虎杖中白藜蘆醇的提取與分離工藝研究

1、虎杖中白藜蘆醇的提取與別離工藝研究【關(guān)鍵詞】虎杖；,白藜蘆醇；,大孔樹脂；,硅膠柱層析摘要：目的優(yōu)選虎杖的白藜蘆醇最正確提取工藝。方法采用正交實(shí)驗(yàn)法，以白藜蘆醇提取量為指標(biāo)，高效液相色譜法HPL測(cè)含量，優(yōu)選提取工藝條件。以大孔樹脂富集及色譜法別離、純化白藜蘆醇。結(jié)果乙醇提取最正確工藝為10倍量的90%乙醇回流提取2次，1h/次。經(jīng)AB8樹脂吸附富集，硅膠柱色譜純化，可獲得高純度的白藜蘆醇產(chǎn)品。結(jié)論該工藝可用于指導(dǎo)消費(fèi)。關(guān)鍵詞：虎杖；白藜蘆醇；大孔樹脂；硅膠柱層析StudynExtratinPressfResveratrlinPlygnuuspidatuAbstrat:bjetiveTstudy

2、theptiuextratinpressfresveratrlinPlygnuuspidatu.ethdsTheptiuextratinpressasinvestigatedbyrthgnaldesignandtheindexftheethdasthententsfresveratrl.ThetehnlgyfarprusadsrptiveresinandhratgraphyasusedintheseparatinandpurifiatinfresveratrlbyHPL.ResultsTheptiunditinfethanlextratin:10tiesauntf90%ethanlandext

3、rated2ties,1hurnetie.ThepurityftheprdutasgainedbythetehnlgyfresinAB8adsrptinandsilialunhratgraphypurifiatin.nlusinTheptiuextratinpressandiretprdutin.Keyrds:Plygnuuspidatu;Resveratrl;arprusadsrptiveresin;Slialunhratgraphy白藜蘆醇3，4，5，三羥基二苯乙烯；transresveratrl是一類親脂性多酚物質(zhì)，在虎杖、葡萄、花生、松樹等植物中存在，其中以虎杖的含量為最豐富。其游離的

4、白藜蘆醇高于0.58%1。虎杖為蓼科植物虎杖PlypnuupiltuSied.etZu的根莖。具有祛風(fēng)利濕、散淤定痛、止咳化痰成效2。白藜蘆醇具有抗血小板凝聚，保護(hù)肝臟，抗腫瘤活性等藥理作用，特別是對(duì)心腦血管系統(tǒng)具有較強(qiáng)的藥理活性。本實(shí)驗(yàn)采用正交實(shí)驗(yàn)，利用乙醇回流提取的方法和大孔樹脂吸附及硅膠柱色譜技術(shù)，并采用HPL方法進(jìn)展含量測(cè)定3，4，對(duì)虎杖中的白藜蘆醇進(jìn)展提取別離純化研究。本研究旨在為虎杖開發(fā)利用提供科學(xué)根據(jù)。1材料與儀器DINEXHPL色譜儀P680HPLPup.UV170檢測(cè)器hrelen工作站萬分之一電子天平BS110SSartrius公司白藜蘆醇對(duì)照品Siga公司虎杖飲片湖北省藥

5、材公司經(jīng)鑒定為蓼科植物PlypnuupiltuSieb.etZu枯燥根莖。2方法與結(jié)果2.1白藜蘆醇含量測(cè)定方法2.1.1色譜條件色譜柱DS184.6250，5；流動(dòng)相乙腈水0.02%磷酸3070；流速1l/in；柱溫30；檢測(cè)波長(zhǎng)303n；20l進(jìn)樣環(huán)。理論塔板數(shù)不低于3000；別離度大于1.5。2.1.2線性關(guān)系考察精細(xì)稱取枯燥白藜蘆醇對(duì)照品330g，置10l容量瓶中加甲醇制成濃度33g/l的溶液作為對(duì)照品溶液。分別汲取對(duì)照品溶液各1，3，5，7，9l，按上述色譜條件進(jìn)展測(cè)定，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，白藜蘆醇對(duì)照品進(jìn)樣量換算為濃度值為橫坐標(biāo)，計(jì)算線性回歸方程為：Y=1.9888X-0.11

6、66n=0.9992，其進(jìn)樣濃度值在1.6514.85g/l范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.2提取工藝優(yōu)選根據(jù)初步挑選的結(jié)果，按表1設(shè)定的因素程度進(jìn)展正交實(shí)驗(yàn)，挑選最正確的工藝條件。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.表1因素程度(略)稱取虎杖藥材粗粉共9組，每組50g，按L934正交表的條件進(jìn)展加熱回流提取，將提取液回收乙醇后用75%的乙醇定容置500l，從每份中汲取50l，用75%的乙醇定容置500l；再?gòu)闹屑橙?0l用甲醇定容置25l，濾過，測(cè)量每份樣品中白藜蘆醇的含量，換算成每100g虎杖所提取出白藜蘆醇的量，結(jié)果及統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)見表23。直觀分析說明在所選因素程度范圍內(nèi)，乙醇濃度對(duì)白藜蘆醇的提取效果影響最大，提

7、取次數(shù)次之，提取時(shí)間影響最??；經(jīng)方差分析乙醇濃度和提取次數(shù)具有顯著性，故優(yōu)化工藝為A3B32D2，即90%乙醇提取兩次，每次10倍量，提取1.0h。根據(jù)所選工藝條件進(jìn)展3批驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，其提取量與表2中最好程度相近，說明該提取工藝穩(wěn)定可行。2.3別離、純化工藝將乙醇溶液回收完乙醇后，用15倍量飽和異丁醇萃取，以1l/in速度進(jìn)展AB8大孔吸附樹脂吸附，大水洗至流出液無色，再改用20%甲醇洗脫5，得甲醇液?；厥占状迹瑢悠酚眠m量硅膠拌樣，上硅膠H柱以石油醚醋酸乙脂91洗脫6，搜集其有藍(lán)色熒光254n的組分，經(jīng)丙酮重結(jié)晶得到無色針狀結(jié)晶，經(jīng)與對(duì)照品混合熔點(diǎn)測(cè)得及HPL測(cè)定，證實(shí)為白藜蘆醇，其濃度99%

8、以上。表2L934正交實(shí)驗(yàn)(略)表3方差分析(略)3討論在正交實(shí)驗(yàn)中提取2次比3次及提取1.0h比提取1.5h的提取效果好，可能是3次提的溶液體積比2次提取的溶液體積大，回收乙醇的時(shí)間較長(zhǎng)；提取1.5h所受熱時(shí)間較長(zhǎng)，白藜蘆醇長(zhǎng)時(shí)間受熱穩(wěn)定性較差，所以表現(xiàn)為提取效率下降。該實(shí)驗(yàn)采用硅膠柱層脫色素，其產(chǎn)品的收得率有待進(jìn)一步進(jìn)步，或采用其他脫色技術(shù)，有待進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)：1曾建國(guó),侯團(tuán)章,張勝.高效液相色譜法測(cè)定虎杖提取物中白藜蘆醇的含量J.中國(guó)中醫(yī)藥科技,2000,7(3):175.2黃康泰.常用中藥化學(xué)成分與活性手冊(cè).北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,1994:1222.3周建軍,張宏杰,楊培君,等.漢中地區(qū)虎杖中白藜蘆醇苷及苷元含量測(cè)定J.中草藥,2002,33(