中藥化學(xué)成分提取分離方法中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥所 邊寶林

中藥化學(xué)成分提取分離方法

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥所

邊寶林日本學(xué)者：（長(zhǎng)井長(zhǎng)義）天然藥物化學(xué)研究定義：1、將藥品（生藥）改變成為利于人體吸收的形式。2、對(duì)有效成分不明的草根、樹(shù)皮進(jìn)行分析，明確有效成分。3、通過(guò)成分的改造、合成、創(chuàng)造新藥。中藥有效成分的研究基于以上內(nèi)容，突出中醫(yī)用藥理論，繼承、發(fā)揚(yáng)中醫(yī)藥寶庫(kù)，造福人類(lèi)。1、已有數(shù)千年的用藥史（經(jīng)驗(yàn)和理論）2、飲片用藥的特點(diǎn)揭示中藥有效性的物質(zhì)基礎(chǔ)

Salicin（柳の皮）Khellin、Ammi、visnaga（セリ科）解熱冠脈擴(kuò)張作用

morphine鎮(zhèn)痛劑ergotamine麥角アルヵロィド中藥化學(xué)成分提取分離方法常用化學(xué)成分提取分離方法大孔吸附樹(shù)脂分離有效成分的應(yīng)用分離實(shí)例一、有效成分的提?、迦軇┨崛》á嫠魵庹麴s法㈢升華法㈣超臨界流體萃取法㈤其他方法㈠溶劑提取法溶劑提取法系選擇適當(dāng)溶劑將中草藥中的化學(xué)成分從藥材中提取出來(lái)。遵循“相似相溶”規(guī)律。天然藥物中的化學(xué)成分在溶劑中的溶解度直接與溶劑性質(zhì)有關(guān)。溶劑可分為水、親水性有機(jī)溶劑和親脂性有機(jī)溶劑。一些常見(jiàn)溶劑的脂性的強(qiáng)弱順序如下：

石油醚>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>丙酮>乙醇>甲醇>水天然藥物化學(xué)成分可通過(guò)結(jié)構(gòu)估計(jì)它們的極性。㈠溶劑提取取法甙類(lèi)的分分子中結(jié)結(jié)合有糖糖分子，，羥基數(shù)數(shù)目多，，能表現(xiàn)現(xiàn)強(qiáng)親水水性，而而甙元?jiǎng)t則屬于親親脂性化化合物，，而生物物堿鹽，，能夠離離子化，，加大了了極性，，就變成成了親水水性化合合物。鞣鞣質(zhì)是多多羥基衍衍生物，，列為親親水性化化合物。。油脂、、揮發(fā)油油、蠟、、脂溶性性色素都都是強(qiáng)親親脂性成成分。萜類(lèi)、甾甾體等脂脂環(huán)類(lèi)及及芳香類(lèi)類(lèi)化合物物因?yàn)闃O極性較小小，易溶溶于氯仿仿、乙醚醚等親脂脂性溶劑劑中；糖苷、氨氨基酸等等成分極極性較大大，易溶溶于水及及含水醇醇中；酸性、堿堿性及兩兩性化合合物，因因?yàn)榇嬖谠跔顟B(tài)（（分子或或離子形形式）隨隨溶液而而異，故故溶解度度將隨pH而改改變。㈡水蒸氣蒸蒸餾法水蒸氣蒸蒸餾法只只適用于于具有揮揮發(fā)性、、能隨水水蒸氣蒸蒸餾而不不被破壞壞，與水水不發(fā)生生反應(yīng)，，且難溶溶或不溶溶于水的的成分的的提取。。天然藥藥物中的的揮發(fā)油油、某些些小分子子生物堿堿如麻黃黃堿、煙煙堿、檳檳榔堿以以及某些些小分子子的酚性性物質(zhì)如如牡丹酚酚等的提提取可采采用水蒸蒸氣蒸餾餾法。㈢升華法某些固體物物質(zhì)如水楊楊酸、苯甲甲酸、樟腦腦等受熱在在低于其熔熔點(diǎn)的溫度度下，不經(jīng)經(jīng)過(guò)熔化就就可直接轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化為蒸氣氣，蒸氣遇遇冷后又凝凝結(jié)成固體體稱(chēng)為升華華。天然藥藥物中有一一些成分具具有升華性性質(zhì)，能利利用升華法法直接中藥藥材中提取取出來(lái)。但但天然藥物物成分一般般可升華的的很少。㈣超臨界流流體萃取法法超臨界流體是處于臨界溫度（Tc）和臨界壓力（Pc）以上，介于氣體和液體之間的流體。這種流體同時(shí)具有液體和氣體的雙重特性。可以作為超臨界流體的物質(zhì)：CO2、NH3、C2H6、CCL2F2、C7H16等，實(shí)際應(yīng)用CO2較多。㈣超臨界流流體萃取法法CO2超臨界流體體對(duì)物質(zhì)溶溶解作用有有一定選擇擇性，主要要與物質(zhì)的的極性、沸沸點(diǎn)、分子子量相關(guān)密密切。極性性較低的化化合物易萃萃取，化合合物極性基基團(tuán)多，萃萃取較難。。對(duì)此，近近年來(lái)采用用再超臨界界流體萃取取中加入夾夾帶劑的方方法。夾帶劑是在在被萃取溶溶質(zhì)和超臨臨界流體組組成的二元元系統(tǒng)中加加入的第三三組分，從從而改善原原來(lái)溶質(zhì)的的溶解度。。常用的夾夾帶劑：甲醇、乙醇醇、丙酮等等㈣超臨界流流體萃取法法超臨界流體體萃取中藥藥成分的主主要優(yōu)點(diǎn)：：⑴可以在在接近室溫溫下進(jìn)行工工作，防止止某些對(duì)熱熱不穩(wěn)定的的成分被破破壞或逸散散。如：通通過(guò)對(duì)丹參參超臨界萃萃取物的高高效液相色色譜法分析析表明，丹丹參酮ⅡA含量為43.55%，以丹丹參酮為3.29%，丹參酮酮Ⅰ為7.60%，，與普通方方法相比總總丹參酮類(lèi)類(lèi)成分得到到較好富集集；再有人人對(duì)丹參中中活性成分分的超臨界界二氧化碳碳萃取工藝藝進(jìn)行研究究，現(xiàn)已第第1夾帶劑劑進(jìn)行萃取取得丹參酮酮類(lèi)活性部部位，再用用第2夾帶帶劑繼續(xù)萃萃取，得丹丹參素和原原兒茶醛等等酚酸類(lèi)有有效成分。。⑵萃取過(guò)過(guò)程中幾乎乎不用有機(jī)機(jī)溶劑，萃萃取物中無(wú)無(wú)有機(jī)物溶溶劑殘殘留，對(duì)對(duì)環(huán)境無(wú)公公害⑶提取效效率高，節(jié)節(jié)約能耗等等組織破碎法法某些對(duì)熱不不穩(wěn)定成分分又可溶于于水時(shí)，，可用組織織破碎提取取法壓榨法某些成分在在新鮮原料料中含量較較高或新鮮鮮原料富含含肉質(zhì)可用用壓榨法微波提取法法二、有效成成分的分離離與精制化學(xué)成分分分離精制常常用方法原原理㈠根據(jù)物質(zhì)溶溶解度差別別進(jìn)行分離離㈡根據(jù)物質(zhì)在在兩相溶劑劑中的分配配比不同進(jìn)進(jìn)行分離（逆流色譜譜技術(shù)）㈢根據(jù)物質(zhì)的的吸附性差差別進(jìn)行分分離（ODS與與大孔吸附附樹(shù)脂技術(shù)術(shù)）㈣根據(jù)物質(zhì)分分子大小差差異進(jìn)行分分離（膜分離與與凝膠技術(shù)術(shù)）㈠根據(jù)物質(zhì)溶溶解度差別別進(jìn)行分離離1、利用溫度度不同引起起溶解度的的改變2、改變混合合溶劑的極極性3、調(diào)節(jié)溶溶液的pH值，改變變分子的存存在狀態(tài)4、沉淀法法5、鹽析法㈡根據(jù)物質(zhì)在在兩相溶劑劑中的分配配比不同進(jìn)進(jìn)行分離分配系數(shù)數(shù)（K））兩種相互互不能任任意混溶溶的溶劑劑（如氯氯仿與水水）如置置分液漏漏斗中充充分振搖搖，放置置后即可可分成兩兩相。此此時(shí)如果果其中含含有溶質(zhì)質(zhì)，則溶溶質(zhì)在兩兩相溶劑劑中的分分配比（（K）在在一定溫溫度及壓壓力下為為一常數(shù)數(shù)，可以以下式表表示：K=CU/CLK：分配系系數(shù)；CU：溶質(zhì)在在上相溶溶劑中的的濃度；；CL：溶質(zhì)在在下相溶溶劑中的的濃度。。㈡根據(jù)物質(zhì)質(zhì)在兩相相溶劑中中的分配配比不同同進(jìn)行分分離1、液-液液萃取法法2、逆流流連續(xù)萃萃取法3、逆流流分配法法（CounterCurrentDistribution，CCD））4、液滴逆逆流色譜譜法（DCCC）5、高速逆流流色譜法法（HSCCC）6、氣液分分配色譜譜（GC或GLC）7、液-液液分配色色譜（LC或LLC））1、液-液液萃取法法利用混合合物中各各成分在在兩種互互不相溶溶的溶劑劑中分配配系數(shù)的的不同而而達(dá)到分分離的方方法。萃取時(shí)如如果各成水提取液中的有效成分是親脂性的物質(zhì)，一般多用親脂性有機(jī)溶劑，如苯、氯仿或乙醚進(jìn)行兩相萃?。挥行С煞质瞧谟H水性的物質(zhì)，需用弱親脂性的溶劑，例如乙酸乙酯、丁醇等。提取黃酮類(lèi)成分多用乙酸乙脂和水的兩相萃取。提取親水性強(qiáng)的皂甙則多選用正丁醇、異戊醇和水作兩相萃取。2、高速逆逆流色譜譜(High-speedCountercurrentChromatography，HSCCC)大多數(shù)色色譜法都都需要有有固相載載體某種種形式的的選擇性性吸附作作用。在在應(yīng)用固固相載體體色譜分分離中，，往往會(huì)會(huì)存在不不同程度度的不可可逆吸附附，造成成被分離離樣品的的損失，，尤其在在分離微微量樣品品時(shí)受到到限制。。高速逆流流色譜，，是近十十年迅速速發(fā)展起起來(lái)的新新型液——液分配配色譜技技術(shù)。與與其它液液相色譜譜分離方方法相比比．它不不使用固固相載體體作固定定相，被被分離物物質(zhì)在HSCCC的應(yīng)用1.HSCCC的的分離效效率與氣氣相色譜譜和高效效液相色色譜等技技術(shù)相比比較，前前者不適適宜用它它完成組組成復(fù)雜雜的混合合物的全全譜分離離分析。。而其對(duì)對(duì)于樣品品的預(yù)處處理?xiàng)l件件較放松松及回收收率高，，制備量量大，特特別適用用于特定定部位和和特定組組分的分分離純化化與制備備。HSCCC的應(yīng)用用2.制備備中藥化化學(xué)對(duì)對(duì)照品品3.中草藥藥化學(xué)學(xué)對(duì)照照品應(yīng)應(yīng)具有有高度度均勻勻性，，量值值準(zhǔn)確確性和和良好好穩(wěn)定定性，，其純純度要要求很很高。。制備備型HPLC曾曾是國(guó)國(guó)外常常用的的主要要手段段。但但是其其設(shè)備備和載載體填填料價(jià)價(jià)格很很高．．對(duì)樣樣品前前期處處理要要求嚴(yán)嚴(yán)格，，存在在不可可逆吸吸附，，溶劑劑用量量大的的缺點(diǎn)點(diǎn)。因因此致致力于于HSCCC分分離、、統(tǒng)化化、制制備中中草藥藥有效效成分分對(duì)照照品的的研究究和產(chǎn)產(chǎn)業(yè)化化，具具有現(xiàn)現(xiàn)實(shí)意意義。。3、高效效液相相色譜譜(HPLC)中藥的的成分分非常常復(fù)雜雜，以以往常常用的的薄層層色譜譜等方方法因因其精精密度度、準(zhǔn)準(zhǔn)確度度、靈靈敏度度、重重現(xiàn)性性差而而不能能滿(mǎn)足足中藥藥現(xiàn)代代化發(fā)發(fā)展的的需要要。高高效液液相色色譜正正是以以其穩(wěn)穩(wěn)定、、可靠靠、高高效的的特點(diǎn)點(diǎn)成為為中藥藥研究究的最最重要要的分分析方方法。。中藥藥質(zhì)量量的控控制、、天然然藥物物化學(xué)學(xué)成分分的分分離及及分析析測(cè)定定等。。3、高高效效液液相相色色譜譜(HPLC)檢測(cè)測(cè)器器是是液液相相色色譜譜的的三三大⑴靈敏度高；⑵對(duì)溫度變化和流量波動(dòng)不敏感；⑶死體積小，不使峰額外地?cái)U(kuò)展；⑷對(duì)溶劑無(wú)響應(yīng)，能用于梯度洗脫操作⑸線性范圍寬；⑹對(duì)所有樣品都有響應(yīng)；⑺對(duì)樣品無(wú)破壞性。常用用的的HPLC檢檢測(cè)測(cè)器器（1））紫外外-可見(jiàn)見(jiàn)分分光光檢檢測(cè)測(cè)器器（2））示示差差（3）二極管陣列檢測(cè)器（4）蒸發(fā)光檢測(cè)器（5）質(zhì)譜檢測(cè)器（6）C、H核磁檢測(cè)器高效效液液相相色色譜譜的的應(yīng)應(yīng)用用中藥化學(xué)學(xué)成分分分析成分分離離制備(1)特特別適適用于極極性較大大的成分分(如皂皂苷類(lèi))分離；；(2)先先以分分析色譜譜摸索分分離條件件；(3)樣樣品一一定要用用流動(dòng)相相溶解，，再以濾濾膜過(guò)濾濾。㈢根據(jù)物質(zhì)質(zhì)的吸附附性差別別進(jìn)行分分離在天然有有機(jī)化合合物分離離及精制制工作中中，吸附附現(xiàn)象利利用得十十分廣泛泛。其中中又以固固-液吸吸附用得得最多，，其分：：物理吸附附(表面面吸附，，physicaladsorption)：：以硅膠、氧氧化鋁及及活性炭炭為吸附附劑化學(xué)吸附附（chemicaladsorption））半化學(xué)吸吸附（semichemicaladsorption）：：聚酰胺胺層析1、物理吸吸附液-固物物理吸附附色譜是是運(yùn)用較較多的一一種方法法，特別別適用于于很多中中等分子子量的樣樣品（分分子量小小于1，，000的低揮揮發(fā)性樣樣品）的的分離，，尤其是是脂溶性性成分。。一般不不適用于于高分子子量樣品品如蛋白白質(zhì)、多多糖或離離子型親親水性化化合物等等的分離離。吸附層析析的分離離效果，，決定于于吸附劑劑、溶劑劑和被分分離化合合物的性性質(zhì)這三三個(gè)因素素。⑴吸附劑①硅膠②氧化鋁活性炭吸附劑的特特點(diǎn)硅膠和氧化化鋁為極性性吸附劑，，有以下特特點(diǎn)：①對(duì)極極性物質(zhì)具具有較強(qiáng)的的親和能力力。故同為為溶質(zhì)，極極性強(qiáng)者將將被優(yōu)先吸吸附。②溶劑劑極性越弱弱，則吸附附劑對(duì)溶質(zhì)質(zhì)將表現(xiàn)出出越強(qiáng)的吸吸附能力。。溶劑極性性增強(qiáng)，則則吸附劑對(duì)對(duì)溶質(zhì)的吸吸附能力即即隨之減弱弱。③溶質(zhì)質(zhì)即使被硅硅膠、氧化化鋁吸附，，但一旦加加入極性較較強(qiáng)的溶劑劑時(shí)，又可可被后者置置換洗脫下下來(lái)。吸附劑的特特點(diǎn)活性炭因?yàn)闉槭欠菢O性性吸附劑，，故與硅膠膠、氧化鋁鋁相反，對(duì)對(duì)非極性物物質(zhì)具有較較強(qiáng)的親和和能力，在在水中對(duì)該該類(lèi)物質(zhì)表表現(xiàn)出強(qiáng)的的吸附能力力。溶劑極性降降低，則活活性炭對(duì)該該類(lèi)物質(zhì)的的吸附能力力也隨之降降低。故從從活性炭上上洗脫被吸吸附物質(zhì)時(shí)時(shí)，洗脫溶溶劑的洗脫脫能力將隨隨溶劑極性性的減弱而而增強(qiáng)。⑵溶劑洗脫劑的選選擇，須根根據(jù)被分離離物質(zhì)與所所選用的吸吸附劑性質(zhì)質(zhì)這兩者結(jié)結(jié)合起來(lái)加加以考慮。。在用極性性吸附劑進(jìn)進(jìn)行層析時(shí)時(shí)，當(dāng)被分分離物質(zhì)為為弱極性物物質(zhì)，一般般選用弱極極性溶劑為為洗脫劑；；被分離物物質(zhì)為強(qiáng)極極性成分，，則須選用用極性溶劑劑為洗脫劑劑。如果對(duì)對(duì)某一極性性物質(zhì)用吸吸附性較弱弱的吸附劑劑（如以硅硅藻土或滑滑石粉代替替硅膠），，則洗脫劑劑的極性亦亦須相應(yīng)降降低。⑶被分離物質(zhì)質(zhì)的性質(zhì)被分離的物物質(zhì)與吸附附劑，洗脫脫劑共同構(gòu)構(gòu)成吸附層層析中的三三個(gè)要素，，彼此緊密密相連。在在指定的吸吸附劑與洗洗脫劑的條條件下，各各個(gè)成分的的分離情況況，直接與與被分離物物質(zhì)的結(jié)構(gòu)構(gòu)與性質(zhì)有有關(guān)。對(duì)極極性吸附劑劑而言，成成分的極性性大，吸附附性強(qiáng)。2、吸附薄層色譜薄層層析是是一種簡(jiǎn)便便、快速、、微量的層層析方法。。一般將吸吸附劑撒布布到平面如如玻璃片上，形成一一薄層進(jìn)行行層析時(shí)，，即稱(chēng)薄層層層析。（（硅膠、聚聚酰胺等））針對(duì)某些性性質(zhì)特殊的的化合物的的分離與檢檢出，有時(shí)時(shí)需采用一一些特殊薄薄層。特殊薄層①熒光薄層②絡(luò)合薄薄層③酸堿薄薄層和PH緩沖薄層層薄層層析法法應(yīng)用①化學(xué)成分的的預(yù)試②化學(xué)成分的的鑒定③探索索柱層分離離的條件3、吸附柱色色譜（柱層⑴吸附劑的用用量一般為樣品品量的30～60倍倍。樣品極極性較小、、難以分離離者，吸附附劑用量可可適當(dāng)提高高到樣品量量的100～200倍。據(jù)此此可選擇適適當(dāng)規(guī)格的的色譜管，，實(shí)驗(yàn)室中中常用色譜譜管的規(guī)格格如下所示示，其高度度與直徑比比（h/d）約為（（15∶1）～（20：1））。柱色譜用的的硅膠及氧氧化鋁通常常以100～200目或200～300目為為宜，或甚甚至直接采采用薄層色色譜用規(guī)格格，其分離離效果可以以大大提高高。3、吸附柱色色譜⑵洗脫劑的選選擇，以TLC摸索索洗脫條件件裝柱，濕濕法裝柱（（以起始洗洗脫劑拌勻勻裝柱）或或干法裝柱柱。3（3）樣品品的預(yù)處理理能直接溶于于洗脫劑的的樣品用適適量洗脫劑劑溶解樣品品，盡可能能少，以利利樣品在吸吸附劑柱上上形成狹窄窄的原始譜譜帶。不能溶解于于洗脫劑的的樣品，則則將用能使使之溶解的的溶劑溶解解后，再用用少量吸附附劑拌勻，，并減壓抽抽干溶劑或或在60℃℃下加熱揮揮盡溶劑，，置真空干干燥器中減減壓干燥或或直接減壓壓抽干、研研粉后再小小心鋪在吸吸附劑柱上上。3、吸附柱色色譜（4）洗脫脫用溶劑的的極性宜逐逐步增加，，跳躍不能能太大。實(shí)踐中多用用混合溶劑劑，并通過(guò)過(guò)巧妙調(diào)節(jié)節(jié)比例以改改變極性，，達(dá)到梯度度洗脫分離離物質(zhì)的目目的。一般般混合溶劑劑中強(qiáng)極性性溶劑的影影響比較突突出，故不不可隨意將將極性差別別很大的兩兩種溶劑組組合在一起起使用。3、吸附柱色色譜（5）為避避免發(fā)生化化學(xué)吸附，，酸性物質(zhì)質(zhì)宜用硅膠膠、堿性物物質(zhì)則宜用用氧化鋁進(jìn)進(jìn)行分離。。硅膠、氧化化鋁用適當(dāng)當(dāng)方法處理理成中性時(shí)時(shí)，情況會(huì)會(huì)有所緩解解。通常在在分離酸性性（或堿性性）物質(zhì)時(shí)時(shí)，洗脫溶溶劑中分別別加入適量量醋酸（或或氨、吡啶啶、二乙胺胺），?？煽墒盏椒乐怪雇衔?、促促進(jìn)分離的的效果。4、聚酰胺吸吸附色譜法法聚酰胺（poliamide）吸附屬屬于氫鍵吸吸附，是一一種用途十十分廣泛的的分離方法法，極性物物質(zhì)與非極極性物質(zhì)均均可適用，，但特別適適合分離酚5、大孔吸附附樹(shù)脂大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂是一種種具有多孔孔立體結(jié)構(gòu)構(gòu)人工合成成的聚合物物吸附劑，，具有較好好的吸附性性能。它的的吸附作用用是通過(guò)表表面吸附、、表面電性性或形成氫氫鍵。大孔樹(shù)脂吸吸附分離技技術(shù)是采用用特殊的吸吸附劑，選選擇地吸附附其中的有有效成分，，去除無(wú)效效成分的一一種提取精精制的新工工藝。⑴大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂的性質(zhì)質(zhì)大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂多為白白色的球狀狀顆粒．粒度多為20—60目，通常分為為非極性和和極性?xún)纱蟠箢?lèi)，根據(jù)據(jù)極性大小小還可分為為弱極性、、中等極性性和強(qiáng)極性性。常用的為苯苯乙烯型和和丙烯腈型型，在樹(shù)脂脂合成時(shí)根根據(jù)需要引入極性基基團(tuán)則成為為極性樹(shù)脂脂從而增強(qiáng)強(qiáng)吸附能力力。大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂的理化化性質(zhì)穩(wěn)定定，不溶于酸、、堿及有機(jī)機(jī)溶劑。對(duì)有機(jī)物物的選擇性性較好，不不受無(wú)機(jī)鹽鹽類(lèi)及強(qiáng)離離子低分子子化合物存存在的影響響。⑵大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂的分離離原理吸附性范德華引力力或生成氫氫鍵的結(jié)果果。篩選原理本身多孔性性結(jié)構(gòu)所決決定。由于吸附和和篩選原理理，有機(jī)化化合物根據(jù)據(jù)吸附力的的不同及分分子量的大大小，在大大孔吸附脂脂上經(jīng)一定定的溶劑洗洗脫而分開(kāi)開(kāi)。⑵大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂的分離離原理有機(jī)物與無(wú)無(wú)機(jī)物的分分離（離子交換樹(shù)樹(shù)脂）一般很容易易將二者分分離，在中中藥成份的的提取中，，此特征可可使提取物物中的重金金屬和灼燒燒灰分降至至要求的范范圍內(nèi)。⑵大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂的分離離原理解離物與非非解離物的的分離吸附樹(shù)脂對(duì)對(duì)有機(jī)解離離物與非解解離物的吸吸附能力有有很大差異異，因此可可將二者分分離，如有有機(jī)酸在高高PH值成成鹽，很難難被吸附，，因此在堿堿性條件下下可把有機(jī)機(jī)酸分離出出來(lái)，生物物堿在酸性性介質(zhì)中可可以成鹽，，因而能通通過(guò)調(diào)節(jié)PH值進(jìn)行行分離。⑵大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂的分離離原理一般有機(jī)物物與強(qiáng)水溶溶性物質(zhì)的的分離一般有機(jī)物物，包括大大多數(shù)中藥藥有效成分分，是指有有一定的水水溶性，但但溶解度不不大的物質(zhì)質(zhì)，這些物物質(zhì)容易被被樹(shù)脂吸附附。強(qiáng)水溶溶性物質(zhì)如如低級(jí)醇類(lèi)、、低級(jí)胺類(lèi)類(lèi)、糖及多多糖，多數(shù)數(shù)氨基酸、、肽類(lèi)、蛋蛋白質(zhì)等，難被普通通吸附樹(shù)脂脂吸附，用用普通樹(shù)脂脂可很容易易地將此兩兩類(lèi)物質(zhì)分分離。（3）大孔孔吸附樹(shù)脂脂分離條件件的確立1、樹(shù)脂的的選擇首先，要根根據(jù)被分離離化合物的的分子體積積的大小通通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)確定適當(dāng)當(dāng)孔徑的樹(shù)樹(shù)脂。其次，要根根據(jù)分子中中是否含有有酚羥基、、羧基或堿堿性氮原子子來(lái)確定樹(shù)樹(shù)脂的型號(hào)號(hào)和分離條條件。⑷大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂分離條條件的確立立2、洗脫液液的選擇對(duì)非極性大大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂，洗脫脫劑極性越越小，洗脫脫能力越強(qiáng)強(qiáng)。對(duì)中等等極性大孔孔樹(shù)脂和極極性較大的的化合物來(lái)來(lái)說(shuō)，則用用極性較大大的洗脫劑劑為佳。根據(jù)吸附力力強(qiáng)弱選用用不同的洗洗脫劑及濃濃度。為達(dá)達(dá)到滿(mǎn)意的的效果，可可通過(guò)幾種種洗脫劑濃濃度的比較較來(lái)確定最最佳洗脫濃濃度。實(shí)際工作中中甲醇、乙醇醇、丙酮應(yīng)用較多。。⑸大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂在中藥藥生產(chǎn)中應(yīng)應(yīng)用的優(yōu)點(diǎn)點(diǎn)1、縮小劑劑量，提高高制劑的內(nèi)內(nèi)在質(zhì)量大孔吸附樹(shù)樹(shù)脂處理可可減少提取取物中的雜雜質(zhì)，提高高效成分的的含量，使使制劑劑量量減小，有有利于制成成現(xiàn)代劑型型的中藥制制劑，并便便于質(zhì)量控控制。⑸大孔吸附樹(shù)脂脂在中藥生產(chǎn)產(chǎn)中應(yīng)用的優(yōu)優(yōu)點(diǎn)2、減小產(chǎn)品品的吸濕性傳統(tǒng)的提取方方法所提的中中成藥大部分分具有較強(qiáng)的的吸潮性，是是中藥生產(chǎn)及及儲(chǔ)藏中長(zhǎng)期期存在的問(wèn)題題。而經(jīng)大孔孔吸附樹(shù)脂處處理可有效去去除吸潮成分分，增強(qiáng)產(chǎn)品品的穩(wěn)定性。。3、有效去除除重金屬既保證了患者者的用藥安全全，同時(shí)也解解決了中藥重重金屬超標(biāo)的的難題，為中中藥進(jìn)入國(guó)際際市場(chǎng)創(chuàng)造了了條件。再生能力強(qiáng)⑹大孔吸附樹(shù)脂脂在中藥生產(chǎn)產(chǎn)中的應(yīng)用⑴活性成成分的提取分分離如皂甙（人參參總皂甙、蒺蒺藜總皂昔））、黃酮（葛葛根總黃酮、、山楂總黃酮酮、淫羊藿總總黃酮）、內(nèi)內(nèi)酯、生物堿堿等化合物。⑹大孔吸附樹(shù)脂脂在中藥生產(chǎn)產(chǎn)中的應(yīng)用⑵質(zhì)量標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)制定（樣品的前處處理）除去干擾成分分，如金向群群等在用薄層層掃描法測(cè)定定益壽永真口口服液中人參參皂甙Rg1的含量時(shí)，，用YPR——II型大孔孔吸附樹(shù)脂對(duì)對(duì)樣品進(jìn)行處處理，70％％乙醇的洗脫脫液即為含人人參皂甙Rg1的流分，，由于去除了了人參皂甙Rg1的色譜譜位置的干擾擾成分，可進(jìn)進(jìn)行薄層掃描描來(lái)確定人參參皂苛Rg1的含量，為為復(fù)方中的人人參皂甙Rg1的含量測(cè)測(cè)定提供了一一個(gè)簡(jiǎn)便可行行的方法。⑺大孔吸附樹(shù)脂脂的處理市售大孔吸附附樹(shù)脂一般含含有未聚合的的單體、致孔孔劑（多為長(zhǎng)長(zhǎng)碳鏈的脂肪肪醇類(lèi)）、分分散劑和防腐腐劑等雜質(zhì)，，使用前必須須經(jīng)過(guò)處理。。處理方法是：：采用乙醇濕濕法裝柱，隨隨用乙醇在柱柱上作流動(dòng)清清洗，并不時(shí)時(shí)檢查流出的的乙醇，直至至流出的乙醇醇液與水混合合不呈現(xiàn)白色色乳濁現(xiàn)象即即可，然后用用大量蒸餾水水洗去乙醇。。⑻大孔吸附樹(shù)脂脂柱色譜樣品一般用水水溶液上柱。。洗脫時(shí)根據(jù)據(jù)吸附作用強(qiáng)強(qiáng)弱不同選用用不同濃度的的甲醇、乙醇醇等含水溶劑劑，直至純的的甲醇、乙醇醇，乃至丙酮酮、乙酸乙酯酯等。對(duì)非極極性大孔吸附附樹(shù)脂，洗脫脫溶劑極性越越小，洗脫能能力越強(qiáng)。對(duì)對(duì)于中等極性性的大孔吸附附樹(shù)脂和極性性較大的化合合物來(lái)說(shuō)，則則以用極性較較大的溶劑為為宜。㈣根據(jù)物質(zhì)分子子大小差異進(jìn)進(jìn)行分離天然有機(jī)化合合物分子大小小各異，中藥藥的化學(xué)成分分非常復(fù)雜，，通常含有無(wú)無(wú)機(jī)鹽、生物物堿、氨基酸酸和有機(jī)酸、、酚類(lèi)、酮類(lèi)類(lèi)、皂昔、甾甾族和萜類(lèi)化化合物以及蛋蛋白質(zhì)、多糖糖、粘液質(zhì)、、鞣質(zhì)、淀粉粉、纖維素、、無(wú)機(jī)鹽等。。相對(duì)分子質(zhì)量量的分布很寬寬，從幾十到到幾百萬(wàn)。故可據(jù)此進(jìn)進(jìn)行分離。表表1列出了部部分中藥所含含主要成分的的相對(duì)分子質(zhì)質(zhì)量范圍。部分中藥主要要成分的相對(duì)對(duì)分子質(zhì)量㈣根據(jù)物質(zhì)分子子大小差異進(jìn)進(jìn)行分離一般來(lái)講，高高相對(duì)分子質(zhì)質(zhì)量物質(zhì)主要要是膠體和纖纖維素等非藥藥效成分或藥藥效較低的成成分，藥物有效部位位的相對(duì)分子子質(zhì)量一般較較小，僅有幾幾百到幾千道道爾頓。㈣1、凝膠過(guò)濾法法2、膜分離法3、超濾法4、超速離心心法凝膠過(guò)濾法（（gelfiltration））也叫凝膠滲透透色譜法（gelpermeationchromatography）、、分子篩過(guò)濾濾（molecularsievefiltration）、排排阻色譜(exclusionchromatography））。利用分子篩分分離物質(zhì)的一一種方法。⑴凝膠過(guò)濾法分分離原理葡聚糖凝膠在在水中膨脹成成球形顆粒，，具有三維空空間的網(wǎng)狀結(jié)結(jié)構(gòu)。由于凝凝膠網(wǎng)孔半徑徑的限制，大大分子將不能能滲入凝膠顆顆粒內(nèi)部（即即被排阻在凝凝膠粒子外部部），故在顆顆粒間隙移動(dòng)動(dòng)，并隨溶劑劑一起從柱底底先行流出；；小分子因可可自由滲入并并擴(kuò)散到凝膠膠顆粒內(nèi)部，，故通過(guò)色譜譜柱阻阻力增增大、流速邊邊緩，將較晚晚流出。樣品混合物中中各個(gè)成分因因分子大小各各異，滲入至至凝膠顆粒內(nèi)內(nèi)部的程度也也不盡相同，，故在經(jīng)歷一一段時(shí)間流動(dòng)動(dòng)并達(dá)到動(dòng)態(tài)態(tài)平衡后，即即按分子由大大到小順序先先后流出并得得到分離。⑵凝膠的種類(lèi)與與性質(zhì)①葡聚糖凝膠（（SephadexG））②羥丙基葡聚糖糖凝膠（SephadexLH-20）③丙烯酰胺凝膠膠（Bio-GelP）④瓊脂糖糖凝膠（SepharoseBio-GelA）⑤羧甲基基交聯(lián)葡聚糖糖凝膠（SP-Sephadex））⑥苯胺乙乙基交聯(lián)葡聚聚糖凝膠（QAe-Sephadex）①葡聚糖凝膠由平均分子量