臨床微生物質(zhì)譜鑒定技術(shù)及其應用初探

1、檢驗科 微生物室質(zhì)譜技術(shù)及其應用初探現(xiàn)代感染性疾病和臨床微生物檢測現(xiàn)狀耐藥菌株增多疑難菌株增多現(xiàn)代感染性疾病新特點條件致病菌增多人員少、鑒定速度較慢感染菌種類增多臨床微生物當前現(xiàn)狀病原生長時間報告時間需氧菌24h3-4個工作日厭氧菌48h酵母菌2-5天5-7個工作日絲狀真菌2-5天 第一天 第二天 第三-四天分純培養(yǎng)常規(guī)微生物檢驗遇到的困惑：呼吸道、腸道標本的細菌種類繁多，常規(guī)的鑒定成本高或者操作麻煩， 容易漏掉或者忽視某些細菌。厭氧菌、彎曲菌、分枝桿菌和真菌：培養(yǎng)的難點，鑒定的死角，技術(shù)上不好掌握或者成本高、時間長，難以實施。血培養(yǎng)的分級報告制度：存在很多變數(shù)，使得初次報告的結(jié)果可靠性 得不

2、到臨床的認可。（比如：直接革蘭染色涂片，初步能估計細菌大類，但是無法確切到種。比如：L型菌無法確定其革蘭染色性。）操作方便的，成本便宜的。不僅是實驗室要求的，更是臨床迫切需要的。將實驗室人員從一些技術(shù)要求較低的、能由儀器完成的工作中解脫出來，提高標本處理效率，縮短報告時間。 臨床微生物實驗室自動化 MALDI-TOF革命性基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)MALDI-TOF MS蛋白質(zhì)指紋特征梅里埃VITEK MS的數(shù)據(jù)庫包含IVD1046種菌和RUO1500種菌的圖譜。挑取部分菌落點樣至靶板生成圖譜搜庫鑒定質(zhì)譜檢測流程MALDI TOF檢測加基質(zhì)液 質(zhì)譜作為一項細

3、菌鑒定領(lǐng)域的革新技術(shù)，與現(xiàn)有傳統(tǒng)的鑒定診斷技術(shù)相比，具有操作簡單、快速、通量高、靈敏度高、準確度好、試劑耗品非常經(jīng)濟等優(yōu)勢。準確度時間（包括操作）成本MALDI-TOF技術(shù)90%20min20元常規(guī)方法80%2448 h50元 質(zhì)譜鑒定技術(shù)的臨床價值縮短了常規(guī)微生物培養(yǎng)鑒定時間。運用質(zhì)譜檢測技術(shù)則可縮短至少1天的鑒定時間，為臨床救治危急重癥患者贏得更多時間。而有研究證實，在重癥監(jiān)護室（ICU）臨床治療中，抗生素如果晚一小時準確治療，病人存活率下降8%。Impact of Rapid Organism Identification via Matrix-Assisted Laser Desorp

4、tion/IonizationTime-of-Flight Combined With Antimicrobial Stewardship Team Intervention in Adult Patients With Bacteremia and Candidemia屆由質(zhì)譜快速分析及快速藥敏介入臨床抗生素管理小組執(zhí)行成人病患菌血癥及霉菌血癥的影響Clinical Infectious Diseases 2013;57(9):123745快速鑒定質(zhì)譜結(jié)合藥敏報告減少鑒定時間并幫助臨床執(zhí)行最合適抗生素用藥30 天內(nèi)死亡率減少6.6%;ICU 住院天數(shù)減少6.6天;對癥用藥時間縮短10個小時

5、鑒定/藥敏最終報告時間提早 29小時; 84hr vs 55.9hr有效用藥時間提早十個小時: 30.1hr vs 20.4 hr正確使用廣效抗生素選擇提早43小時 ; 90.3hr vs 47.3 hr501位臨床病患中, 快速報告族群30天內(nèi)死亡率減少6.6%膿毒癥復發(fā)率減少3.9% ; 5.9% vs 2.0%對少見菌、厭氧菌、部分真菌、奴卡菌等非常難鑒定菌的檢測準確度和速度將大大提高。少見菌往往有其獨特的藥物選擇，比如布魯菌屬首選四環(huán)素類、奴卡菌首選復方新諾明等等?？巳峒俳z酵母菌對氟康唑天然耐藥，熱帶假絲酵母菌對唑類藥物的耐藥性也有上升。 質(zhì)譜鑒定技術(shù)的臨床價值產(chǎn)單核李斯特菌4度可生長

6、，易污染食物和乳制品，對人類可引起原發(fā)性腦膜炎、腦炎、敗血癥。對兒科常用藥物頭孢菌素天然耐藥，對氨芐西林敏感。因此，實驗室一旦發(fā)現(xiàn)疑似產(chǎn)單核李斯特菌可能，就要快速給予臨床相關(guān)信息。 梅里埃細菌鑒定藥敏分析儀 給出兩個鑒定選項（產(chǎn)單核、無害李斯特菌），VITEK 2 COMPACT 需要補充CAMP試驗結(jié)果（24小時孵育）質(zhì)譜鑒定 直接給出99.9%的鑒定結(jié)果 產(chǎn)單核李斯特菌微小單胞菌對少見菌、厭氧菌、部分真菌、奴卡菌等非常難鑒定菌的檢測準確度和速度將大大提高。少見菌往往有其獨特的藥物選擇，比如布魯菌屬首選四環(huán)素類、奴卡菌首選復方新諾明等等?？巳峒俳z酵母菌對氟康唑天然耐藥，熱帶假絲酵母菌對唑類藥物的耐藥性也有上升。 質(zhì)譜鑒定技術(shù)的臨床價值 質(zhì)譜鑒定技術(shù)的臨床價值 使血培養(yǎng)的分級報告更準確 臨床醫(yī)師可根據(jù)以往的耐藥監(jiān)測結(jié)果進行用藥選擇MALDI-TOF MS對血培養(yǎng)陽性樣本的直接檢測優(yōu)