特定蛋白課件

石家莊腎病醫(yī)院特色檢驗之——尿蛋白系列檢驗

概述尿（Urine），又稱小便，是人類和脊椎動物為了新陳代謝的需要，經(jīng)泌尿系統(tǒng)由尿路排出體外的液體排泄物。尿液分析（Urinalysis）是指“用目測、理學(xué)、化學(xué)、顯微鏡及其他儀器（各種尿分析儀、滲透壓計等）對尿液標(biāo)本進行分析，以達到對泌尿、循環(huán)、肝、膽、內(nèi)分泌等疾病進行診斷、療效觀察及預(yù)后判斷等目的。”

——中華檢驗醫(yī)學(xué)大辭典尿NGAL—新的腎損傷標(biāo)志物尿NGALNGAL--中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白NGAL作為一種新型的分泌蛋白，與腎臟存在著密切的關(guān)系,是一種新的腎損傷標(biāo)志物。尿NGAL預(yù)測慢性腎病(CKD)的進展

CKD患者尿NGAL水平顯著高于正常人群，并與腎小球濾過率(GFR)呈密切負相關(guān)，而sCr與GFR的關(guān)聯(lián)程度不及NGAL。因此，CKD患者NGAL水平不僅是優(yōu)于sCr反映CFR下降的指標(biāo)，更是評價CKD患者腎臟損傷程度的標(biāo)志物。但CKD患者尿NGAL增高幅度不及AKI患者。尿NGAL狼瘡腎病尿NGAL是優(yōu)于抗dsDNA抗體滴度的狼瘡腎病診斷指標(biāo)。有資料顯示，當(dāng)尿NGAL臨界值為13.6ng/mL時，診斷敏感性和特異性分別為89%、72%。

尿NGAL多囊腎在常染色體顯性多囊腎病中，檢測尿NGAL濃度能夠評估腎臟病變嚴(yán)重程度。尿NGAL心腎綜合征心腎綜合征是一種心臟和腎臟的病理生理紊亂的綜合征，即由一個器官的功能不全導(dǎo)致的另一個器官的功能不全，死亡率高，國外已有學(xué)者提出，可聯(lián)合應(yīng)用生物學(xué)標(biāo)志物BNP/NT-proBNP和NGAL共同診斷CRS，以改善患者預(yù)后，降低死亡率。內(nèi)容概述尿蛋白電泳特定尿蛋白尿酶檢測尿滲透壓檢測尿蛋白電泳尿蛋白電泳能根據(jù)尿蛋白不同組分，依其分子量不同，將蛋白尿分為生理性蛋白尿（未檢出蛋白帶或僅限白蛋白淡染區(qū)帶）、腎小球性蛋白尿（中分子或中高分子型蛋白區(qū)帶）、腎小管性蛋白尿（低分子型蛋白區(qū)帶）及混合性蛋白尿（低、中、高型蛋白區(qū)帶），有助于腎臟疾病的早期診斷，對腎臟損傷程度及損傷部位的判斷有較好的價值。電泳原理生理性蛋白尿腎小球性蛋白尿混合性蛋白尿內(nèi)容概述尿蛋白電泳特定尿蛋白尿酶檢測尿滲透壓檢測白蛋白1-微球蛋白2-巨球蛋白2-微球蛋白IgGkappa輕鏈lambda輕鏈總蛋白

轉(zhuǎn)鐵蛋白

白蛋白IgAIgGIgM總蛋白2-巨球蛋白MenuurineCSF特定蛋白在臨床診斷中的應(yīng)用優(yōu)點以往尿蛋白測定多是采用化學(xué)比色法，靈敏度低。隨著檢驗技術(shù)的發(fā)展，尿液蛋白質(zhì)同血漿及其他體液中的蛋白質(zhì)一樣，可用現(xiàn)代免疫學(xué)測定方法測定。免疫測定是利用抗原抗體反應(yīng)檢測標(biāo)本中微量物質(zhì)的分析方法，其特點一是特異性強，一種穩(wěn)定抗原是與其相應(yīng)的抗體反應(yīng)，另一個特點是敏感度高可測定ng水平。尿液特定蛋白臨床意義mAlb是糖尿病誘發(fā)腎小球微血管病變早期的客觀指標(biāo)。用于評估糖尿病患者發(fā)生腎并發(fā)癥的危險度。高血壓性腎損傷的早期標(biāo)志，并可評估高血壓的療效。妊娠誘發(fā)高血壓腎損傷的監(jiān)測。區(qū)分腎小球和腎小管損傷。注意事項①運動后尿白蛋白排出量可增加，應(yīng)在相對安靜狀態(tài)下采集尿液。②盡管微量白蛋白是糖尿病腎病的一個早期診斷指標(biāo)，但僅根據(jù)微量白蛋白尿并不能完全確診，需反復(fù)監(jiān)測。尿轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白是在肝內(nèi)合成的，為轉(zhuǎn)運Fe3+的主要蛋白，其分子量與白蛋白相近，直徑大小也相似（TF3.9nm，白蛋白ALB3.6nm）。但由于TF的負電荷比ALB少，當(dāng)腎小球電荷發(fā)生損害時，TF比ALB更容易漏出。尿轉(zhuǎn)鐵蛋白尿轉(zhuǎn)鐵蛋白是一項反應(yīng)腎小球濾過膜損傷的靈敏指標(biāo)。腎小球損傷發(fā)生時，尿中TF的排出量增加早于mALB。對于早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎臟病更為敏感。但尿中TF濃度和ALB相比很低，檢測離散度大，在PH≤4時，易降解，在糖尿病腎病的早期診斷和監(jiān)測中應(yīng)聯(lián)合mALB。尿IgGIgG是血清中含量最多的一種蛋白，相對分子量160000，正常情況下，IgG不宜通過腎小球基底膜，當(dāng)尿中出現(xiàn)大量IgG等大分子蛋白時，說明腎小球基底膜已喪失選擇功能。尿IgG對膜性腎病預(yù)后有重要價值。當(dāng)>250mg/d時，預(yù)后不良。尿β2-微球蛋白是分子量為11800的小分子蛋白，可以自由通過腎小球濾過膜，但幾乎全在近曲小管以胞飲的形式攝取，故正常尿中β2-MＧ濃度很低

尿β2-微球蛋白⑴是評價近端小管功能的敏感指標(biāo)，并且能反映近端小管損傷的程度，當(dāng)腎小管的重吸收減少0.01，尿中β2-MG的排出量就會增加30倍左右。⑵鑒別上、下尿路感染。⑶監(jiān)測腎移植后排異反應(yīng)。⑷糖尿病腎臟疾病的早期診斷。⑸某些腫瘤和免疫性疾病（如：多發(fā)性骨髓瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡）血中β2-MG升高，引起溢出性蛋白尿。α1-微球蛋白α1-微球蛋白，分子量33000，可以自由通過腎小球濾過膜，幾乎全部在近端小管被重吸收和降解。尿α1-微球蛋白在酸性尿中較穩(wěn)定，尿中的濃度也遠高于其他低分子量蛋白質(zhì)，常與B2-MG聯(lián)合測定，并有取代B2-MG的趨勢，并常與尿酶聯(lián)合分析，用于評價腎小管的重吸收功能，(如：糖尿病、藥物或化學(xué)因子、感染等誘發(fā)的TIN的診斷監(jiān)測），也用于腎移植后排異反應(yīng)的觀察。α2巨球蛋白α2巨球蛋白是一種大分子蛋白，正常情況下不能被腎小球基底膜濾過，尿中含量甚微。在腎后性疾病時，則因巨球蛋白在病變部位直接混入尿中，導(dǎo)致尿中α2巨球蛋白升高。用尿α2MG與Alb的比值來鑒別腎性與腎后血尿。當(dāng)尿Alb>100mg/L時,α2MG/AIb<0.02，提示存在腎性血尿。而α2MG/AIb>0.02時，提示為腎后血尿。當(dāng)尿Alb<100mg/L時，不可采用此法來鑒別血尿來源。免疫球蛋白輕鏈(κ、λ)免疫球蛋白輕鏈(κ或λ)是一種小分子量(2.2kD或4.4kD)的蛋白質(zhì)，可自由通過腎小球濾過膜，能被腎小管重吸收。因此，檢測尿中免疫球蛋白輕鏈濃度對輕鏈病、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤的診斷以及腎功能狀態(tài)提供可靠的指標(biāo)。免疫球蛋白輕鏈(κ、λ)免疫球蛋白輕鏈與多發(fā)性骨髓瘤的關(guān)系最密切。約20%的骨髓瘤患者只分泌游離輕鏈，約50%的骨髓瘤病人既有單克隆血清免疫球蛋白又有單克隆尿輕鏈，前者預(yù)后較差。大量免疫球蛋白輕鏈從尿中排出可引起腎中毒，因此該蛋白質(zhì)的存在增加了腎功能障礙的風(fēng)險，預(yù)后不良。內(nèi)容概述尿蛋白電泳特定尿蛋白尿酶檢測尿滲透壓檢測尿NAG尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶是溶酶體酶之一，分子量140KD，在腎皮質(zhì)含量最高，髓質(zhì)次之，在近曲小管細胞內(nèi)含量最豐富。由于溶酶體是各種攻擊因子（如生物毒素、化學(xué)毒素、自由基、免疫因子）容易侵犯后靶部位，受到攻擊后迅速誘導(dǎo)溶酶體酶釋放，故尿中NAG活性對腎小管活動損傷十分靈敏。尿NAG藥物毒性損傷導(dǎo)致TIN（腎小管-間質(zhì)性腎病）時，NAG的變化遠早于一般腎功能和尿常規(guī)檢查。。糖尿病腎損傷糖尿病腎損傷早期即可有腎小管損傷，因此提倡聯(lián)合檢測尿mAlb和尿NAG，以提高檢出率。高血壓腎病，妊娠誘發(fā)高血壓、腎病和先兆性子癇的早期檢測，除mAlb外也應(yīng)聯(lián)合檢測尿NAG.尿路感染引起的TIN，尿NAG活性升高能幫助早期診斷和病情監(jiān)測，也有助于將TIN和單純膀胱炎區(qū)別開來。腎移植后排異反應(yīng)的早期診斷尿NAG活性升高早于腎功能、尿蛋白、血尿和管型尿。重金屬腎毒性的檢測在有關(guān)職業(yè)病防治中，尿NAG用于早起發(fā)現(xiàn)腎小管損傷。尿GGT

人體各組織均含GGT，以腎臟最高，其次是前列腺。在腎臟、胰腺和肝臟中，此酶含量之比為100：8：4，腎臟GGT含量雖高，但腎臟疾病時，血中該酶升高卻不明顯，人血清中的GGT主要來源于肝臟，血清GGT主要用于診斷肝臟疾病。由于該酶的相對分子量較大，正常情況下血清中的GGT不能由腎小球濾過，尿GGT不受血清中GGT的影響，測定尿GGT活性對腎小管損傷的診斷有重要意義。當(dāng)腎臟特別是腎小管局部有炎癥，并累及近曲小管時，尿GGT?？稍龈?，如果腎小管的炎癥是由于自身免疫性反應(yīng)引起的，尿GGT增高尤為顯著，如果腎臟僅有解剖結(jié)構(gòu)上的異常，而并無炎癥反應(yīng)（如多囊腎等）GGT并不增高。大多數(shù)腎小球腎炎尿GGT可增高，激素或免疫抑制劑治療緩解時可下降。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者是否有腎臟累及的指征。尿GGT活性正常多提示無腎臟累及，狼瘡性腎炎患者中70%以上尿GGT活性顯著增高。某些重金屬可引起中毒性腎損害，尿GGT活性顯著升高。4.使用慶大霉素、妥布霉素等氨基糖苷類抗生素發(fā)生腎毒性反應(yīng)時尿GGT活性顯著增高。5.注射某些造影劑可使尿GGT的排出暫時性升高。6.尿GGT是腎移植排異反應(yīng)較為敏感的尿酶，腎移植后隨著腎功能的恢復(fù)尿GGT排出顯著增高，一周左右尿GGT恢復(fù)至正常，如出現(xiàn)排異反應(yīng)，尿GGT將再次升高。內(nèi)容概述尿蛋白電泳特定尿蛋白尿酶檢測尿滲透壓檢測尿滲透壓尿滲透壓（Uosm）簡稱尿滲量，是指經(jīng)腎排泄到尿液內(nèi)全部溶質(zhì)微粒的總量，在評價腎臟的濃縮與稀釋功能上，明顯優(yōu)于尿比重。

尿滲透壓

滲透壓主要反映腎小管，尤其是遠端小管的濃縮稀釋功能。一些主要累及腎小管間質(zhì)的疾病都會引起尿滲透壓的降低，當(dāng)腎小球疾病累及腎小管腎間質(zhì)時，不僅表現(xiàn)為腎小球濾過功能下降，腎小管濃縮功能也有減退，會引起滲透壓各項指標(biāo)的變化。系膜增生性腎小球腎炎患者的尿滲透壓處于正常低值，表明腎小管濃縮功能損害輕微，這與系膜增生性腎小球腎炎患者的病理改變以系膜細胞增多、系膜基質(zhì)增寬為主，而腎小管病理變化不大有關(guān)。局灶性節(jié)段性腎小球硬化、膜性腎病的病理變化較重，不僅大部分腎小球硬化，同時腎間質(zhì)也有纖維化，腎小管結(jié)構(gòu)破壞，尿滲透壓明顯下降。1、尿總蛋白：反應(yīng)尿中蛋白質(zhì)總的排泄情況。2、尿白蛋白：反應(yīng)腎小球濾過膜機械屏障的早期損傷。3、尿轉(zhuǎn)鐵蛋白：反應(yīng)腎小球濾過膜電荷屏障的早期損傷。4、尿IgG：大量排出反應(yīng)腎小球濾過膜嚴(yán)重受損。5、尿β-2微球蛋白：反應(yīng)腎小管的重吸收（和腎小球）功能損傷，以硬化性腎小球腎炎患者最高，與腎小管間質(zhì)評分相關(guān)。6、尿α-1微球蛋白：反應(yīng)腎小管的重吸收（和腎小球）功能損傷，比β-2