病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理

章病毒感染的檢查方法與防治原則章病毒感染的檢查方法與防治原則1（優(yōu)選）章病毒感染的檢查方法與防治原則（優(yōu)選）章病毒感染的檢查方法與防治原則*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗?；蚬こ虂唵挝灰呙缂毎N類二倍體細胞（diploidcell）羊膜腔（amnioticcavity）病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集特點特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快細胞種類二倍體細胞（diploidcell）輸入含有特異性抗體的免疫血清、純化免疫球蛋白抗體或細胞因子等免疫制劑，使機體立即獲得特異性免疫力的過程。應用人群免疫情況的調查胞編碼病毒抗原，并通過細胞MHC分特點特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快（plaqueformationtest）EBV早期抗原抗體核酸雜交技術inhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定標本的采集與送檢

1.標本中常加入抗生素。2.低溫保存，盡快送檢。3.血清學標本兩份*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗。標本的采集與送檢二、病毒的分離與鑒定標本分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細胞培養(yǎng)病毒形態(tài)觀察光鏡電鏡包涵體病毒體CPETCID50,PFU二、病毒的分離與鑒定標分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細胞培養(yǎng)病毒形（一）病毒的分離培養(yǎng)1.動物接種應用尚無敏感細胞的病毒培養(yǎng)動物兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點結果易觀察，可建立動物模型缺點有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒（一）病毒的分離培養(yǎng)動物接種動物接種2.雞胚培養(yǎng)采用孵化914天的雞胚絨毛尿囊膜（allantocherion）痘苗病毒、人類皰疹病毒尿囊腔（allantoiccavity）接種部位流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔（amnioticcavity）流感病毒的初次分離卵黃囊（yolksac）嗜神經(jīng)病毒2.雞胚培養(yǎng)病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序復雜優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理3.細胞培養(yǎng)

單層細胞培養(yǎng)（monolayercellculture）懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）

原代細胞（primarycell）細胞種類二倍體細胞（diploidcell）傳代細胞系（continuouscellline）3.細胞培養(yǎng)病毒的細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)瓶單層細胞病毒的細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)瓶單層細胞

病毒增殖的指征

1.細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)

①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）；②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。病毒增殖的指征病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）采用孵化914天的雞胚@將編碼病毒某種抗原蛋白的外源基因，*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗。*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗。呼吸道合胞病毒感染細胞核酸擴增技術inhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集干擾現(xiàn)象（interference）pH變化減慢羊膜腔（amnioticcavity）原代細胞（primarycell）臨床診斷少用子結合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘麻疹病毒感染細胞呼吸道合胞病毒感染細胞形成多核巨細胞或稱融合細胞懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）形成包涵體(inclusionbody)形成包涵體(inclusionbody)腮腺炎病毒感染細胞2.紅細胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋紅細胞表面HA受體腮腺炎病毒感染細胞2.紅細胞吸附（hemadsorption紅細胞吸附（hemadsorption）②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；胞編碼病毒抗原，并通過細胞MHC分優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低導細胞免疫和抗體應答。病毒＋中和抗體病毒失去感染性細胞種類二倍體細胞（diploidcell）特點特異性高，抗體維持時間長（優(yōu)選）章病毒感染的檢查方法與防治原則病毒囊膜表面血凝素(HA)呼吸道合胞病毒感染細胞特點特異性高，抗體維持時間長3.干擾現(xiàn)象（interference）4.細胞代謝改變

細胞代謝變慢pH變化減慢紅細胞吸附（hemadsorption）3.干擾現(xiàn)象（in

（二）病毒的鑒定

病毒形態(tài)學鑒定病毒血清學鑒定

病毒分子生物學鑒定（二）病毒的鑒定子結合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體，使機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。細胞種類二倍體細胞（diploidcell）胞編碼病毒抗原，并通過細胞MHC分形成多核巨細胞或稱融合細胞④進行血清流行病學調查等特點特異性高，抗體維持時間長應用近期感染指標。核酸擴增技術導細胞免疫和抗體應答。懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）（三）病毒數(shù)量與感染性測定1.血凝試驗：病毒總量（活病毒＋死病毒）2.空斑形成試驗（plaqueformationtest）3.50％組織細胞感染量（50％tissuecultureinfectiousdose,TCID50）感染性病毒量子結合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘（三）病毒數(shù)量與感染性測定空斑試驗空斑試驗三、病毒感染的血清學診斷應用：①采取標本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進行血清流行病學調查等三、病毒感染的血清學診斷應用：1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體病毒失去感染性

特點特異性高，抗體維持時間長應用人群免疫情況的調查臨床診斷少用1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和

2.血凝抑制試驗（hemagglutinationinhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定

病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）

病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集（血凝抑制試驗）

2.血凝抑制試驗（hemagglutination3.補體結合試驗

（complementfixationtest）用已知病毒可溶性補體抗原檢測病人血清中相應的補體抗體特點特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快應用近期感染指標。3.補體結合試驗

（complementfixatio四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸）早期抗體檢測（IgM）四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結果（一）形態(tài)學檢查電鏡和免疫電鏡檢查普通光學顯微鏡檢查包涵體（一）形態(tài)學檢查電鏡和免疫電鏡檢查（二）病毒成分檢測1.病毒蛋白抗原檢測免疫標記技術2.病毒核酸檢測核酸擴增技術核酸雜交技術基因芯片技術基因測序（二）病毒成分檢測1.病毒蛋白抗原檢測即抗原的cDNA或mRNA與載體（如質懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）核酸擴增技術呼吸道合胞病毒感染細胞應用近期感染指標。④進行血清流行病學調查等②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；其特點與滅活疫苗類似。②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒嗜神經(jīng)病毒細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。（三）早期抗體檢測可診斷急性感染特異性IgM抗體孕婦感染風疹病毒EBV早期抗原抗體

即抗原的cDNA或mRNA與載體（如質（三）早期抗體檢測懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。血凝試驗：病毒總量（活病毒＋死病毒）TCID50,PFU流感病毒的初次分離優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低應用人群免疫情況的調查補體結合試驗

（complementfixationtest）粒DNA）重組直接注入體內(nèi)，使體細②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒特點特異性高，抗體維持時間長病毒囊膜表面血凝素(HA)第二節(jié)病毒感染的特異性預防懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）人工主動免疫(artificialactiveimmunization):將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體，使機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。主要用于預防人工主動免疫(artificialactiveimmu疫苗

第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗合成肽疫苗DNA疫苗轉基因植物疫苗疫第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理*載體疫苗利用非致病微生物做載體，將病毒的保護性抗原基因片段重組到載體微生物基因組中，用表達保護性抗原的微生物作為疫苗。載體疫苗是活疫苗，具有和減毒活疫苗相似的特點。

*載體疫苗@將編碼病毒某種抗原蛋白的外源基因，EBV早期抗原抗體將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體，使機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。可診斷急性感染體內(nèi)常帶有潛伏病毒基因工程亞單位疫苗EBV早期抗原抗體TCID50,PFU人工被動免疫(artificialpassiveimmunization)病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集特點特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快卵黃囊（yolksac）*亞單位疫苗

用化學方法裂解和提取而制成的病毒保護性抗原組份。

其特點與滅活疫苗類似。

@將編碼病毒某種抗原蛋白的外源基因，*亞單位疫苗基因工程亞單位疫苗*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗。*表達外源基因的系統(tǒng)細菌、酵母、哺乳動物細胞、昆蟲細胞等。*基因工程亞單位疫苗的安全性好，但免疫原性較差，需使用佐劑以提高其免疫原性。基因工程亞單位疫苗*核酸疫苗@將編碼病毒某種抗原蛋白的外源基因，即抗原的cDNA或mRNA與載體（如質粒DNA）重組直接注入體內(nèi)，使體細胞編碼病毒抗原，并通過細胞MHC分子結合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘導細胞免疫和抗體應答。@DNA疫苗；RNA疫苗。

*核酸疫苗人工被動免疫(artificialpassiveimmunization)

輸入含有特異性抗體的免疫血清、純化免疫球蛋白抗體或細胞因子等免疫制劑，使機體立即獲得特異性免疫力的過程。*免疫球蛋白

*細胞免疫制劑人工被動免疫(artificialpassiveimmu特點特異性高，抗體維持時間長動物兔、鼠、黑猩猩、猴等②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒病毒分子生物學鑒定輸入含有特異性抗體的免疫血清、純化免疫球蛋白抗體或細胞因子等免疫制劑，使機體立即獲得特異性免疫力的過程。免疫標記技術1.1.@將編碼病毒某種抗原蛋白的外源基因，人工被動免疫(artificialpassiveimmunization)pH變化減慢@DNA疫苗；第三節(jié)病毒感染的治療特點特異性高，抗體維持時間長第三節(jié)病毒感染的治療章病毒感染的檢查方法與防治原則章病毒感染的檢查方法與防治原則40（優(yōu)選）章病毒感染的檢查方法與防治原則（優(yōu)選）章病毒感染的檢查方法與防治原則*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗?；蚬こ虂唵挝灰呙缂毎N類二倍體細胞（diploidcell）羊膜腔（amnioticcavity）病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集特點特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快細胞種類二倍體細胞（diploidcell）輸入含有特異性抗體的免疫血清、純化免疫球蛋白抗體或細胞因子等免疫制劑，使機體立即獲得特異性免疫力的過程。應用人群免疫情況的調查胞編碼病毒抗原，并通過細胞MHC分特點特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快（plaqueformationtest）EBV早期抗原抗體核酸雜交技術inhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定標本的采集與送檢

1.標本中常加入抗生素。2.低溫保存，盡快送檢。3.血清學標本兩份*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗。標本的采集與送檢二、病毒的分離與鑒定標本分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細胞培養(yǎng)病毒形態(tài)觀察光鏡電鏡包涵體病毒體CPETCID50,PFU二、病毒的分離與鑒定標分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細胞培養(yǎng)病毒形（一）病毒的分離培養(yǎng)1.動物接種應用尚無敏感細胞的病毒培養(yǎng)動物兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點結果易觀察，可建立動物模型缺點有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒（一）病毒的分離培養(yǎng)動物接種動物接種2.雞胚培養(yǎng)采用孵化914天的雞胚絨毛尿囊膜（allantocherion）痘苗病毒、人類皰疹病毒尿囊腔（allantoiccavity）接種部位流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔（amnioticcavity）流感病毒的初次分離卵黃囊（yolksac）嗜神經(jīng)病毒2.雞胚培養(yǎng)病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序復雜優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理3.細胞培養(yǎng)

單層細胞培養(yǎng)（monolayercellculture）懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）

原代細胞（primarycell）細胞種類二倍體細胞（diploidcell）傳代細胞系（continuouscellline）3.細胞培養(yǎng)病毒的細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)瓶單層細胞病毒的細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)瓶單層細胞

病毒增殖的指征

1.細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)

①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）；②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。病毒增殖的指征病毒感染的檢查方法與防治原則課件整理懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）采用孵化914天的雞胚@將編碼病毒某種抗原蛋白的外源基因，*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗。*用基因工程表達的病毒蛋白抗原制成的疫苗。呼吸道合胞病毒感染細胞核酸擴增技術inhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集干擾現(xiàn)象（interference）pH變化減慢羊膜腔（amnioticcavity）原代細胞（primarycell）臨床診斷少用子結合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘麻疹病毒感染細胞呼吸道合胞病毒感染細胞形成多核巨細胞或稱融合細胞懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）形成包涵體(inclusionbody)形成包涵體(inclusionbody)腮腺炎病毒感染細胞2.紅細胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋紅細胞表面HA受體腮腺炎病毒感染細胞2.紅細胞吸附（hemadsorption紅細胞吸附（hemadsorption）②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；胞編碼病毒抗原，并通過細胞MHC分優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低導細胞免疫和抗體應答。病毒＋中和抗體病毒失去感染性細胞種類二倍體細胞（diploidcell）特點特異性高，抗體維持時間長（優(yōu)選）章病毒感染的檢查方法與防治原則病毒囊膜表面血凝素(HA)呼吸道合胞病毒感染細胞特點特異性高，抗體維持時間長3.干擾現(xiàn)象（interference）4.細胞代謝改變

細胞代謝變慢pH變化減慢紅細胞吸附（hemadsorption）3.干擾現(xiàn)象（in

（二）病毒的鑒定

病毒形態(tài)學鑒定病毒血清學鑒定

病毒分子生物學鑒定（二）病毒的鑒定子結合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體，使機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。細胞種類二倍體細胞（diploidcell）胞編碼病毒抗原，并通過細胞MHC分形成多核巨細胞或稱融合細胞④進行血清流行病學調查等特點特異性高，抗體維持時間長應用近期感染指標。核酸擴增技術導細胞免疫和抗體應答。懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）（三）病毒數(shù)量與感染性測定1.血凝試驗：病毒總量（活病毒＋死病毒）2.空斑形成試驗（plaqueformationtest）3.50％組織細胞感染量（50％tissuecultureinfectiousdose,TCID50）感染性病毒量子結合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘（三）病毒數(shù)量與感染性測定空斑試驗空斑試驗三、病毒感染的血清學診斷應用：①采取標本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進行血清流行病學調查等三、病毒感染的血清學診斷應用：1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體病毒失去感染性

特點特異性高，抗體維持時間長應用人群免疫情況的調查臨床診斷少用1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和

2.血凝抑制試驗（hemagglutinationinhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定

病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）

病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集（血凝抑制試驗）

2.血凝抑制試驗（hemagglutination3.補體結合試驗

（complementfixationtest）用已知病毒可溶性補體抗原檢測病人血清中相應的補體抗體特點特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快應用近期感染指標。3.補體結合試驗

（complementfixatio四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸）早期抗體檢測（IgM）四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結果（一）形態(tài)學檢查電鏡和免疫電鏡檢查普通光學顯微鏡檢查包涵體（一）形態(tài)學檢查電鏡和免疫電鏡檢查（二）病毒成分檢測1.病毒蛋白抗原檢測免疫標記技術2.病毒核酸檢測核酸擴增技術核酸雜交技術基因芯片技術基因測序（二）病毒成分檢測1.病毒蛋白抗原檢測即抗原的cDNA或mRNA與載體（如質懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）核酸擴增技術呼吸道合胞病毒感染細胞應用近期感染指標。④進行血清流行病學調查等②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；其特點與滅活疫苗類似。②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒嗜神經(jīng)病毒細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。（三）早期抗體檢測可診斷急性感染特異性