性關(guān)節(jié)炎變性IgG、類風濕相關(guān)的核抗原干燥綜合征涎腺上皮細胞混合性結(jié)締組織病細胞核(RNP)自身免疫性溶血性貧血紅細胞特發(fā)性血小板減少性紫癜血小板特發(fā)性白細胞減少癥白細胞硬皮病細胞核蛋白、細胞核染色體著絲點多發(fā)性肌炎細胞核蛋白11器官非特異性病名自身抗原系統(tǒng)性紅斑狼瘡細胞核成分器官特異性和器官非特異性的特征性區(qū)別器官特異性器官非特異性自身抗體和病變具器官特異性自身抗體和病變無器官特異性極少量自身抗原與淋巴樣系統(tǒng)接觸大量自身抗原進入免疫系統(tǒng)實質(zhì)病變可能由Ⅳ變態(tài)反應(yīng)或自身抗體所致病變由抗原抗體復合物所致治療原則為控制代謝缺陷治療原則為抑制炎癥和抗體形成有發(fā)生器官內(nèi)癌癥的傾向有發(fā)生淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞腫瘤的傾向抗原與弗氏佐劑共同免疫動物可誘導產(chǎn)生器官特異性抗體動物被刺激后不產(chǎn)生抗體12器官特異性和器官非特異性的特征性區(qū)別器官特異性器官非特異性自分類疾病結(jié)締組織系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風濕性關(guān)節(jié)炎、混合性結(jié)締組織病內(nèi)分泌系統(tǒng)橋本甲狀腺炎、Graves病、Addison病、胰島素依賴性糖尿病消化系統(tǒng)萎縮性胃炎、潰瘍性胃炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化血液系統(tǒng)惡性貧血、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜心血管系統(tǒng)風濕性心肌炎泌尿系統(tǒng)腎小球腎炎呼吸系統(tǒng)特發(fā)性肺纖維化神經(jīng)系統(tǒng)重癥肌無力、多發(fā)性神經(jīng)炎皮膚蕁麻疹按發(fā)病部位的解剖系統(tǒng)分類13分類疾病結(jié)締組織系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風濕性關(guān)節(jié)炎、1414（一）自身抗原形成分子模擬四、自身免疫病的發(fā)病機制隱蔽抗原的釋放自身抗原改變15（一）自身抗原形成分四、自身免疫病的發(fā)病機制隱蔽抗原的釋放自多克隆激活（二）免疫系統(tǒng)發(fā)育和免疫調(diào)節(jié)異常胸腺骨髓功能異常Th1和Th2細胞功能失衡16多克隆激活（二）免疫系統(tǒng)發(fā)育和免疫調(diào)節(jié)異常胸腺（三）遺傳因素17（三）遺傳因素171.自身抗體的作用

（四）AID的病理損傷機制抗血細胞表面抗原的抗體181.自身抗體的作用（四）AID的病理損傷機制抗血細胞表面1.自身抗體的作用——抗細胞表面受體抗體

重癥肌無力191.自身抗體的作用——抗細胞表面受體抗體重癥肌無力抗細胞表面受體抗體毒性彌漫性甲狀腺腫（Graves?。┌l(fā)病機制示意圖20抗細胞表面受體抗體毒性彌漫性甲狀腺腫（Graves病）發(fā)病機自身抗體——抗核抗體腎小球、關(guān)節(jié)、皮膚和其它多種器官的毛細血管壁結(jié)合循環(huán)中的核抗原

多部位脈管炎

系統(tǒng)性紅斑狼瘡形成可溶性抗原—抗體IC

反復沉積1.自身抗體的作用：

自身抗體與相應(yīng)抗原形成的免疫復合物21自身抗體——抗核抗體腎小球、關(guān)節(jié)、皮膚和結(jié)合循環(huán)中的核抗原2.自身應(yīng)答性T淋巴細胞作用針對自身抗原發(fā)生免疫應(yīng)答的T細胞可引起組織損傷，這類疾病屬于Ⅳ型超敏反應(yīng)引起的疾病。

3.巨嗜細胞和NK細胞的作用巨噬細胞在AID的組織損傷中也起重要作用。巨噬細胞被細胞因子激活后，就具有細胞毒作用。

（四）AID的病理損傷機制返回章目錄222.自身應(yīng)答性T淋巴細胞作用（四）AID的病理損傷機制返回

抗核抗體（antinuclearantibody，ANA):

是以真核細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱；在某些因素作用下改變細胞核某些成分性質(zhì)，激發(fā)機體產(chǎn)生許多抗不同核成分的抗體；第二節(jié)自身免疫性疾病的免疫學檢查一、抗核抗體測定23抗核抗體（antinuclearantibody，ANAANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；ANA無器官特異性和種屬特異性；ANA主要存在于血清中；將檢出ANA作為AID存在的依據(jù)。24ANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；24

抗DNA抗體：抗dsDNA/抗nDNA、抗ssDNA/抗dDNA等抗組蛋白抗體(AHA)：抗H1、抗H2A、抗H2B、抗H3、抗H4抗體等

抗非組蛋白抗體：抗nRNP/抗U1RNP、抗Scl-70、抗SSA、抗Sm、抗SSB、抗Jo-1、抗Rib抗體、

AnuA、抗DNP、抗D’E多肽抗體、抗DM53抗體抗RANA抗體、抗著絲點、抗Ku抗體等

抗核仁抗體：抗PM-Scl抗體、抗Th/To抗體、抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗體等（一）ANA的類型和臨床意義

ANA譜25抗DNA抗體：抗dsDNA/抗nDNA、抗s①抗天然DNA(nativeDNA,nDNA)抗體，又稱抗雙鏈DNA(doublestrandedDNA,dsDNA)

抗體。②抗變性DNA(denaturedDNA,dDNA)

抗體，又稱抗單鏈DNA(singlestrandedDNA,ssDNA)抗體。對SLE有高特異性;SLE診斷標準之一。緩解期降低70%～90%SLE活動期增高藥物療效抗dsDNA抗體抗DNA抗體26①抗天然DNA(nativeDNA,nDNA)抗體，

抗組蛋白抗體（anti-histonicantibody,AHA）：由H1、H2A、H2B、H3和H4五個亞單位，各自都有特異性抗體；AHA檢出百分率抗dsDNA507090100藥物誘導性狼瘡只能檢出此SLEAHAAHA抗組蛋白抗體27抗組蛋白抗體（anti-histonicantibod

可提取性核抗原(extractablenuclearantigen,ENA)

是鹽水可提取性核抗原的總稱，是非組蛋白的核蛋白，屬酸性核蛋白抗原，由許多小分子量的RNA和多肽組成?？笶NA抗體28可提取性核抗原(extractablenuclear對風濕病有特異診斷價值的有以下七種：

①抗nRNP(nuclearRNP,nRNP)抗體；②抗Sm抗體；③抗SSA抗體；④抗SSB抗體；

⑤抗Scl-70抗體；⑥抗Jo-1抗體；

⑦抗核糖體抗體。29對風濕病有特異診斷價值的有以下七種：29抗DNP抗體（抗核蛋白抗體）：核蛋白(DNP)抗原由DNA和蛋白質(zhì)組成。DNP抗原有不溶性和可溶性兩種，可分別產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。檢出百分率抗DNP20406080SLE非活動期

SLE活動期抗不溶性DNP抗體抗DNP抗DNP100RA滑膜液中抗DNP抗可溶性DNP抗體抗DNP抗體30抗DNP抗體（抗核蛋白抗體）：核蛋白(DNP)抗原由DNA和

抗核小體抗體（anti-nucleosomeantibody，AnuA)

是細胞核染色質(zhì)的基本單位;

細胞凋亡而致核小體大量蓄積，誘導B細胞產(chǎn)生的AnuA是SLE

特異性的標志抗體?？筪sDNA抗體抗核小體抗體抗dsDNA和抗Sm陰性的SLE陽性率為60%～80%，特異性＞97%?？购诵◇w抗體31抗核小體抗體（anti-nucleosomeanti

常見AID的ANA陽性檢出率疾病ANA（%）疾病ANA（%）SLE≥95SS70～80MCTD≥95PM/DM30PSS85～95RA20～3032常見AID的ANA陽性檢出率疾病ANA（%）疾病ANA（%（二）ANA的檢測方法

將患者血清先進行稀釋，可以做定量試驗，在1:80稀釋仍呈陽性時，對SLE的診斷有較大的參考價值。形成胞核基質(zhì)—ANA—抗人Ig·FITC1.熒光免疫法33（二）ANA的檢測方法將患者血清先進行稀釋，可以做定量試驗抗核抗體核型與相關(guān)疾病核型熒光圖形抗體相關(guān)疾病周邊型核周環(huán)狀熒光抗dsDNASLE、慢活肝炎均質(zhì)型核呈均質(zhì)熒光抗DNA、AHA、AnuASLE、RA、PSS、慢性肝病斑點型核內(nèi)顆粒狀熒光抗ENAMCTD、SLE、PSS、SS、PM核仁型核仁有熒光抗核仁抗體PSS、雷諾現(xiàn)象、SLE著絲點型核漿細小相同顆粒熒光抗著絲點PSS、CREST綜合征34抗核抗體核型與相關(guān)疾病核型熒光圖形抗體相關(guān)疾病周邊型核周環(huán)狀均質(zhì)型抗核抗體核型著絲點型核仁型斑點型35均質(zhì)型抗核抗體核型著絲點型核仁型斑點型35例：間接免疫熒光法（IIF法）測定抗dsDNA抗體

短膜蟲的動基體內(nèi)含有大量純的

dsDNA，無其他抗原干擾，可用作基質(zhì)來測定抗dsDNA抗體。短膜蟲替換小鼠肝切片或肝印片或

Hep2，制成抗原基質(zhì)—抗dsDNA—抗人IgG·FITC,

陽性結(jié)果可見鞭毛一端的動基體顯示清晰的熒光。測定抗dsDNA抗體具有特異性強、敏感性高的優(yōu)點。36例：間接免疫熒光法（IIF法）短膜蟲的動基體內(nèi)含有大量純的

用ELISA間接法檢測抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體和抗核小體抗體。2.ELISA法37用ELISA間接法檢測抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳待檢血清按分子大小分開不同區(qū)帶

分離轉(zhuǎn)印NC膜上抗ENA與膜上相應(yīng)抗原帶結(jié)合抗人IgG·HRPNC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—顯色3.IBT法38SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳待檢血清按分子大小分開不同區(qū)帶

類風濕因子(rheumatoidfactor,RF):

是抗變性IgG的自身抗體，為19S的IgM，也可見7S的IgG和IgA。與人變性IgG結(jié)合，不與正常IgG發(fā)生凝集反應(yīng)。

RF出現(xiàn)在類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者中，約70%～

90%的血清中和約60%的滑膜液中可檢出IgG類RF；二、類風濕因子測定39類風濕因子(rheumatoidfactor,RF):IgG類抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，即發(fā)生變性；在炎癥過程中也可發(fā)生IgG變性，構(gòu)成自身抗原，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生各種抗IgG抗體；滑膜液中的IgG類RF與變性IgG結(jié)合形成中等大小的IC，比血清中IgM類RF更易致病。40IgG類抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，即發(fā)生變性；40（一）RF檢測方法1

RF檢測最常采用的試驗方法。

將IgG吸附在聚苯乙烯膠乳顆粒上作為診斷試劑，與待檢血清中的RF結(jié)合，出現(xiàn)膠乳凝集顆粒。但此法的靈敏度和特異性均不高，而且只能檢出血清中的IgM類RF。間接膠乳凝集試驗41（一）RF檢測方法1RF檢測最常采用的試驗方法。間2

將待檢血清稀釋成一定濃度，再加入定量變性IgG診斷試劑，立即用透射比濁或速率散射比濁儀測定血清中的RF。此法具有速度快、敏感性高（達ng/L水平）、精密度高（CV<5%）、穩(wěn)定性好、能定量分析的優(yōu)點，但仍局限在IgM類RF的檢測。

免疫比濁法422將待檢血清稀釋成一定濃度，再加入定量變性IgG診斷試3IgM、IgG和IgA類RF需要用RIA法或ELISA法等方法檢測，但前者有放射性污染，故臨床上多采用ELISA間接法或雙抗原夾心法進行測定。ELISA法433IgM、IgG和IgA類RF需要用RIA法或E（二）臨床應(yīng)用常見AID的RF陽性檢出率疾病RF（%）疾病RF（%）干燥綜合征95結(jié)節(jié)性多動脈炎50類風濕70～90系統(tǒng)性紅斑狼瘡30硬皮病/皮肌炎80混合性結(jié)締組織病25RF在診斷RA患者時并非特異的，也非唯一標準。慢性活動性肝炎及老年人均可有不同程度的陽性率。44（二）臨床應(yīng)用常見AID的RF陽性檢出率疾病RF（%）疾病R三、其他自身抗體測定自身抗體的類型、檢測方法及臨床意義自身抗體類型檢測方法臨床意義抗甲狀腺球蛋白抗體(A-TG)熒光免疫法、ELISA、RIA橋本甲狀腺炎抗甲狀腺過氧化物酶抗體,)ELISAGraves

病,橋本甲狀腺炎抗乙酰膽堿受體抗體(AchR-Ab)ELISA、RIA重癥肌無力抗平滑肌抗體(SMA)熒光免疫法、ELISA、RIA自身免疫性肝炎,慢性活動性肝炎,原發(fā)性膽汁性肝硬化抗線粒體抗體(AMA)熒光免疫法、ELISA、RIARA,SS,SLE,原發(fā)性膽汁性肝硬化,慢性活動性肝炎,持續(xù)性肝阻塞抗胃壁細胞抗體熒光免疫法惡性貧血抗胰島素抗體（IAA）ELISA胰島素依賴性糖尿病抗精子抗體（AsAb）ELISA、熒光免疫法不育癥,不孕癥抗紅細胞抗體直接凝集試驗、Coombs試驗新生兒溶血,自身免疫性溶血性貧血抗血小板抗體ELISA法、ABC-ELISA法原發(fā)性血小板減少性紫癜、輸血史抗心磷脂抗體（ACA）RIA、ELISASLE,血栓,自發(fā)性流產(chǎn),血小板減少抗腎小球基底膜抗體(GBM-Ab)熒光免疫法Goodpasture綜合征,狼瘡腎炎返回章目錄45三、其他自身抗體測定自身抗體的類型、檢測方法及臨床意義自身抗1.篩選試驗與確診性試驗的合理組合；2.結(jié)合臨床癥狀選擇性檢測相關(guān)的自身抗體；3.切忌盲目的全面檢測自身抗體。4.通常以抗核抗體作為篩選試驗，ANA在許多AID中可呈陽性。5.ANA陽性時，再進行針對特異性靶抗原成分的自身抗體的檢測，達到明確診斷的目的。第三節(jié)自身抗體的檢測實驗選擇的原則一、自身抗體檢測的一般原則461.篩選試驗與確診性試驗的合理組合；第三節(jié)自身抗體的檢測實二、實驗室方法的選擇及結(jié)果的確認IIF法篩選試驗

ANA抗dsDNAIB法ELISA法IFA法特異性實驗抗原基質(zhì)片(Hep-2細胞、小鼠肝印片/切片)，加入自身抗體后與抗原成分相結(jié)合，再與熒光標記的抗抗體結(jié)合，根據(jù)熒光在細胞上的著色部位進行定位分析。特異性純化抗原包被載體，檢測特異性自身抗體；特異性抗原不易純化或不明確，用ELISA法和IBT法等檢測自身抗體會有一定誤差。返回章目錄47二、實驗室方法的選擇及結(jié)果的確認IIF法篩選試驗ANA抗小結(jié)

自身免疫病是由于某種原因使自身免疫應(yīng)答過強或持續(xù)時間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常，所產(chǎn)生的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞對表達自身靶抗原的細胞和組織發(fā)動攻擊，導致?lián)p傷或功能障礙，并出現(xiàn)相應(yīng)臨床癥狀。48小結(jié)自身免疫病是由于某種原因使自身免疫應(yīng)答過強或持續(xù)

風濕病泛指影響骨、關(guān)節(jié)及周圍軟組織等一組疾病。結(jié)締組織病是指病變主要發(fā)生于結(jié)締組織，具有組織黏液樣水腫、纖維蛋白樣變性及壞死性血管炎等基本病理變化的一組疾病。自身免疫病的實驗室診斷主要依賴抗核抗體和類風濕因子等的測定，其臨床意義對不同自身免疫病的患者有區(qū)別，其表現(xiàn)是多樣性的。返回章目錄49風濕病泛指影響骨、關(guān)節(jié)及周圍軟組織等一組疾病。THANKYOUFORYOURATTENTION!返回總目錄50THANKYOU返回總目錄50第十五章

自身免疫性疾病的免疫學檢驗51第十五章1返回總目錄目錄

概述

1自身免疫性疾病的免疫學檢查

2自身抗體的檢測實驗選擇的原則

3小結(jié)452返回總目錄目錄概述1自身免疫性疾病的免疫學檢查2自

自身耐受(self-tolerance)

：正常情況下，免疫系統(tǒng)對宿主自身的組織和細胞不產(chǎn)生免疫應(yīng)答。自身免疫

(autoimmunity)：當某種原因使自身耐受

性破壞時，免疫系統(tǒng)就會對自身組織成分、細胞成分及其產(chǎn)物發(fā)生免疫應(yīng)答。第一節(jié)概述53自身耐受(self-tolerance)：正常情況下，免

自身免疫病(autoimmunedisease,AID)：是自身免疫應(yīng)答過強或持續(xù)時間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常，所產(chǎn)生的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞對表達自身靶抗原的細胞和組織發(fā)動攻擊，導致?lián)p傷或功能障礙，并出現(xiàn)相應(yīng)臨床癥狀。54自身免疫病(autoimmunedisease,AID)一、自身免疫病與風濕性疾病

風濕性疾病（rheumaticdiseases）泛指影響骨、關(guān)節(jié)及周圍軟組織等一組疾病，簡稱風濕病。55一、自身免疫病與風濕性疾病風濕性疾病（rheumatic結(jié)締組織病(connectivetissuedisease,CTD)

是指病變主要發(fā)生于結(jié)締組織，有組織黏液樣水腫、纖維蛋白樣變性及壞死性血管炎等基本病理變化的一組疾病。以往所指的結(jié)締組織病或膠原病是風濕性疾病的一部分，它們和風濕性疾病不可完全等同。

56結(jié)締組織病(connectivetissuediseas1.發(fā)生與感染、遺傳、性激素等因素有關(guān)，屬AID；2.結(jié)締組織及血管的慢性炎癥為其基本病理變化；3.病變可累及多系統(tǒng)、多器官；發(fā)病情況差異大，為異質(zhì)性疾??；5.以關(guān)節(jié)、肌肉、軟組織等疼痛為主要癥狀；6.血清中可查出多種自身抗體；7.對糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑藥物治療有療效；8.病程慢性、反復、進行性，最終可導致殘疾或死亡。風濕病的臨床特點571.發(fā)生與感染、遺傳、性激素等因素有關(guān)，屬AID；風濕病的臨二、自身免疫病的共同特征血中測到高效價的自身抗體/自身應(yīng)答性T淋巴細胞自身抗體/自身應(yīng)答性T淋巴細胞作用于表達自身抗原的組織細胞，造成其損傷或功能障礙動物實驗可復制與AID相似的動物模型，并能通過血清或致敏的淋巴細胞可使疾病被動轉(zhuǎn)移大多數(shù)自身免疫病是自發(fā)性或特發(fā)性的，外因可有一定影響

，病情的轉(zhuǎn)歸與自身免疫應(yīng)答強度相關(guān)有遺傳傾向，反復發(fā)作和慢性遷延，部分自身免疫性疾病易發(fā)于女性，應(yīng)用免疫抑制劑治療有效

58二、自身免疫病的共同特征血中測到高效價的自身抗體/自身應(yīng)答性三、自身免疫病的分類按自身抗原分類

器官特異性自身免疫性疾病器官非特異性自身免疫性疾病患者的病變常局限于某一特定的器官，由對器官的特異性抗原的免疫應(yīng)答引起全身性或系統(tǒng)性自身免疫性疾?。换颊叩牟∽兛梢娪诙喾N器官及結(jié)締組織（結(jié)締組織病或膠原?。?9三、自身免疫病的分類按自身抗原分類器官特異性自身免疫性疾器官特異性病名自身抗原橋本甲狀腺炎甲狀腺球蛋白和甲狀腺微粒體甲狀腺功能亢進(Graves病)TSH受體Addison病腎上腺皮質(zhì)細胞自身免疫性萎縮性胃炎胃壁細胞、內(nèi)因子潰瘍性結(jié)腸炎結(jié)腸黏膜細胞重癥肌無力乙酰膽堿受體交感性眼炎眼晶狀體蛋白胰島素依賴型糖尿病胰島β細胞胰島素抵抗型糖尿病胰島素受體原發(fā)性膽汁性肝硬化小膽管上皮細胞60器官特異性病名自身抗原橋本甲狀腺炎甲狀腺球蛋白和器官非特異性病名自身抗原系統(tǒng)性紅斑狼瘡細胞核成分、細胞漿成分類風濕性關(guān)節(jié)炎變性IgG、類風濕相關(guān)的核抗原干燥綜合征涎腺上皮細胞混合性結(jié)締組織病細胞核(RNP)自身免疫性溶血性貧血紅細胞特發(fā)性血小板減少性紫癜血小板特發(fā)性白細胞減少癥白細胞硬皮病細胞核蛋白、細胞核染色體著絲點多發(fā)性肌炎細胞核蛋白61器官非特異性病名自身抗原系統(tǒng)性紅斑狼瘡細胞核成分器官特異性和器官非特異性的特征性區(qū)別器官特異性器官非特異性自身抗體和病變具器官特異性自身抗體和病變無器官特異性極少量自身抗原與淋巴樣系統(tǒng)接觸大量自身抗原進入免疫系統(tǒng)實質(zhì)病變可能由Ⅳ變態(tài)反應(yīng)或自身抗體所致病變由抗原抗體復合物所致治療原則為控制代謝缺陷治療原則為抑制炎癥和抗體形成有發(fā)生器官內(nèi)癌癥的傾向有發(fā)生淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞腫瘤的傾向抗原與弗氏佐劑共同免疫動物可誘導產(chǎn)生器官特異性抗體動物被刺激后不產(chǎn)生抗體62器官特異性和器官非特異性的特征性區(qū)別器官特異性器官非特異性自分類疾病結(jié)締組織系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風濕性關(guān)節(jié)炎、混合性結(jié)締組織病內(nèi)分泌系統(tǒng)橋本甲狀腺炎、Graves病、Addison病、胰島素依賴性糖尿病消化系統(tǒng)萎縮性胃炎、潰瘍性胃炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化血液系統(tǒng)惡性貧血、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜心血管系統(tǒng)風濕性心肌炎泌尿系統(tǒng)腎小球腎炎呼吸系統(tǒng)特發(fā)性肺纖維化神經(jīng)系統(tǒng)重癥肌無力、多發(fā)性神經(jīng)炎皮膚蕁麻疹按發(fā)病部位的解剖系統(tǒng)分類63分類疾病結(jié)締組織系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風濕性關(guān)節(jié)炎、6414（一）自身抗原形成分子模擬四、自身免疫病的發(fā)病機制隱蔽抗原的釋放自身抗原改變65（一）自身抗原形成分四、自身免疫病的發(fā)病機制隱蔽抗原的釋放自多克隆激活（二）免疫系統(tǒng)發(fā)育和免疫調(diào)節(jié)異常胸腺骨髓功能異常Th1和Th2細胞功能失衡66多克隆激活（二）免疫系統(tǒng)發(fā)育和免疫調(diào)節(jié)異常胸腺（三）遺傳因素67（三）遺傳因素171.自身抗體的作用

（四）AID的病理損傷機制抗血細胞表面抗原的抗體681.自身抗體的作用（四）AID的病理損傷機制抗血細胞表面1.自身抗體的作用——抗細胞表面受體抗體

重癥肌無力691.自身抗體的作用——抗細胞表面受體抗體重癥肌無力抗細胞表面受體抗體毒性彌漫性甲狀腺腫（Graves?。┌l(fā)病機制示意圖70抗細胞表面受體抗體毒性彌漫性甲狀腺腫（Graves?。┌l(fā)病機自身抗體——抗核抗體腎小球、關(guān)節(jié)、皮膚和其它多種器官的毛細血管壁結(jié)合循環(huán)中的核抗原

多部位脈管炎

系統(tǒng)性紅斑狼瘡形成可溶性抗原—抗體IC

反復沉積1.自身抗體的作用：

自身抗體與相應(yīng)抗原形成的免疫復合物71自身抗體——抗核抗體腎小球、關(guān)節(jié)、皮膚和結(jié)合循環(huán)中的核抗原2.自身應(yīng)答性T淋巴細胞作用針對自身抗原發(fā)生免疫應(yīng)答的T細胞可引起組織損傷，這類疾病屬于Ⅳ型超敏反應(yīng)引起的疾病。

3.巨嗜細胞和NK細胞的作用巨噬細胞在AID的組織損傷中也起重要作用。巨噬細胞被細胞因子激活后，就具有細胞毒作用。

（四）AID的病理損傷機制返回章目錄722.自身應(yīng)答性T淋巴細胞作用（四）AID的病理損傷機制返回

抗核抗體（antinuclearantibody，ANA):

是以真核細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱；在某些因素作用下改變細胞核某些成分性質(zhì)，激發(fā)機體產(chǎn)生許多抗不同核成分的抗體；第二節(jié)自身免疫性疾病的免疫學檢查一、抗核抗體測定73抗核抗體（antinuclearantibody，ANAANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；ANA無器官特異性和種屬特異性；ANA主要存在于血清中；將檢出ANA作為AID存在的依據(jù)。74ANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；24

抗DNA抗體：抗dsDNA/抗nDNA、抗ssDNA/抗dDNA等抗組蛋白抗體(AHA)：抗H1、抗H2A、抗H2B、抗H3、抗H4抗體等

抗非組蛋白抗體：抗nRNP/抗U1RNP、抗Scl-70、抗SSA、抗Sm、抗SSB、抗Jo-1、抗Rib抗體、

AnuA、抗DNP、抗D’E多肽抗體、抗DM53抗體抗RANA抗體、抗著絲點、抗Ku抗體等

抗核仁抗體：抗PM-Scl抗體、抗Th/To抗體、抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗體等（一）ANA的類型和臨床意義

ANA譜75抗DNA抗體：抗dsDNA/抗nDNA、抗s①抗天然DNA(nativeDNA,nDNA)抗體，又稱抗雙鏈DNA(doublestrandedDNA,dsDNA)

抗體。②抗變性DNA(denaturedDNA,dDNA)

抗體，又稱抗單鏈DNA(singlestrandedDNA,ssDNA)抗體。對SLE有高特異性;SLE診斷標準之一。緩解期降低70%～90%SLE活動期增高藥物療效抗dsDNA抗體抗DNA抗體76①抗天然DNA(nativeDNA,nDNA)抗體，

抗組蛋白抗體（anti-histonicantibody,AHA）：由H1、H2A、H2B、H3和H4五個亞單位，各自都有特異性抗體；AHA檢出百分率抗dsDNA507090100藥物誘導性狼瘡只能檢出此SLEAHAAHA抗組蛋白抗體77抗組蛋白抗體（anti-histonicantibod

可提取性核抗原(extractablenuclearantigen,ENA)

是鹽水可提取性核抗原的總稱，是非組蛋白的核蛋白，屬酸性核蛋白抗原，由許多小分子量的RNA和多肽組成?？笶NA抗體78可提取性核抗原(extractablenuclear對風濕病有特異診斷價值的有以下七種：

①抗nRNP(nuclearRNP,nRNP)抗體；②抗Sm抗體；③抗SSA抗體；④抗SSB抗體；

⑤抗Scl-70抗體；⑥抗Jo-1抗體；

⑦抗核糖體抗體。79對風濕病有特異診斷價值的有以下七種：29抗DNP抗體（抗核蛋白抗體）：核蛋白(DNP)抗原由DNA和蛋白質(zhì)組成。DNP抗原有不溶性和可溶性兩種，可分別產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。檢出百分率抗DNP20406080SLE非活動期

SLE活動期抗不溶性DNP抗體抗DNP抗DNP100RA滑膜液中抗DNP抗可溶性DNP抗體抗DNP抗體80抗DNP抗體（抗核蛋白抗體）：核蛋白(DNP)抗原由DNA和

抗核小體抗體（anti-nucleosomeantibody，AnuA)

是細胞核染色質(zhì)的基本單位;

細胞凋亡而致核小體大量蓄積，誘導B細胞產(chǎn)生的AnuA是SLE

特異性的標志抗體?？筪sDNA抗體抗核小體抗體抗dsDNA和抗Sm陰性的SLE陽性率為60%～80%，特異性＞97%。抗核小體抗體81抗核小體抗體（anti-nucleosomeanti

常見AID的ANA陽性檢出率疾病ANA（%）疾病ANA（%）SLE≥95SS70～80MCTD≥95PM/DM30PSS85～95RA20～3082常見AID的ANA陽性檢出率疾病ANA（%）疾病ANA（%（二）ANA的檢測方法

將患者血清先進行稀釋，可以做定量試驗，在1:80稀釋仍呈陽性時，對SLE的診斷有較大的參考價值。形成胞核基質(zhì)—ANA—抗人Ig·FITC1.熒光免疫法83（二）ANA的檢測方法將患者血清先進行稀釋，可以做定量試驗抗核抗體核型與相關(guān)疾病核型熒光圖形抗體相關(guān)疾病周邊型核周環(huán)狀熒光抗dsDNASLE、慢活肝炎均質(zhì)型核呈均質(zhì)熒光抗DNA、AHA、AnuASLE、RA、PSS、慢性肝病斑點型核內(nèi)顆粒狀熒光抗ENAMCTD、SLE、PSS、SS、PM核仁型核仁有熒光抗核仁抗體PSS、雷諾現(xiàn)象、SLE著絲點型核漿細小相同顆粒熒光抗著絲點PSS、CREST綜合征84抗核抗體核型與相關(guān)疾病核型熒光圖形抗體相關(guān)疾病周邊型核周環(huán)狀均質(zhì)型抗核抗體核型著絲點型核仁型斑點型85均質(zhì)型抗核抗體核型著絲點型核仁型斑點型35例：間接免疫熒光法（IIF法）測定抗dsDNA抗體

短膜蟲的動基體內(nèi)含有大量純的

dsDNA，無其他抗原干擾，可用作基質(zhì)來測定抗dsDNA抗體。短膜蟲替換小鼠肝切片或肝印片或

Hep2，制成抗原基質(zhì)—抗dsDNA—抗人IgG·FITC,

陽性結(jié)果可見鞭毛一端的動基體顯示清晰的熒光。測定抗dsDNA抗體具有特異性強、敏感性高的優(yōu)點。86例：間接免疫熒光法（IIF法）短膜蟲的動基體內(nèi)含有大量純的

用ELISA間接法檢測抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體和抗核小體抗體。2.ELISA法87用ELISA間接法檢測抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳待檢血清按分子大小分開不同區(qū)帶

分離轉(zhuǎn)印NC膜上抗ENA與膜上相應(yīng)抗原帶結(jié)合抗人IgG·HRPNC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—顯色3.IBT法88SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳待檢血清按分子大小分開不同區(qū)帶

類風濕因子(rheumatoidfactor,RF):

是抗變性IgG的自身抗體，為19S的IgM，也可見7S的IgG和IgA。與人變性IgG結(jié)合，不與正常IgG發(fā)生凝集反應(yīng)。

RF出現(xiàn)在類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者中，約70%～

90%的血清中和約60%的滑膜液中可檢出IgG類RF；二、類風濕因子測定89類風濕因子(rheumatoidfactor,RF):IgG類抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，即發(fā)生變性；在炎癥過程中也可發(fā)生IgG變性，構(gòu)成自身抗原，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生各種抗IgG抗體；滑膜液中的IgG類RF與變性IgG結(jié)合形成中等大小的IC，比血清中IgM類RF更易致病。90IgG類抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，即發(fā)生變性；40（一）RF檢測方法1

RF檢測最常采用的試驗方法。

將IgG吸附在聚苯乙烯膠乳顆粒上作為診斷試劑，與待檢血清中的RF結(jié)合，出現(xiàn)膠乳凝集顆粒。但此法的靈敏度和特異性均不高，而且只能檢出血清中的IgM類RF。間接膠乳凝集試驗91（一）RF檢測方法1RF檢測最常采用的試驗方法。間2

將待檢血清稀釋成一定濃度，再加入定量變性IgG診斷試劑，立即用透射比濁或速率散射比濁儀測定血清中的RF。此法具有速度快、敏感性高（達ng/L水平）、精密度高（CV<5%）、穩(wěn)定性好、能定量分析的優(yōu)點，但仍局限在IgM類RF的檢測。

免疫比濁法922將待檢血清稀釋成一定濃度，再加入定量變性IgG診斷試3IgM、IgG和IgA類RF需要用RIA法或ELISA法等方法檢測，但前者有放射性污染，故臨床上多采用ELIS