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文檔簡介
1、第二節(jié):分離特定的微生物并測定其數量 實驗部分課題3 分解纖維素的微生物的分離2.其原理是:剛果紅可以與纖維素形成_,當纖維素被_分解后,紅色復合物無法形成,出現以_為中心的_,我們可以通過_來篩選纖維素分解菌。紅色復合物纖維素酶纖維素分解菌 透明圈是否產生透明圈1.纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于_(固體、液體)培養(yǎng)基,原因是_。選擇培養(yǎng)回答以下幾個問題:液體沒有添加瓊脂成分2.該培養(yǎng)基對微生物_(具有,不具有)選擇作用。如果具有,其選擇機制是_。以纖維素粉為唯一碳源,能分解纖維素的微生物可以大量繁殖 具有 操作提示選擇培養(yǎng)的操作方法 將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中,將錐形瓶固定在搖床
2、上,在一定溫度下震蕩培養(yǎng)12天,直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復選擇培養(yǎng)。梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進行等比稀釋,稀釋最大倍數到106將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1. 制備培養(yǎng)基:參照P22中的比例2. 涂布平板:將稀釋度為104106的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上,30倒置培養(yǎng)挑選產生透明圈的菌落 挑取產生明顯的透明圈的菌落,一般即為分解纖維素的菌落。 接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上,在300C 370C培養(yǎng),可獲得純培養(yǎng)。剛果紅染色法方法一:先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅1mg/mL進行顏色反應方法二:在倒平板時就加入剛果紅10mg/mL染色法優(yōu)點缺點方法一 方法二 顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用 操作繁瑣,剛果紅會使菌落之間發(fā)生混雜操作簡便,不存在菌落混雜問題 產生淀粉酶的微生物也產生模糊透明圈,有些
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