醫(yī)學微生物實驗四課件

微生物實驗四微生物實驗四微生物實驗四實驗內(nèi)容錄像：雞胚接種、真菌示教：四體、病毒微生物實驗四實驗內(nèi)容衣原體（chlamydia）是一類嚴格在真核細胞內(nèi)寄生，有獨特發(fā)育周期，能通過細菌濾器的原核細胞型微生物。

生物學特性——介于細菌與病毒之間。類似病毒：嚴格的活細胞內(nèi)寄生。類似于細菌：①兩種類型核酸（DNA和RNA）；②具有類似于革蘭陰性菌的細胞結(jié)構(gòu)；③二分裂繁殖，有獨特的發(fā)育周期；④對多種抗生素敏感。⑤有核糖體，有數(shù)種代謝活動性的酶。衣原體衣原體（chlamydia）是一類嚴格在真核細一、生物學性狀1.發(fā)育周期在衣原體的發(fā)育周期中可觀察到兩種顆粒形態(tài)。（1）感染型原體（elementarybody,EB）：小而致密，普通光學顯微鏡下勉強可見，是發(fā)育成熟的衣原體，具有高度感染性。一、生物學性狀（2）無感染型始體或網(wǎng)織體（reticulatebody，RB）：為衣原體在宿主細胞內(nèi)的繁殖形式。大而疏松，沒有感染性。衣原體在宿主細胞內(nèi)增殖后所形成的網(wǎng)織體和子代原體的空泡，稱為包涵體（inclusionbody），經(jīng)染色后在光鏡下可觀察到。包涵體的形態(tài)、位置以及染色性對衣原體具有鑒別意義。（2）無感染型始體或網(wǎng)織體（reticulatebo2、培養(yǎng)特性

不能在人工培養(yǎng)基上生長，嚴格細胞內(nèi)寄生，在雞胚卵黃囊中繁殖3、抵抗力不強，對熱敏感，耐低溫，對紅霉素、四環(huán)素、利福平等敏感4、致病因素a.吸附b.內(nèi)毒素樣物質(zhì)c.外膜蛋白阻止溶酶體和吞噬體融合，抗吞噬表位突變，逃避免疫反應2、培養(yǎng)特性衣原體：包涵體（Giemsa染色）沙眼衣原體：在眼結(jié)膜上皮細胞質(zhì)內(nèi)、核旁堆積形成包涵體，呈桑椹狀或帽狀。四體衣原體：包涵體（Giemsa染色）沙眼衣原體：在眼結(jié)膜上皮細二、致病性沙眼生物變種：3種疾病1、沙眼：目前致盲的第一位病因眼—眼，眼—手—眼傳播二、致病性醫(yī)學微生物實驗四課件共同特點：

①專性活細胞內(nèi)寄生，以二分裂法繁殖。②含DNA和RNA兩種核酸。③呈多形性，主要為球桿狀，革蘭染色陰性，大小介于細菌與病毒之間。④大多為人畜共患病原體，節(jié)肢動物為傳播媒介，也可兼為寄生宿主或儲存宿主。⑤對多種抗生素敏感。立克次體共同特點：立克次體四體--立克次體1.斑疹傷寒立克次體--—人虱、鼠蚤2.斑點熱立克次體-----蜱3.恙蟲病東方體-----恙螨4.Q熱立克次體-----蜱5.戰(zhàn)壕熱立克次體----虱四體--立克次體1.斑疹傷寒立克次體--—人虱、鼠蚤醫(yī)學微生物實驗四課件恙蟲病立克次體觀察感染細胞內(nèi)的恙蟲病立克次體：注意在單核細胞漿內(nèi)靠近細胞核旁邊，有成堆的紫藍色的球桿狀的立克次體Giemsa染色四體恙蟲病立克次體觀察感染細胞內(nèi)的恙蟲病立克次體：注意在單核細胞外斐反應（Weil-Felixreaction）（1）定義：變形桿菌X菌株的菌體抗原代替相應的立克次體抗原（具有共同抗原），以檢測人或動物血清中有無相應的抗體。（2）本質(zhì)：非特異性交叉凝集試驗（3）作用：輔助診斷立克次體?。?）意義：抗體效價超過11：160或雙份血清抗體效價增加4倍以上外斐反應支原體油煎蛋樣菌落無細胞壁、多形性，能在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖的最小原核細胞型微生物四體支原體油煎蛋樣菌落無細胞壁、多形性，能在無生命培養(yǎng)基中生長繁油煎蛋樣菌落油煎蛋樣菌落醫(yī)學微生物實驗四課件（2）不同點（2）不同點螺旋體（spirochete）是一類細長、柔軟、彎曲呈螺旋狀，運動活潑的原核細胞型微生物。

生物學的地位介于細菌與原蟲之間，結(jié)構(gòu)和生物學性狀與細菌相似，有細胞壁、原始核質(zhì)、二分裂繁殖和對抗生素等藥物敏感等；螺旋體廣泛分布于自然界和動物體內(nèi)，僅少數(shù)（疏螺旋體屬、密螺旋體屬、鉤端螺旋體屬）對人和動物致病。螺旋體螺旋體（spirochete）是一類細長、柔軟、彎曲呈螺旋體的分類三種螺旋體示意圖名稱螺旋數(shù)規(guī)則程度其他特點舉例疏螺旋體3-10不規(guī)則回歸熱疏螺旋體伯氏疏螺旋體密螺旋體8-14規(guī)則，細密兩端尖梅毒螺旋體鉤端螺旋體規(guī)則，更細密兩端鉤狀問號狀鉤端螺旋體螺旋體的分類三種螺旋體示意圖名稱螺旋數(shù)螺旋數(shù)目4～8個，呈不規(guī)則彎曲。疏螺旋體四體螺旋數(shù)目4～8個，呈不規(guī)則彎曲。疏螺旋體四體密螺旋體梅毒螺旋體

螺旋體細長，有8-14個致密而規(guī)則的小螺旋，兩端尖直。Fontana鍍銀染色法四體密螺旋體梅毒螺旋體Fontana鍍銀染色法四體垂直傳播即母嬰傳播，指病原體由親代傳至子代，包括經(jīng)生殖細胞傳播、妊娠期經(jīng)胎盤傳播、分娩期經(jīng)產(chǎn)道傳播、圍生期傳播及產(chǎn)后經(jīng)哺乳傳播。傳染性大，破壞性小傳染性大，破壞性小傳染性小，破壞性大垂直傳播即母嬰傳播，指病原體由親代傳至子代，包括經(jīng)生殖細胞傳有菌免疫//傳染性免疫：即梅毒螺旋體感染的個體對梅毒螺旋體的再感染有抵抗力，若梅毒螺旋體被清除，免疫力也隨之消失。有菌免疫//傳染性免疫：即梅毒螺旋體感染的個體對鉤端螺旋體鍍銀染色法四體鉤端螺旋體鍍銀染色法四體傳播途徑接觸疫水或污染的土壤；帶菌動物多為隱性感染，不發(fā)病，但腎中可長期帶菌，尿中持續(xù)排菌污染水源和土壤，人因接觸污染的水或土壤而受感染。傳播途徑病毒Virus病毒檢測與培養(yǎng)方法細胞培養(yǎng)—病毒在敏感細胞內(nèi)增殖引起細胞病變（CPE—細胞病變效應；包涵體）動物接種—選用敏感動物及適宜部位接種（乙腦病毒—小白鼠腦內(nèi)）雞胚接種—孵化9-12天的雞胚，接種雞胚不同部位（流感病毒—尿囊腔）病毒Virus病毒檢測與培養(yǎng)方法正常細胞（細胞排列整齊，界線清晰）病變細胞（細胞排列紊亂，界線不清，有些細胞已脫落）細胞變圓、胞質(zhì)顆粒增多、聚集、融合、壞死、溶解或脫落，形成包涵體等正常細胞（細胞排列整齊，界線清晰）病變細胞（細胞排列紊亂，界包涵體：胞漿、胞核內(nèi)出現(xiàn)的圓形或橢圓形異常染色斑塊狂犬病毒包涵體—內(nèi)基小體Negribody包涵體：狂犬病毒包涵體—內(nèi)基小體Negribody狂犬病防治原則：（1）感染源管理：做好登記、動物預防接種，一旦咬人，隔離觀察10d，未發(fā)病可解除隔離；若發(fā)病則處死，取腦觀察內(nèi)基小體；（2）處理傷口：立即用20%皂水或清水反復沖洗傷口，再用70%酒精及碘伏涂擦；（3）被動免疫：高效價抗狂犬病病毒血清注射；（4）主動免疫：狂犬病潛伏期一般較長，人被咬傷后24h內(nèi)接種滅活疫苗預防發(fā)病，獸醫(yī)、動物管理員和野外工作者等高危人群應用疫苗預防感染內(nèi)基小體：在易感動物或人的中樞神經(jīng)細胞中增值時，可在細胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性、圓形或橢圓形包涵體狂犬病防治原則：內(nèi)基小體：在易感動物或人的中樞神經(jīng)細胞中增值病毒培養(yǎng)：動物接種敏感的實驗動物：常用小白鼠、田鼠、豚鼠、家兔及猴等合適的接種途徑：口服、滴鼻、注射（皮內(nèi)、腦內(nèi)、皮下、腹腔或靜脈）病毒培養(yǎng)：動物接種敏感的實驗動物：常用小白鼠、田鼠、豚鼠、病毒培養(yǎng)：雞胚接種部位：雞胚絨毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊鑒定：病毒增殖，雞胚發(fā)生異常變化或羊水、尿囊液出現(xiàn)紅細胞凝集現(xiàn)象意義：常用于痘類病毒等的分離培養(yǎng)病毒培養(yǎng)：雞胚接種部位：雞胚絨毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、醫(yī)學微生物實驗四課件注射部位避開胚體及大血管注射部位避開胚體及大血管雞胚接種雞胚在照蛋燈下標出氣室和接種點，接種點一定要避開胚體和大血管。用碘酒及酒精在標記處消毒，用打孔器按先氣室后接種點的順序打孔。用注射器傾斜插入雞胚2～3毫米，注入病毒0.2毫升。用溶化石蠟按先接種點后氣室的次序封口。注意：三組接種無色液體，三組接種有色液體。雞胚置孵箱培養(yǎng)72小時后收獲。雞胚接種醫(yī)學微生物實驗四課件真菌真菌，是一種真核生物。真菌的細胞壁沒有粘肽主要成分是甲殼素（又叫幾丁質(zhì)、甲殼素、殼多糖），有典型核結(jié)構(gòu)和細胞器（又與植物相似）。醫(yī)學真菌主要分:皮膚絲狀菌：皮膚癬菌（霉菌）深部真菌：白色念珠菌、新生隱球菌真菌真菌，是一種真核生物。真菌的細胞壁沒有粘肽主要成分是甲殼真菌單細胞真菌圓形或卵圓形酵母菌(yeast)

多細胞真菌菌絲和孢子絲狀菌(filamentousfungus)交織成團或霉菌(mold)二相性(dimorphic)形態(tài)和培養(yǎng)真菌單細胞真菌圓形或卵圓形酵母菌(ye新生隱球菌Cryptococcusneoformans

單細胞真菌，莢膜（墨汁負染）

主要以孢子出芽方式繁殖，稱為芽生孢子。

芽生孢子長到一定大小時脫離母體形成一個成熟的孢子。新生隱球菌Cryptococcusneoformans新生隱球菌Cryptococcusneoformans單細胞真菌，沙保培養(yǎng)基新生隱球菌Cryptococcusneoformans單白假絲酵母菌

Candidaalbicans單細胞真菌，革蘭染色陽性假絲白假絲酵母菌Candidaalbicans單細胞真菌，革白假絲酵母菌

Candidaalbicans單細胞真菌，沙保培養(yǎng)基白假絲酵母菌Candidaalbicans單細胞真菌，沙白假絲酵母菌

Candidaalbicans厚膜孢子白假絲酵母菌Candidaalbicans厚膜孢子白假絲酵母菌

Candidaalbicans條件致病菌鵝口瘡白假絲酵母菌Candidaalbicans條件致病菌鵝口菌絲（hypha）：菌絲是由成熟的孢子在環(huán)境合適的條件下長出的芽管并進一步延伸呈絲狀。孢子：由生殖菌絲產(chǎn)生的一種繁殖體，一條生殖菌絲可以形成多個孢子，孢子能發(fā)芽并發(fā)育成菌絲體，故孢子是真菌的繁殖體多細胞真菌菌絲（hypha）：菌絲是由成熟的孢子在環(huán)境合適的條件下長孢子（spore）真菌的繁殖結(jié)構(gòu)，一條菌絲可產(chǎn)生多個孢子有性孢子：同一菌體或不同菌體上的2個細胞融合經(jīng)減數(shù)分裂形成無性孢子：菌絲上的細胞分化或出芽生產(chǎn)，不發(fā)生細胞融合。病