診斷學(xué)出血血栓與止血檢測課件

1、診斷學(xué)（第八版）P285第三章 血栓與止血檢測醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)系 孫艷麗E-mail： Tel: 8462519 診斷學(xué)（第八版）P285第三章 血栓與止血檢測醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)教學(xué)內(nèi)容第一節(jié) 血管壁檢測第二節(jié) 血小板檢測第三節(jié) 凝血因子檢測第四節(jié) 抗凝系統(tǒng)檢測第五節(jié) 纖溶活性檢測第八節(jié) 檢測項目的選擇和應(yīng)用教學(xué)內(nèi)容第一節(jié) 血管壁檢測教學(xué)目的與要求（3學(xué)時） 掌握內(nèi)容：掌握血管、血小板、凝血因子、抗凝系統(tǒng)、纖溶活性檢測項目的臨床意義。 熟悉內(nèi)容：各檢測項目的原理、方法及參考值。DIC檢查的項目及臨床意義。 了解內(nèi)容： 止凝血與抗凝血機制。教學(xué)目的與要求（3學(xué)時） 掌握內(nèi)容：生理狀態(tài)下血管中流動的血液為什么不

2、凝固？破損的血管為什么能止血？機體內(nèi)存在著復(fù)雜的止、凝血系統(tǒng)和抗凝系統(tǒng)生理狀態(tài)下血管中流動的血液為什么不凝固？正常止凝血過程(止凝血機制)有三大因素參與 一二三血管血小板凝血因子正常止凝血過程(止凝血機制)有三大因素參與 一二三血管血小板血 管血小板凝血因子血管收縮血小板血栓形成纖維蛋白凝塊形成與維持生理性止凝血機制主要包括三個時相：血 管血小板凝血因子血管收縮血小板血栓形成纖維蛋白凝塊形成與正?？鼓^程(抗凝機制)有兩大因素參與 一二抗凝系統(tǒng)纖溶系統(tǒng)正常抗凝過程(抗凝機制)有兩大因素參與 一二抗凝系統(tǒng)纖溶系統(tǒng)第一節(jié)血管壁檢測P285第一節(jié)P285ECECECECEC1、收縮反應(yīng)：神經(jīng)、體液調(diào)

3、節(jié)管腔收縮 血流變慢神經(jīng)反射體液中的活性物質(zhì) 出血 /停止 血管壁的止血作用復(fù)習內(nèi)皮素、血栓烷A2ECECECECEC1、收縮反應(yīng)：神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)管腔收縮 1、收縮反應(yīng)：神經(jīng)、體液調(diào)節(jié) 血管壁的止血作用復(fù)習1、收縮反應(yīng)：神經(jīng)、體液調(diào)節(jié) 血管壁的止血作用復(fù)習ECECECECEC2、激活血小板（vWF）：vWF膠原-vWF-血小板膠原血小板粘附 血管壁的止血作用復(fù)習ECECECECEC2、激活血小板（vWF）：vWF膠原-vECECECECEC3、促進血液凝固過程：組織因子外源性凝血途徑膠原激活F內(nèi)源性凝血途徑 血管壁的止血作用復(fù)習ECECECECEC3、促進血液凝固過程：組織因子外源性凝血ECE

4、CECECEC4、抑制纖維蛋白溶解分泌PAI抑制纖維蛋白溶解PAI：纖溶酶原激活抑制劑 血管壁的止血作用復(fù)習ECECECECEC4、抑制纖維蛋白溶解分泌PAI抑制纖維蛋血管壁檢測篩檢試驗出血時間測定（BT）束臂試驗(CRT，毛細血管脆性試驗)血管壁檢測篩檢試驗1、 出血時間測定（Bleeding time, BT）【原理】測定皮膚受特定條件的外傷后，出血自然停止所需的時間即為出血時間。是反映毛細血管壁和血小板止血功能常用的篩選試驗。1、 出血時間測定（Bleeding time, BT）【原【參考值】出血時間測定器法(6.92.1)min，超過9min為異常40mmHg(30-60)s【方法】

5、出血時間測定器法【參考值】出血時間測定器法(6.92.1)min，超過9m受血小板數(shù)量和血管壁影響。 出血時間延長：血小板數(shù)量、功能異常：血小板無力癥（GPIIb/IIIa缺乏或減少）血管壁異常：遺傳性毛細血管擴張癥綜合因素：vWD（血管性血友病）、DIC 出血時間縮短：見于某些嚴重的高凝狀態(tài)或血栓性疾病：腦血栓、心肌梗死、糖尿病、高血脂、下肢靜脈栓塞、DIC高凝期【臨床意義】受血小板數(shù)量和血管壁影響。【臨床意義】2、束臂試驗 又叫毛細血管脆性試驗（capillary fragility test, CRT） 、毛細血管抵抗試驗（capillary resistance test, CRT）。

6、【原理】 毛細血管的完整性與其本身的結(jié)構(gòu)、功能，血小板的質(zhì)、量，以及一些體液因素有關(guān)。 用加壓的方法來部分阻止靜脈血液回流，可以根據(jù)一定范圍內(nèi)新出血點的數(shù)目及大小來估計毛細血管的脆性。P2852、束臂試驗 又叫毛細血管脆性試驗（capillar【參考值 】陰性： 5cm直徑圓圈中的出血點數(shù)： 男性少于5個；女性及兒童少于10個(12-13.5)kPa/(90-100)mmHg)8min【操作】 【參考值 】陰性： 5cm直徑圓圈中的出血點數(shù)：(12-13【臨床意義】 新出血點超過正常為陽性，見于：血管壁的結(jié)構(gòu)和（或）功能缺陷： 遺傳性毛細血管擴張癥、vWD血小板的量、功能異常 血小板減少癥 、

7、血小板功能缺陷癥【臨床意義】血管壁的結(jié)構(gòu)和（或）功能缺陷：（一）血管性血友病因子抗原測定（vWF：Ag）【原理】（1）免疫火箭電泳法：在含vWF抗體的瓊脂糖凝膠板中加入一定量受檢血漿（vWF抗原），在電場作用下，泳動一定時間，出現(xiàn)抗原-抗體反應(yīng)形成的火箭樣沉淀線，其高度與受檢血漿中vWF的濃度呈正相關(guān)，計算出vWF：Ag的含量。（2）酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）診斷試驗（一）血管性血友病因子抗原測定（vWF：Ag）【原理】診斷試診斷試驗（一）血管性血友病因子抗原測定（VWF：Ag）【參考值】94.1%32.5%?！九R床意義】減低:見于vWD,是診斷vWD及其分型的指標之一。增高:見于血栓性疾

8、病及血栓前狀態(tài),如心肌梗塞、心絞痛、腦血管病變、糖尿病等。 診斷試驗（一）血管性血友病因子抗原測定（VWF：Ag）【參第二節(jié)血小板檢測P287第二節(jié)P287復(fù)習 血小板結(jié)構(gòu)復(fù)習 血小板結(jié)構(gòu)復(fù)習 血小板結(jié)構(gòu)復(fù)習 血小板結(jié)構(gòu)vWF膠原 Adhesion內(nèi)皮細胞endothelium基底膜GPa-aGPb-Resting Platelet血小板粘附模式圖（一）黏附功能復(fù)習 血小板的止血作用vWF膠原 Adhesion內(nèi)皮細胞基GPa-aGPvWFResting PlateletADPGPActivated Platelet oneActivated Platelet twoGPb-aAggregat

9、ion二.聚集功能 aGPb-aFibrinogen+血小板聚集模式圖膠原Ca2+vWFResting PlateletADPGPActivCa+Resting PlateletADPActivated Platelet releasesa三.釋放反應(yīng)顆粒： -TG PF4 TSP致密顆粒：ADPP-selectinCa2+血小板釋放模式圖 releaseCa+RestingADPActivated a三.顆四.促凝作用aCaaaFgActivated PlateletaaCaFIBRIN CLOTPF3PF3a- -Ca2+ PF3Coagulationa-a Ca2+ PF3凝血活酶血小板

10、促凝作用模式圖四.aCaaaFgActivated aaCaF五.血塊收縮功能血小板血塊收縮功能模式圖五.血小板血塊收縮功能模式圖血小板檢測篩選試驗：血小板計數(shù)血塊收縮試驗診斷試驗：血小板相關(guān)免疫球蛋白的測定血小板粘附功能測定血小板聚集功能測定血小板檢測篩選試驗：1、血小板計數(shù)(platelet count, PC或BPC，PLT)【參考值】 （100-300）109/LP2601、血小板計數(shù)(platelet count, PC或BP 血小板減少：血小板生成障礙：見于造血功能障礙（再障、急白、急性放射?。┭“迤茐幕蛳脑龆啵篒TP、DIC、TTP血小板分布異常：脾腫大、血液被稀釋 血小板增

11、多：原發(fā)性增多：骨髓增殖性疾?。ㄕ嫘约t細胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥、骨髓纖維化早期、慢粒）反應(yīng)性增多：急性感染、溶血、某些癌癥患者【臨床意義】 血小板減少：【臨床意義】2、 血塊收縮試驗（clot retraction test, CRT）【原理】血液凝固后，由于血小板釋放的血小板收縮蛋白，使血塊收縮，血清析出。 測定析出血清量占全血量的百分數(shù)來表示血塊收縮的程度，可間接了解血小板功能情況，此即血塊收縮試驗（CRT）。血塊收縮率=血清（ml）/全血（ml）(100%-Hct%) 100%P2882、 血塊收縮試驗（clot retraction tes【正常參考值】 定量法（凝塊法）：37，

12、1小時其血塊收率為65.8%11.0%定性試驗：37，2小時開始收縮，18-24小時完全收縮（血清占全血1/3-1/2）。【正常參考值】 完全收縮 部分收縮 收縮不良 不收縮 【結(jié)果判斷】定性試驗完全收縮 部分收縮 收縮不良 不收縮 【結(jié)果判斷】血塊收縮主要取決于血小板、纖維蛋白原、紅細胞量等因素。 血塊收縮不良或不收縮（40%）：血小板數(shù)量、異常：血小板無力癥、ITP、血小板增多癥纖維蛋白原異常：低（無）纖維蛋白原血癥紅細胞增加：紅細胞增多癥 血塊收縮過度(升高)：先天性/獲得性缺乏癥(？)【臨床意義】血塊收縮主要取決于血小板、纖維蛋白原、紅細胞量等因素?！九R床3、血小板相關(guān)免疫球蛋白測定（

13、platelet associated immunoglobulin, PAIg） 包括：PAIgG、PAIgM、PAIgA【方法】 ELISA法P2983、血小板相關(guān)免疫球蛋白測定（platelet assoc【參考值】 PAIgG：（078.8）ng/107血小板PAIgM：（07.0）ng/107血小板PAIgA：（02.0）ng/107血小板【參考值】 本試驗是免疫性血小板減少性紫癜診斷、療效及預(yù)后評估的重要指標，也有助于其他血小板疾病的免疫機制研究。PAIg增高：見于ITP、同種免疫性血小板減少性紫癜、藥物免疫性血小板減少性紫癜等。以ITP陽性率最高?！九R床意義】本試驗是免疫性血小板

14、減少性紫癜診斷、療效及預(yù)后評估的重要指標4、血小板粘附試驗（platelet adhension test, PAdT）【玻璃珠柱法原理】 血小板具有體內(nèi)粘附于內(nèi)膜下組織或體外粘附于帶負電荷物質(zhì)的性質(zhì)。當血液通過玻珠柱時，血小板可粘附在充滿玻珠的塑料管內(nèi)，血中血小板數(shù)會因此而降低。 血小板黏附的本質(zhì)是血小板膜糖蛋白（GP Ib/V/IX）通過vWF與血管內(nèi)皮下膠原黏附。P2884、血小板粘附試驗（platelet adhension 【正常參考值】玻璃珠柱法：62.5%8.6%【正常參考值】PAdT增高血栓前狀態(tài)和血栓性疾?。盒墓?、糖尿病、深靜脈血栓形成、妊高癥、動脈粥樣硬化PAdT減低血小板

15、因素：血小板無力癥、抗血小板藥止血綜合因素：vWD其他：尿毒癥、肝硬化、MDS、急性白血病【臨床意義】PAdT增高【臨床意義】5、血小板聚集試驗（platelet aggregation test,PAgT)根據(jù)血小板聚集曲線的變化了解血小板聚集的程度和速度。血小板聚集試驗血小板聚集PRP血漿血漿濁度減低，透光度增加【方法】儀器法，常用比濁法P289血小板誘導(dǎo)劑如ADP、腎上腺素、膠原、瑞斯托霉素5、血小板聚集試驗（platelet aggregatioPAgT增高血栓前狀態(tài)和血栓性疾病PAgT減低先天性：血小板無力癥、血管性血友病（vWD）后天性：骨髓增殖性疾病、服用抗血小板藥物【臨床意義】

16、PAgT增高PAgT減低【臨床意義】（四）血小板P-選擇素測定血小板顆粒膜蛋白-140(GMP-140)測定【原理】GMP-140是存在于血小板顆粒膜的標志蛋白分子，當血小板激活時，GMP-140進入血漿或與血小板質(zhì)膜融合，并大量表達于膜表面，形成質(zhì)膜表面的一個新抗原。利用抗P-選擇素的單抗定量測定受檢血漿中或血小板P-選擇素的含量可反映體內(nèi)血小板的激活程度?！九R床意義】1.是血小板被激活的一個最有意義的特異性分子標志物。2.增高見于急性心肌梗塞 、心絞痛、高血壓、糖尿病、腦血栓形成、動脈硬化等。（四）血小板P-選擇素測定血小板顆粒膜蛋白-140(GM【原理】血小板激活后，膜磷脂花生四烯酸(A

17、A)代謝亢進，生成TXA2，其不穩(wěn)定，并很快轉(zhuǎn)化為TXB2，測定血漿中含量可反映AA代謝水平，從而反映血小板是否被激活。【參考值】(76.348.1)ng/L 【臨床意義】 TXB2促血管收縮，促血小板聚集。1、增高：見于血栓性疾病、動脈硬化、糖尿病、惡性腫瘤等。2、降低：見于先天性花生四烯酸代謝障礙性疾病或服用阿司匹林類藥物等。（ 六）血漿血栓烷B2(TXB2)測定 【原理】（ 六）血漿血栓烷B2(TXB2)測定 第三節(jié)凝血因子檢測P291第三節(jié)P291參與凝血的因子：因子常用名稱因子常用名稱因子常用名稱I纖維蛋白原凝血酶原組織因子（TF）Ca2+易變因子穩(wěn)定因子抗血友病甲因子Christm

18、as因子Stuart-Prower因子血漿凝血激酶先質(zhì)Hageman因子纖維蛋白穩(wěn)定因子PK激肽釋放酶原HMWK高相對分子質(zhì)量激肽原主要合成場所：肝臟生理狀態(tài)下以未激活狀態(tài)存在 凝血因子復(fù)習參與凝血的因子：因子常用名稱因子常用名稱因子常用名稱I纖維蛋內(nèi)源凝血途徑外源凝血途徑第一階段：凝血活酶形成第三階段：纖維蛋白形成第二階段：凝血酶形成 共同凝血途徑內(nèi)源凝血系統(tǒng)外源凝血系統(tǒng) 凝血機理復(fù)習內(nèi)源凝血途徑外源凝血途徑第一階段：第三階段：第二階段：共同凝第一階段：凝血活酶，又稱凝血酶原酶（a-Va-Ca2+-PF3復(fù)合物）形成因子的激活有兩條途徑：內(nèi)源性凝血途徑（次要）外源性凝血途徑（主要, 當形成凝

19、血酶后使內(nèi)凝途徑進一步放大） 凝血機理復(fù)習第一階段：凝血活酶，又稱凝血酶原酶（a-Va-Ca2+-P診斷學(xué)出血血栓與止血檢測課件第二階段：凝血酶形成 第三階段：纖維蛋白形成 凝血機理復(fù)習第二階段：凝血酶形成 凝血機理復(fù)習診斷學(xué)出血血栓與止血檢測課件診斷學(xué)出血血栓與止血檢測課件篩選試驗： 1、活化部分凝血活酶時間測定（APTT)2、凝血時間（CT）3、血漿凝血酶原時間測定（PT）診斷試驗：血漿纖維蛋白原測定（Fg）各種凝血因子的測定凝血因子檢測篩選試驗： 1、活化部分凝血活酶時間測定（APTT)2、(activated partial thromboplastin time, APTT)1、活化

20、部分凝血活酶時間測定【原理】在受檢血漿中加入活化的部分凝血活酶時間試劑（接觸因子激活劑和部分磷脂）和Ca2+，觀察血漿凝固所需的時間。P291是內(nèi)源凝血系統(tǒng)較為敏感、最為常用的篩選試驗。(activated partial thromboplas內(nèi)源性凝血途徑 外源性凝血途徑 TF +Ca2+ + TF+Ca2+ +PF3 共 同a+a+Ca2+ +PF3 途 徑APTTCa2+內(nèi)源性凝血途徑 外源性凝血途徑 APTTCa2+【參考值】 1、（31-43） 秒2、與對照相差在10秒以內(nèi)【參考值】 【臨床意義】 APTT延長APTT縮短血栓性疾病、血栓前狀態(tài)先天性凝血因子缺陷1、內(nèi)凝途徑：因子、

21、，如血友病2、共同途徑：因子、纖維蛋白原（）后天性凝血因子缺陷1、肝實質(zhì)損傷2、維K不足時：阻塞性黃疸3、纖溶亢進：DIC纖溶亢進期4、抗凝物質(zhì)、抗凝劑：肝素等監(jiān)測肝素治療的首選指標【臨床意義】 APTT延長APTT縮短先天性凝1、內(nèi)凝途徑2、凝血時間（clotting time, CT）【原理】血液離體后凝固所需時間。 反映了凝血過程的三個階段有無障礙?！緟⒖贾怠?-12分鐘（試管法）【評價】該法目前已被APTT代替【臨床意義】見APTT檢查P2912、凝血時間（clotting time, CT）【原理】血(prothrombin time, PT)3、血漿凝血酶原時間測定（PT） 【原理

22、】 在受檢血漿中加入鈣離子和組織因子（TF或組織凝血活酶），觀察血漿的凝固時間即為凝血酶原時間。 是反映外源凝血系統(tǒng)最常用的篩選試驗。P292(prothrombin time, PT)3、血漿凝血酶原內(nèi)源性凝血途徑 外源凝血途徑 TF +Ca2+ + TFa+a+Ca2+ +PF3 Ca2+ 共 同a+a+Ca2+ +PF3 途 徑PT內(nèi)源性凝血途徑 外源凝血途徑 PT PT秒數(shù)：直接測定的時間【參考值】 （121）s （超過對照 3s 以上為異常） PT比值（PTR) ：待測血漿PT/對照PT 【參考值】 PTR ： 1.00.05 國際正常化比值（INR）： INRPTRISI （ISI

23、=國際敏感指數(shù)），ISI越小，靈敏度越高。【參考值】 INR： 2.02.5【參考值】 PT秒數(shù)：直接測定的時間【參考值】 【臨床意義】 PT縮短血栓前狀態(tài)、高凝狀態(tài)（DIC早期） PT延長先天性凝血因子缺陷1、外凝途徑：因子2、共同途徑：因子、纖維蛋白原（）后天性凝血因子缺陷1、肝實質(zhì)損傷2、維K不足時：阻塞性黃疸3、纖溶亢進、DIC低凝期4、抗凝物質(zhì)、抗凝劑：華法林等監(jiān)測口服抗凝劑（香豆素類）的首選試驗：正常的1.5-2倍【臨床意義】 PT縮短 PT延長先天性凝1、外凝途徑：因子(fibrinogen, Fg)（一）血漿纖維蛋白原測定【原理】凝血酶比濁法：在受檢血漿中加入一定量的凝血酶，使

24、血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，通過比濁原理計算Fg的含量。【參考值】 （2-4）g/LP303診斷試驗(fibrinogen, Fg)（一）血漿纖維蛋白原測定【原 減低： 見于DIC消耗性低凝期及纖溶期、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎、肝硬化等。 增高： 見于糖尿病、急性心肌梗死、風濕病、急性腎炎、多發(fā)性骨髓瘤、大手術(shù)后、妊娠高血壓綜合征、急性感染、惡性腫瘤等。 【臨床意義】 減低：【臨床意義】 （二）血漿凝血因子、促凝活性測定【參考值】F :C 103%25.7% ；F :C 98.1%30.4%；F :C 100%18.4% ；F :C 92.4%20.7%【臨床意義】 1.增高 血栓前狀態(tài)和

25、血栓性疾病。DVT等2.降低 血友病A(病因？)、血友病B（病因？）、因子缺乏癥 肝臟疾病，維生素K缺乏、DIC等。診斷試驗（二）血漿凝血因子、促凝活性測定【參考值】診斷試（三）血漿Vk依賴凝血因子促凝活性測定Vk依賴凝血因子：II、VII、IX、X,多由肝臟產(chǎn)生。【參考值】 F：C 97.7%16.7% ； F：C102.4%30.9%； F ：C103%17.3%； F：C 103%19%【臨床意義】 1.增高：血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。2.降低： 先天性、因子缺乏 獲得性肝臟疾病、口服抗凝劑、維生素K缺乏，DIC、新生兒出血癥、腸道滅菌和吸收不良綜合癥等。診斷試驗（三）血漿Vk依賴凝血因子

26、促凝活性測定Vk依賴凝血因子：II第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測P303第四節(jié)P303抗凝系統(tǒng)是維持血液呈液態(tài)的重要因素。主要包括：細胞抗凝系統(tǒng)：血管內(nèi)皮細胞、單核-巨噬細胞、肝細胞體液抗凝系統(tǒng)：抗凝血酶、蛋白C系統(tǒng)、組織因子途徑抑制物、肝素等 抗凝系統(tǒng)復(fù)習抗凝系統(tǒng)是維持血液呈液態(tài)的重要因素。 抗凝系統(tǒng)復(fù)習細胞抗凝系統(tǒng)復(fù)習單核-巨噬細胞凝血過程有關(guān) 物質(zhì)和產(chǎn)物吞 噬清 除細胞抗凝系統(tǒng)復(fù)習單核-巨噬細胞凝血過程有關(guān) 物質(zhì)和產(chǎn)物吞 體液抗凝系統(tǒng)復(fù)習1. 抗凝血酶III（antithrombin III，AT-III） AT-III滅活I(lǐng)Ia, VIIa, IXa, Xa, XIIa, 激肽釋放酶 體液抗凝系統(tǒng)

27、復(fù)習1. 抗凝血酶III（antithrombi體液抗凝系統(tǒng)復(fù)習2.組織因子途徑抑制物(tissue factor pathway inhibitor， TFPI) 滅活VIIa, TF, XaTFPI體液抗凝系統(tǒng)復(fù)習2.組織因子途徑抑制物(tissue fac體液抗凝系統(tǒng)復(fù)習3. 蛋白C系統(tǒng)蛋白C（Protein C, PC）蛋白S（ Protein S, PS ）血栓調(diào)節(jié)素（throbomodulin, TM）活化蛋白C抑制物(activated protein C inhibitor, APCI )抗凝機制： 滅活凝血因子和；限制因子a與血小板結(jié)合；增強纖維蛋白的溶解。體液抗凝系統(tǒng)復(fù)習3

28、. 蛋白C系統(tǒng)蛋白C（Protein C,抗凝系統(tǒng)檢測病理性抗凝物質(zhì)的篩檢試驗 凝血酶時間測定（thrombin time, TT)生理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗血漿AT-III活性測定血漿蛋白C活性測定血漿凝血酶抗凝血酶復(fù)合物測定P303抗凝系統(tǒng)檢測P303【原理】 受檢血漿中加入“標準化”凝血酶后測定開始出現(xiàn)纖維蛋白絲所需要的時間。 凝血酶時間測定（thrombin time,TT)P294凝血酶FgFb【原理】凝血酶時間測定（thrombin time,TT)P檢查抗凝物的定性試驗，也可檢測凝血第三階段以及纖溶活性測定。延長：抗凝物質(zhì)存在:肝素或類肝素物質(zhì)纖維蛋白原顯著減少或結(jié)構(gòu)異常：先天性或

29、嚴重肝病纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物增高：DIC【臨床意義】 檢查抗凝物的定性試驗，也可檢測凝血第三階段以及纖溶活性測定。生理性抗凝因子檢測（一）血漿AT-III活性測定【原理】受檢血漿中加入過量凝血酶，使抗凝血酶與凝血酶形成1:1復(fù)合物，剩余的凝血酶作用于發(fā)色底物S-2238,釋出顯色基團對硝基苯胺。顯色的深淺與剩余凝血酶含量與活性呈正相關(guān)，而與AT呈負相關(guān)?！緟⒖贾怠堪l(fā)色底物法：108.5%5.3%【臨床意義】 1.增高 見于血友病、白血病、再障等急性出血期；也可見于口服抗凝藥物治療過程中。 2.減低 見于先天性和獲得性AT-缺乏癥,后者見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病、DIC和肝臟疾病等。生理性抗凝

30、因子檢測（一）血漿AT-III活性測定【原理】從毒蛇液中提取的protac為蛋白C特異性的激活劑，被激活后的PC作用與特異的發(fā)色底物Chromozym PCA，釋放出對硝基苯胺而顯色，顯色深淺與PC：A呈正相關(guān)關(guān)系?！緟⒖贾怠?00.2%士13.18%【臨床意義】 PC是一種依賴于維生素K的天然抗凝因子。 PC:A減低：見于先天性或獲得性PC缺乏癥,后者見于DIC、肝病、手術(shù)后、口服抗凝劑、急性呼吸窘迫綜合征。（二）血漿蛋白C活性測定【原理】從毒蛇液中提取的protac為蛋白C特異性的激活劑，（三）血漿凝血酶抗凝血酶復(fù)合物測定thrombin-antithrombin complex（TAT）

31、【原理】用兔抗人凝血酶抗體包被酶標板，加入受檢者血漿后再加入辣根過氧化酶標記的鼠抗人AT抗體后，后者使OPD顯色，顯色的深淺與受檢血漿中所含的凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物呈正相關(guān)?！緟⒖贾怠浚?.45士0.4）g/L【臨床意義】反應(yīng)凝血酶活性 TAT增高:見于急性心肌梗塞、 不穩(wěn)定型心絞痛、DIC、DVT、腦梗塞、急性白血病等。（三）血漿凝血酶抗凝血酶復(fù)合物測定第五節(jié)纖溶活性檢測P296第五節(jié)P296幾乎在凝血開始的同時，纖維蛋白溶解系統(tǒng)也被激活。 纖溶系統(tǒng)復(fù)習幾乎在凝血開始的同時，纖維蛋白溶解系統(tǒng)也被激活。 纖纖維蛋白(原)降解機制可溶性纖維蛋白穩(wěn)定性纖維蛋白纖維蛋白原A極附屬物A極附屬物極附屬物

32、多聚體B1-42X,Y,D,EB15-24X,Y,D,E,D-二聚體a纖溶酶纖溶酶纖溶酶凝血酶FPA,FPB FbDPFgDPFDP-二聚體復(fù)習纖維蛋白(原)降解機制可溶性穩(wěn)定性纖維A極附屬物A極附屬纖溶活性檢測P296篩選試驗： 1、D-二聚體定性試驗（D-D）2、纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物定性試驗（FDP）3、優(yōu)球蛋白溶解時間（ELT）診斷試驗： 1、D-二聚體定量試驗（D-D）2、纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物定量試驗（FDP）3、血漿組織型纖溶酶原激活劑（t-PA）測定4、血漿纖溶酶原激活抑制物-1（PAI-1）活性測定5、血漿魚精蛋白副凝固試驗（3P）纖溶活性檢測P296篩選試驗： 1、D-二聚

33、體定性試驗（DD-二聚體測定（D-dimer, D-D） 它是交聯(lián)纖維蛋白的特異性產(chǎn)物，為繼發(fā)性纖溶特有的代謝物，其在血漿中濃度增高，表示纖維蛋白溶解亢進。P306篩檢試驗D-二聚體測定（D-dimer, D-D） 它是交聯(lián)纖維蛋纖維蛋白(原)降解機制可溶性纖維蛋白穩(wěn)定性纖維蛋白纖維蛋白原A極附屬物A極附屬物極附屬物多聚體B1-42X,Y,D,EB15-24X,Y,D,E,D-二聚體a纖溶酶纖溶酶纖溶酶凝血酶FPA,FPB-二聚體纖維蛋白(原)降解機制可溶性穩(wěn)定性纖維A極附屬物A極附屬【方法】1、膠乳法-定性試驗（篩檢試驗）2、酶免法-定量試驗（診斷試驗） 【方法】【臨床意義】纖溶活性增強的篩

34、選、診斷試驗。 1、是診斷DIC的重要依據(jù)。此外，血栓性疾病時也升高。 2、可作為原發(fā)性纖溶與繼發(fā)性纖溶鑒別的可靠指標，前者呈陰性或不升高，后者呈陽性或升高。 3、溶栓治療的監(jiān)測。篩檢試驗【臨床意義】纖溶活性增強的篩選、診斷試驗。篩檢試驗纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物檢測（FDPs）纖維蛋白原降解產(chǎn)物和纖維蛋白降解產(chǎn)物統(tǒng)稱為纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDPs）。FDPs對血液凝固和血小板的功能均有一定的影響。P306篩檢試驗纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物檢測（FDPs）纖維蛋白原降解產(chǎn)物和纖纖維蛋白(原)降解機制可溶性纖維蛋白穩(wěn)定性纖維蛋白纖維蛋白原A極附屬物A極附屬物極附屬物多聚體B1-42X,Y,D,EB1

35、5-24X,Y,D,E,D-二聚體a纖溶酶纖溶酶纖溶酶凝血酶FPA,FPB FbDPFgDPFDP-二聚體纖維蛋白(原)降解機制可溶性穩(wěn)定性纖維A極附屬物A極附屬【方法】1、膠乳法-定性試驗（篩檢試驗）2、酶免法-定量試驗（診斷試驗） 【方法】【臨床意義】纖溶活性增強的篩選、確診試驗。1、原發(fā)性纖溶 2、繼發(fā)性纖溶：DIC、惡性腫瘤、急性早幼粒細胞白血病、肺血栓栓塞、深靜脈血栓形成、心、肝、腎疾病，溶栓治療等所致的繼發(fā)性纖溶亢進時FDP含量升高?！九R床意義】纖溶活性增強的篩選、確診試驗。（三）優(yōu)球蛋白溶解時間（ELT） 【原理】 血漿優(yōu)球蛋白蛋白組分中含有纖維蛋白原、纖溶酶原和組織型纖溶酶原激

36、活劑等，但不含纖溶酶抑制物。受檢血漿置于醋酸溶液中，使優(yōu)球蛋白沉淀，經(jīng)離心除去纖溶抑制物，將沉淀的優(yōu)球蛋白溶于緩沖液中，再加入適量鈣溶液或凝血酶，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白凝塊，觀察凝塊完全溶解所需時間。 【臨床意義】1.纖維蛋白凝塊在70min內(nèi)完全溶解,表明纖溶活性增強,見于原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶,如手術(shù)、創(chuàng)傷、休克、羊水栓塞、急性白血病和晚期肝硬化等。 2.纖維蛋白凝塊完全溶解時間超過120分鐘,表明纖溶活性減低, 見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病和應(yīng)用抗纖溶藥等。篩檢試驗（三）優(yōu)球蛋白溶解時間（ELT） 【原理】【臨床意義】篩檢試（一）血漿組織型纖溶酶原激活物（t-PA）活性測定【參考值】0

37、.30.6IU/ml 【臨床意義】1.增高 表明纖溶活性亢進,見于原發(fā)性纖溶癥、繼發(fā)性纖溶癥如DIC等。2.減低 表明纖溶活性減弱,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病,如動脈血栓形成等。 診斷試驗（一）血漿組織型纖溶酶原激活物（t-PA）活性測定【參考值（三）血漿纖溶酶原激活抑制物-1活性測定【參考值】0.11.0抑制單位/毫升【臨床意義】 1.增高 表明纖溶活性減弱,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。 2.減低 表明纖溶活性亢進,見于原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶癥。（三）血漿纖溶酶原激活抑制物-1活性測定（四）血漿魚精蛋白副凝固試驗【原理】 plasma protamine paracoagulation test

38、, PPPT, 3P試驗 FDPs+sFM sFM析出加入魚精蛋白 sFM聚合 肉眼可見的纖維狀物（四）血漿魚精蛋白副凝固試驗【原理】 plasma prot【參考結(jié)果】陰性【臨床意義】 1.陽性 見于DIC的早、中期,但在惡性腫瘤、上消化道出血、外科大手術(shù)后、敗血癥、腎小球疾病、分娩等也可出現(xiàn)假陽性。 2.陰性 見于正常人、晚期DIC和原發(fā)性纖溶癥,也有假陰性。 【參考結(jié)果】陰性第八節(jié)檢測項目的選擇和應(yīng)用P302第八節(jié)P302一、篩檢試驗的選擇與應(yīng)用（一）一期止血缺陷篩檢試驗的選擇與應(yīng)用一期止血缺陷是指血管壁和血小板缺陷。BTPLT計數(shù)結(jié)果判斷疾病NN血管壁通透性、脆性增加所致的血管性紫癜過

39、敏性紫癜、單純性紫癜延長減少血小板數(shù)量減少原發(fā)性和繼發(fā)性血小板減少性紫癜延長增多血小板數(shù)量增多原發(fā)性和反應(yīng)性血小板增多癥延長正常血小板功能異?；蚰蜃訃乐厝狈ρ“鍩o力癥、低纖維蛋白原血癥、vWD一、篩檢試驗的選擇與應(yīng)用（一）一期止血缺陷篩檢試驗的選擇與（二）二期止血缺陷篩檢試驗的選擇與應(yīng)用二期止血缺陷是指凝血因子缺陷或病理性抗凝物質(zhì)存在。APTTPT結(jié)果判斷疾病NN遺傳性和獲得性因子X缺陷癥延長正常內(nèi)源性凝血途徑缺陷遺傳性和獲得性、缺陷癥正常延長外源性凝血途徑缺陷遺傳性和獲得性缺陷癥延長延長共同凝血途徑缺陷遺傳性和獲得性、缺陷癥（二）二期止血缺陷篩檢試驗的選擇與應(yīng)用二期止血缺陷是指凝血（三

40、）纖溶亢進篩檢試驗的選擇與應(yīng)用纖溶亢進出血是指纖維蛋白（原）和某些凝血因子被纖溶酶降解所引起的出血。FDPsD-D結(jié)果判斷疾病NN纖溶活性正常，臨床癥狀可能與纖溶癥無關(guān)+-原發(fā)性纖溶-+繼發(fā)性纖溶DIC+繼發(fā)性纖溶DIC和溶栓治療后（三）纖溶亢進篩檢試驗的選擇與應(yīng)用纖溶亢進出血是指纖維蛋白二、出血病項目的選擇和應(yīng)用三、診斷血栓病項目的選擇和應(yīng)用二、出血病項目的選擇和應(yīng)用什么是DIC？ 創(chuàng) 傷病理產(chǎn)科感 染休 克溶 血腫 瘤一些致病因素凝血系統(tǒng)激活出血血小板聚集血小板數(shù)減少纖維蛋白（凝血塊）凝血因子消耗微循環(huán)障礙低血壓栓塞溶血四、DIC項目的選擇與應(yīng)用P：306什么是DIC？創(chuàng) 傷一些致凝血系統(tǒng)

41、激活出血血小板血小板數(shù)減（一）DIC診斷的篩選試驗PLT、PT、Fg定量PLT：需作動態(tài)觀察，持續(xù)性下降支持DIC診斷。PT：縮短延長Fg：進行性減低，1.5g/L（一）DIC診斷的篩選試驗PLT、PT、Fg定量（二）DIC診斷的確診試驗TT、FDP、D-二聚體測定TT：延長（可由Fg減少，或FDP增高引起）FDP：增高D-二聚體：陽性（二）DIC診斷的確診試驗TT、FDP、D-二聚體測定（三）DIC診斷標準篩選試驗全部陽性，或兩項陽性，再加一項確診試驗陽性即可確診。（三）DIC診斷標準篩選試驗全部陽性，或兩項陽性，再加一項確顯性（失代償）DIC的診斷危險性評估：若存在易致DIC的原發(fā)病記2分，不存在記0分。計分標準：PLT： 100記0分； 100記1分； 50記2分纖維蛋白相關(guān)標志物：未增高0分；中度增高2分；重度增高3分PT：未延長或延長3s記0分；延長36s記1分； 6s記2分Fg：1.0g/L記0分； 1.0g/L記1分累計積分5分顯性（失代償）DIC的診斷危險性評估：若存在易致DIC的原發(fā)五、抗血栓和溶血栓治療監(jiān)測項目的選擇和應(yīng)用 1.普通肝素(uFH)和低分子量肝素(LMWH)的監(jiān)測 uFH: 參考值為3134s, 延長1s 為預(yù)防治療有效值，治療時APTT