實(shí)驗(yàn)一顯微鏡課件

1、人體解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)秦建重慶大學(xué)生物工程學(xué)院一、學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度（一）實(shí)驗(yàn)室的安全制度1、實(shí)驗(yàn)室是教學(xué)、科研的重要基地，實(shí)驗(yàn)室的安全衛(wèi)生制度是實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作正常運(yùn)行的基本保證，凡進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)的學(xué)生必須遵守。2、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)的學(xué)生，必須遵守實(shí)驗(yàn)室有關(guān)規(guī)章制度，不得擅自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備和設(shè)施，不準(zhǔn)隨地吐痰、吸煙和就食。3、實(shí)驗(yàn)室在防火、防盜、防破壞的基本設(shè)施，注重落實(shí)到人，經(jīng)常檢查，并作好記錄。4、實(shí)驗(yàn)室的劇毒、易燃、易爆有毒物品要有專人保管，定點(diǎn)存放，有領(lǐng)用辦法和使用記錄。5、實(shí)驗(yàn)者使用酒精燈和電爐，必須堅(jiān)守崗位,必須遠(yuǎn)離易燃易爆物品，隨用隨關(guān)。6、 禁止直接經(jīng)實(shí)驗(yàn)室水槽和下水道排放強(qiáng)腐蝕和

2、有毒廢液,必須經(jīng)處理后再排放;發(fā)現(xiàn)管道漏水，破裂等情況，必須及時(shí)采取措施和報(bào)修。7、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要注意保持清潔衛(wèi)生。8、值日生實(shí)驗(yàn)完畢后，負(fù)責(zé)協(xié)助老師收拾實(shí)驗(yàn)用品，做好清潔，關(guān)好門窗、水、電等設(shè)施，若有不安全因素及時(shí)向有關(guān)部門反映，對(duì)造成安全事故者，視情節(jié)輕重按有關(guān)規(guī)定處理。（二）實(shí)驗(yàn)室學(xué)生實(shí)驗(yàn)守則1、嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全制度的各項(xiàng)規(guī)定。書包等個(gè)人物品存放在實(shí)驗(yàn)室指定位置，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得飲水、進(jìn)食及吸煙。2、 嚴(yán)格按照操作規(guī)程使用儀器設(shè)備。注意勿將化學(xué)試劑及溶液濺灑在身上、桌面、地面或儀器設(shè)備上，一旦發(fā)生濺灑應(yīng)立即妥善處理。3、每個(gè)同學(xué)都應(yīng)該自覺地遵守課堂紀(jì)律，維護(hù)課堂秩序，不遲到，不早退，保持室內(nèi)安

3、靜，不大聲談笑。4、在實(shí)驗(yàn)過程中要聽從教師的指導(dǎo)，以小組為單位,發(fā)揚(yáng)協(xié)作精神,嚴(yán)肅認(rèn)真地按操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并簡要、準(zhǔn)確地將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)記錄在實(shí)驗(yàn)記錄本上。完成實(shí)驗(yàn)后經(jīng)教師檢查同意，方可離開。5、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、試劑藥品架上必須保持整潔，儀器藥品要井然有序。公用試劑用畢立即蓋嚴(yán)放回原處。勿使試劑藥品灑在實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和地上。實(shí)驗(yàn)完畢，需將藥品試劑排列整齊，器皿要洗凈倒置放好，將實(shí)驗(yàn)臺(tái)面抹拭干凈，經(jīng)教師驗(yàn)收檢查后，方可離開實(shí)驗(yàn)室。6、使用儀器、藥品、試劑和各種物品必須注意節(jié)約。應(yīng)特別注意保持藥品和試劑的純凈，嚴(yán)防混雜污染。7、注意安全。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙！乙醇、丙酮、乙醚等易燃品不能直接加熱，并要遠(yuǎn)離火源操

4、作和放置。實(shí)驗(yàn)完畢，各種玻璃器皿應(yīng)放置穩(wěn)妥。離開實(shí)驗(yàn)室以前應(yīng)認(rèn)真負(fù)責(zé)的進(jìn)行檢查，嚴(yán)防不安全事故。實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的組成與使用方法 一、目的要求 1、熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)及各部件性能； 2、掌握低倍鏡、高倍鏡的正確使用方法及 了解油鏡的使用方法； 3、了解臨時(shí)裝片的制作方法及徒手繪圖二、實(shí)驗(yàn)原理 成像原理：標(biāo)本置于聚光器與物鏡之間，目鏡、物鏡、聚光器各自相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡。平行的光線自反射鏡折射入聚光器，光線經(jīng)聚光器集聚增強(qiáng)，照射到標(biāo)本上，標(biāo)本經(jīng)物鏡放大成像，但像為倒像，目鏡將此倒像進(jìn)一步放大成像于人的視網(wǎng)膜上為正像。1、R.虎克在17世紀(jì)中期制做的復(fù)式顯微鏡 2、19世紀(jì)中期的顯微鏡3、20世紀(jì)初期的

5、顯微鏡5、20世紀(jì)后期的顯微鏡6、掃描電子顯微鏡與超高壓透射電子顯微鏡四、特殊的光學(xué)顯微鏡倒置相差顯微鏡熒光顯微鏡五、普通光學(xué)顯微鏡 觀察要點(diǎn):1、普通光學(xué)顯微鏡的組成 由3部分構(gòu)成，即：照明系統(tǒng)，包括光源和聚光器；光學(xué)放大系統(tǒng)，由物鏡和目鏡組成，是顯微鏡的主體，目鏡和物鏡都由復(fù)雜的透鏡組構(gòu)成；機(jī)械裝置，用于固定材料和觀察方便。 2、顯微鏡物象是否清楚不僅決定于放大倍數(shù)，還與顯微鏡的分辨力有關(guān)。 分辨力是指顯微鏡（或人的眼睛距目標(biāo)25cm處）能分辨物體最小間隔的能力。 分辨力的大小決定于光的波長和鏡口率以及介質(zhì)的折射率。幾種顯微鏡的分辨范圍 低倍物鏡觀察先將低倍物鏡的位置固定好，然后放置標(biāo)本片

6、，轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，調(diào)好光線，將物鏡提高，向下調(diào)至看到標(biāo)本，再用細(xì)調(diào)對(duì)準(zhǔn)焦距進(jìn)行觀察。除少數(shù)顯微鏡外，聚光鏡的位置都要放在最高點(diǎn)。如果視野中出現(xiàn)外界物體的圖像，可以將聚光鏡稍微下降，圖像就可以消失。聚光鏡下的虹彩光圈應(yīng)調(diào)到適當(dāng)?shù)拇笮?，以控制射入光線的量，增加明暗差。 高倍物鏡觀察當(dāng)?shù)捅段镧R對(duì)準(zhǔn)焦點(diǎn)后，轉(zhuǎn)換到高倍物鏡基本上也對(duì)準(zhǔn)焦點(diǎn)，只要稍微轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)即可。有些簡易的顯微鏡不是共焦點(diǎn)，或者是由于物鏡的更換而達(dá)不到共焦點(diǎn)，就要采取將高倍物鏡下移，再向上調(diào)準(zhǔn)焦點(diǎn)的方法。虹彩光圈要放大，使之能形成足夠的光錐角度。稍微上下移動(dòng)聚光鏡，觀察圖像是否清晰。油鏡觀察 油鏡的工作距離很小，所以要防止載玻片和物鏡上的透鏡

7、損壞。使用時(shí)，一般是經(jīng)低倍、高倍到油鏡。當(dāng)高倍物鏡對(duì)準(zhǔn)標(biāo)本后，再加油鏡觀察。在轉(zhuǎn)換油鏡前，應(yīng)在載玻片的蓋玻片上加一滴香柏油后，轉(zhuǎn)換油鏡，用微調(diào)調(diào)節(jié)、用眼側(cè)面觀察將油鏡下移到油滴中，將油鏡下移到與載玻片稍微接觸為止，然后用微調(diào)向上提升調(diào)準(zhǔn)焦點(diǎn)。4、普通光學(xué)顯微鏡的保養(yǎng) 顯微鏡是精密貴重的儀器，必須很好地保養(yǎng)。顯微鏡用完畢后，要注意下列事項(xiàng)：1）、在打開顯微鏡電源前，將調(diào)整光亮的鍵調(diào)整到最小，才能打開電源。關(guān)掉電源前同樣將光亮調(diào)整最小，才能關(guān)掉電源。2）、觀察完后，移去觀察的載玻片標(biāo)本。3）、用過油鏡的，應(yīng)先用擦鏡紙將鏡頭上的油擦去，再用擦鏡紙蘸著洗鏡頭液擦拭。4）、鏡頭污染請(qǐng)用擦鏡紙蘸著洗鏡頭液

8、擦拭。 5）、實(shí)驗(yàn)完畢，請(qǐng)轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，放在低倍鏡的位置。6）、將鏡身下降到最低位置，調(diào)節(jié)好鏡臺(tái)上標(biāo)本移動(dòng)器的位置，罩上防塵布。7）、顯微鏡電源關(guān)閉后，請(qǐng)將電源插頭拔掉鏡頭的保護(hù)最為重要，鏡頭要保持清潔 。六、顯微標(biāo)本制片技術(shù)問題：為什么要制片？1、生物顯微制片的分類 1）非切片法 2）切片法舉例：石蠟切片法的制作過程：取材；固定；脫水；透明；滲蠟；包埋；切片；貼片；染色；封片。七、制作臨時(shí)裝片臨時(shí)裝片的制作方法： 擦凈載玻片與蓋玻片-在載玻片上滴一滴生理鹽水取材放在生理鹽水中（展平或涂散開）蓋上蓋玻片鏡下觀察試劑、材料與器材1 、材料 ：洋蔥，小白菜，番茄 2、藥品：01亞甲基藍(lán)染液，09生理鹽水，1稀碘液3 、器材：顯微鏡，載玻片，蓋玻片，鑷子，滴管，擦鏡紙，小刀等1、洋蔥葉表皮細(xì)胞和小白菜葉表皮清潔玻片取材滴生理鹽水展平蓋上蓋玻片染色觀察思 考1、為什么說洋蔥表皮細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與功能相適應(yīng)？2、為什么用0.1%亞甲基藍(lán)液染色？它使細(xì)胞結(jié)構(gòu)中哪一部分更能觀察清楚？3、如何使用高倍物鏡？怎樣調(diào)節(jié)顯微鏡才能更清楚的觀察標(biāo)本?4、怎樣可避免標(biāo)本中產(chǎn)生的氣泡？2、小白菜葉肉細(xì)胞和西紅柿果肉細(xì)胞 清潔玻片取材滴生理鹽水涂散開蓋上蓋玻片觀察觀察要點(diǎn)