2022年醫(yī)學(xué)專題-禽流感豬瘟等動物疫病免疫失敗原因分析整理

禽流感豬瘟等疫病(yìbìng)免疫失敗原因分析江蘇省淮安市動物疫病預(yù)防控制中心副主任江蘇聯(lián)合(liánhé)職業(yè)技術(shù)學(xué)院淮安生物工程分院教授蔣法成研究員第一頁，共四十四頁。

免疫是指機(jī)體(jītǐ)的一種生理性保護(hù)功能。它包括機(jī)體(jītǐ)對異物(病原生物性或非病原生物性的)的識別、排除或消滅等一系列過程。免疫分類：①非特異性免疫是生物在種系發(fā)展過程中不斷與病原微生物斗爭中形成的，并可遺傳給后代的一種免疫功能，它是與機(jī)體的組織結(jié)構(gòu)和生理機(jī)能密切相關(guān)的。②特異性免疫是機(jī)體在后天受內(nèi)外環(huán)境因素的刺激而獲得的免疫功能，它能識別再次接觸的相同抗原，并作出相應(yīng)的反應(yīng)第二頁，共四十四頁。

免疫應(yīng)答的基本(jīběn)過程1.抗原識別階段：是抗原通過某一途徑進(jìn)入機(jī)體，并被免疫細(xì)胞識別、遞呈和誘導(dǎo)細(xì)胞活化的開始時期，又稱感應(yīng)階段。2.淋巴細(xì)胞活化階段：是接受抗原刺激的淋巴細(xì)胞活化和增殖的時期，也稱為致敏狀態(tài)。3.抗原清除階段：是免疫效應(yīng)細(xì)胞和抗體發(fā)揮作用將抗原滅活并從體內(nèi)(tǐnèi)清除的時期，也稱效應(yīng)階段。這時如果誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的抗原還沒有消失，或者再次進(jìn)入致敏的機(jī)體，效應(yīng)細(xì)胞和抗體就會與抗原發(fā)生一系列反應(yīng)。第三頁，共四十四頁?？贵w的形成(xíngchéng)過程4第四頁，共四十四頁?？贵w(kàngtǐ)產(chǎn)生的規(guī)律

●初次反應(yīng)：當(dāng)抗原第一次進(jìn)入機(jī)體時，需經(jīng)一定的潛伏期（1-2周）才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時間也較短。●再次反應(yīng)：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后，開始時，原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合，發(fā)生中和反應(yīng)，可使體內(nèi)部分抗體抵消。但是，在抗原的持續(xù)刺激下，抗體含量會迅速大量增加，最后可比初次反應(yīng)產(chǎn)生多幾倍到十幾倍，并且(bìngqiě)在體內(nèi)留存的時間亦較長。

●回憶反應(yīng)：由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過一定時間后會逐漸消失。此時若再次接觸抗原，記憶B淋巴細(xì)胞可以快速激活產(chǎn)生抗體。5第五頁，共四十四頁。獲得(huòdé)免疫力的途徑主動免疫感染（比如返飼）接種疫苗被動免疫(bèidònɡm(xù)iǎnyì)

母源抗體直接接種抗體（免疫球蛋白，如血清制品、卵黃抗體、破傷風(fēng)抗毒素）6第六頁，共四十四頁。

疫苗方面的問題：疫苗本身質(zhì)量差（抗原含量低）疫苗滅活不夠，毒力仍然很強稀釋液或佐劑使用不當(dāng)不當(dāng)?shù)幕旌厦庖咭呙鐑Υ鏈囟?wēndù)/方法不當(dāng)，導(dǎo)致疫苗失效疫苗菌毒株選擇不當(dāng)，血清型不符運輸保存不當(dāng)疫苗過期失效等為何會出現(xiàn)(chūxiàn)免疫失敗?第七頁，共四十四頁。

動物方面的問題：動物接種前已處在疾病感染潛伏期動物對疫苗產(chǎn)生無效抗體（血清型不符）動物存在免疫抑制的干擾母源抗體的干擾動物處于強應(yīng)急狀態(tài)(zhuàngtài)下動物在產(chǎn)生抗體前已受強毒攻擊為何會出現(xiàn)免疫(miǎnyì)失敗?第八頁，共四十四頁。

操作方面(fāngmiàn)的問題：接種劑量不當(dāng)接種方式不當(dāng)使用方法不當(dāng)(活苗)打飛針消毒不徹底選用針頭不當(dāng)不合理的免疫程序為何會出現(xiàn)(chūxiàn)免疫失敗?第九頁，共四十四頁。

疫苗保存不當(dāng)：造成疫苗效價下降，免疫原性變差疫苗正確保存溫度：滅活油苗：2-8℃，國產(chǎn)弱毒凍干苗-15℃以下，保存期可達(dá)1-2年。如弱毒凍干苗長時間在室溫下放置，特別是在炎熱夏季(xiàjì)，很快會失效。實踐證明，豬瘟兔化弱毒凍干苗，在0℃-8℃只能保存3個月，若放在25℃環(huán)境，至多1周即失去效力。同時滅活油苗反復(fù)凍融其免疫力大為降低。免疫(miǎnyì)失敗原因第十頁，共四十四頁。

運輸不當(dāng)：運輸時未進(jìn)行充分冷藏，特別是在高溫天氣，往往使疫苗很快失效。

疫苗稀釋液選擇不當(dāng)：多數(shù)疫苗稀釋時可用生理鹽水或蒸餾水，個別疫苗需用專用稀釋液。若需用專用稀釋液的疫苗用生理鹽水或蒸餾水稀釋，則疫苗的效價就會降低(jiàngdī)，甚至完全失效。

第十一頁，共四十四頁。

使用分層的油劑疫苗或者未充分搖勻稀釋后的活疫苗在使用時未進(jìn)行冷藏和在規(guī)定時間內(nèi)用完：常溫下疫苗稀釋后最好在90分鐘內(nèi)用完。根據(jù)試驗，疫苗稀釋后使用的時間與免疫力產(chǎn)生的保護(hù)率存在負(fù)相關(guān)性，已知多數(shù)活疫苗稀釋的時間超過3小時(xiǎoshí)再接種，對機(jī)體的保護(hù)率幾乎為零。第十二頁，共四十四頁。

疫苗滅活不夠：有的疫苗毒株人工(réngōng)減毒不夠，若免疫時疫苗毒力太強，不但起不到免疫保護(hù)作用，而且接種后還會引起發(fā)病，導(dǎo)致免疫失敗。第十三頁，共四十四頁。

選用(xuǎnyòng)針頭不當(dāng)：如注射小豬群使用孔徑大的針頭，藥液溢出；注射大、中豬群使用的針頭過短，低于脂肪厚度，疫苗不能直接進(jìn)入肌肉層，停留在皮下脂肪內(nèi)，不能發(fā)揮抗原的效力。第十四頁，共四十四頁。

注射消毒不當(dāng)(bùdānɡ)：如注射部位涂擦酒精、碘酊過多，或使用5%以上的碘酊消毒皮膚，這對活疫苗有破壞作用；包裹注射針頭外的酒精棉花濕度過大，酒精滲進(jìn)針孔破壞活疫苗活力。使用其它化學(xué)消毒劑處理過的注射器或針頭如果有殘留的消毒劑也會使弱毒苗滅活。第十五頁，共四十四頁。

血清型不符：

有些病原含有多個(duōɡè)血清型，如禽流感、豬大腸桿菌病、鏈球菌等，其病原的血清型多，給防疫造成一定的困難，因此，選擇相應(yīng)的疫苗毒株是取得理想免疫效果的關(guān)鍵。在血清型多又不了解為何種血清型的情況下，應(yīng)選用多價苗。第十六頁，共四十四頁。

母源抗體(kàngtǐ)的影響：

由于各種疫苗在種畜禽中的廣泛使用，可能使種畜禽的母源抗體水平提高，若接種過早，當(dāng)疫苗病毒注入幼畜體內(nèi)時，會被母源抗體中和，從而影響疫苗免疫力的產(chǎn)生。

第十七頁，共四十四頁。

免疫劑量不準(zhǔn)：免疫劑量原則上必須按照說明書劑量為準(zhǔn)，量不足不能激發(fā)肌體的免疫反應(yīng)，量太多會產(chǎn)生免疫麻痹(mábì)而使免疫力受到抑制。疫苗稀釋方法不當(dāng)：從零下十幾度的冰箱中取出的凍干苗應(yīng)與稀釋液一同在冰袋上放置一段時間，盡可能縮小與稀釋液的溫差，以免由于溫度驟升使疫苗中致弱的微生物死亡，從而降低免疫效力。第十八頁，共四十四頁。

疫苗使用方法不當(dāng)：

滅活疫苗內(nèi)可能含有能滅活其它弱毒苗的防腐劑，因此在同時混合使用滅活和弱毒疫苗，有可能導(dǎo)致弱毒苗失效。用活菌疫苗免疫的同時使用抗生素類藥物會影響免疫力的產(chǎn)生：表現(xiàn)為用疫苗的同時對飲水消毒；飼料中添加抗生素類藥物；緊急免疫的同時用抗生素藥物進(jìn)行防治。盲目同時注射多種疫苗：主要表現(xiàn)為兩種疫苗混合注射或經(jīng)不同途徑(tújìng)同時接種幾種不同的疫苗或間隔時間太短。

第十九頁，共四十四頁。

早期感染：

接種時畜群體內(nèi)已潛伏強毒病原微生物感染，或由于接種人員及接種用具消毒不嚴(yán)帶入強毒病原微生物。應(yīng)激因素的影響(yǐngxiǎng)：

如饑餓、寒冷、過熱、擁擠、捕捉、混群、斷奶、運輸、噪音、保定、通風(fēng)不良等強應(yīng)激因素的刺激，會導(dǎo)致畜禽血漿皮質(zhì)醇濃度顯著升高，抑制機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，從而抑制豬群的免疫功能。

第二十頁，共四十四頁。

動物免疫抑制性原因：

病原性免疫抑制：禽流感，馬立克，法氏囊炎，雞傳染性貧血，呼腸孤病毒，禽白血病等；豬肺炎霉形體，偽狂犬病病毒，豬瘟病毒，豬流行性感冒，藍(lán)耳病毒，圓環(huán)病毒等；

營養(yǎng)性因素(yīnsù)：維生素E及硒不足或維生素A缺乏會導(dǎo)致淋巴器官的萎縮。

有毒物質(zhì)：如黃曲霉毒素、赭（zhě）曲霉毒素、重金屬等。

藥物使用：如地米、利巴韋林等第二十一頁，共四十四頁。

赭曲霉毒素是由多種生長在糧食（小麥、玉米、大麥、燕麥、黑麥、大米和黍類等）、花生(huāshēnɡ)、蔬菜（豆類）等農(nóng)作物上的曲霉和青霉產(chǎn)生的。動物攝入了霉變的飼料后，這種毒素也可能出現(xiàn)在豬和母雞等的肉中。赭曲霉毒素主要侵害動物肝臟與腎臟。這種毒素主要是引起腎臟損傷，大量的毒素也可能引起動物的腸黏膜炎癥和壞死。還在動物試驗中觀察到它的致畸作用第二十二頁，共四十四頁。

腎上腺皮質(zhì)激素類藥物：常用的有地塞米松等。它們對免疫反應(yīng)(fǎnyìng)的許多環(huán)節(jié)均有影響。主要是抑制巨噬細(xì)胞對抗原的吞噬和處理；也阻礙淋巴細(xì)胞DNA合成和有絲分裂，破壞淋巴細(xì)胞，使外周淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少，并損傷漿細(xì)胞，從而抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)和體液免疫反應(yīng)。

利巴韋林：反復(fù)使用會影響禽流感、新城疫抗體的產(chǎn)生第二十三頁，共四十四頁。

病毒苗對的活菌苗影響：將病毒苗與活菌苗混合使用時，由于病毒苗中加有抗生素可殺死活菌苗，從而導(dǎo)致活菌苗免疫(miǎnyì)失敗。第二十四頁，共四十四頁。

病原微生物之間的干擾作用：同時免疫兩種或多種疫苗往往會產(chǎn)生干擾現(xiàn)象，干擾的原因可能有兩個(liǎnɡɡè)方面，一是兩種病毒感染的受體相似或相同，會產(chǎn)生競爭性抑制作用。二是一種病毒感染后產(chǎn)生干擾素，會影響另一種病毒的復(fù)制。

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禽呼腸孤病毒感染是雞的一種傳染性疾病，可引起雞多種疾病，包括病毒性關(guān)節(jié)炎、矮小(ǎixiǎo)綜合征、呼吸道疾病、腸道疾病和所謂吸收不良綜合征。第二十六頁，共四十四頁。

品種(pǐnzhǒng)差異：從進(jìn)化上看，水禽免疫系統(tǒng)的進(jìn)化水平較高。調(diào)查資料表明，注射相同疫苗后，鵝、鴨免疫效果較雞群好；不同雞群品種也有差異，蛋雞免疫效果最好、地方肉雞次之、白羽肉雞最差第二十七頁，共四十四頁。

不合理的免疫程序，必然發(fā)生免疫失?。?/p>

如給懷孕母豬接種弱毒疫苗，部分疫苗有可能造成胎盤感染（弱毒苗有可能進(jìn)入豬胎兒體內(nèi)，胎兒的免疫系統(tǒng)未成熟，導(dǎo)致(dǎozhì)胎兒免疫耐受或帶毒感染），哺乳仔豬過早的注射疫苗也會由于母源抗體的干擾而減低效果。第二十八頁，共四十四頁。

有些蛋雞場、種雞場制定的免疫程序，在蛋雞開產(chǎn)后就不進(jìn)行任何免疫接種了，這是非常危險的。大多數(shù)疫苗廠生產(chǎn)的禽流感疫苗，免疫保護(hù)期都在3～5個月以內(nèi)。據(jù)報道，目前許多蛋雞群在300～400日齡發(fā)生以腫頭和產(chǎn)蛋下降、下軟皮蛋為主要特征的疾病，主要是由于抗體下降到保護(hù)水平以下造成的低致病性禽流感(H9)所致的，與新城疫病毒混合(hùnhé)感染時造成的損失更大。第二十九頁，共四十四頁。

疫苗質(zhì)量不高或接種劑量不夠

疫苗質(zhì)量問題由于H5抗原生產(chǎn)時受到病毒本身的性質(zhì)限制，抗原含量通常不高，因此接種高致病性禽流感疫苗后，抗體水平往往達(dá)不到保護(hù)水平或保護(hù)期太短（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所SPF雞研究中心,金維江，王建清，張世棟，等.商品肉雞抗體消長規(guī)律及免疫程序的探討[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，6:51-52；新疆畜牧廳獸醫(yī)局，新疆獸醫(yī)研究所，劉英豪，陸桂麗，沙依蘭古麗，等.商品代從肉雞接種禽流感疫苗的免疫效力觀察[J].中國(zhōnɡɡuó)獸藥雜志，2008，42(6):8-11）第三十頁，共四十四頁。

注射劑量不夠研究(yánjiū)表明，皮下注射0.3-0.4ml/只沒有注射0.5ml/只效果好；

注射部位背部皮下注射不如頸部皮下注射效果好第三十一頁，共四十四頁。

免疫空白期與抗體水平不均一目前常用的免疫程序，在雛雞母源抗體下降到保護(hù)水平以下和疫苗(yìmiáo)誘導(dǎo)的抗體達(dá)到保護(hù)水平之間，有1-2周的免疫空白期，此期間如果環(huán)境中有流感病毒，則會感染。目前肉仔雞常見的20日齡左右出現(xiàn)的支氣管栓塞即屬于此類感染。疫苗免疫注射如果不仔細(xì)，雞群中可能出現(xiàn)漏免的雞只，或者注射的疫苗劑量不足，也可能導(dǎo)致少數(shù)雞只免疫失敗第三十二頁，共四十四頁。

母源抗體干擾禽流感疫苗與抗體結(jié)合，加速吞噬消化過程，縮短免疫期，延緩免疫產(chǎn)生，一般建議母源抗體下降到5個滴度(Hl≤5log2)左右實施(shíshī)免疫效果好。第三十三頁，共四十四頁。

針對禽流感免疫失敗有人建議采取以下措施：1有專家建議開發(fā)H9禽流感活疫苗和自家疫苗

從政府層面上，應(yīng)該進(jìn)行H9禽流感弱毒疫苗的開發(fā)。免疫弱毒疫苗進(jìn)行基礎(chǔ)免疫和黏膜免疫，是目前禽流感疫苗免疫效果不佳的最主要原因。鑒于目前H9禽流感已在全國大面積流行，不應(yīng)該再顧忌流感疫苗基因擴(kuò)散的問題(wèntí)了，應(yīng)及早研制安全有效的溫和型禽流感弱毒疫苗。第三十四頁，共四十四頁。

各生物制品研究(yánjiū)、生產(chǎn)廠家也應(yīng)該更多的開展H9禽流感地方株滅活苗的開發(fā)，用于局部地區(qū)的雞群免疫第三十五頁，共四十四頁。

2增加禽流感滅活疫苗的接種量與接種次數(shù)在一定范圍(fànwéi)內(nèi)，疫苗接種效果與接種劑量成正比。實踐證明，接種0.5ml/只比接種0.3-0.4ml/只效果好；接種3次比接種1或2次效果好。尤其應(yīng)注意，開產(chǎn)后每3-5個月必須強化免疫一次。首免日齡：根據(jù)大多數(shù)研究資料，目前蛋雞首免日齡以10日齡為好，肉雞首免日齡以4-7日齡為好第三十六頁，共四十四頁。

3免疫調(diào)節(jié)劑的使用使用免疫調(diào)節(jié)劑可以增加疫苗免疫效果。佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系司興奎，為篩選出對鴨接種(jiēzhòng)禽流感疫苗后有免疫促進(jìn)作用的沒有調(diào)節(jié)劑，對接種(jiēzhòng)禽流感H5亞型油乳劑滅活苗后的鴨，分別注射或投喂禽源干擾素、人源干擾素、黃芪多糖、益生素、人參皂苷等免疫調(diào)節(jié)劑，結(jié)果表明，飼喂人參皂苷或注射禽源干擾素對接種禽流感的試驗鴨有明顯的促進(jìn)作用第三十七頁，共四十四頁。

其中(qízhōng)，人參皂苷在首免后3周發(fā)揮促進(jìn)作用，禽源干擾素約在首免后5周表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作