現(xiàn)代技術(shù)檢測重點(diǎn)

1、樣品前處理（小結(jié)）1、樣品前處理的定義？指樣品的制備和對樣品中待測組分進(jìn)行提取、凈化、濃縮的過程2、樣品前處理的原則？樣品必須完全溶解，不能有待測組分的流失；不能污染，或引入待測組分、干擾物質(zhì)；方法簡單易行、快速、實惠、安全、污染??；所用器皿與樣品量相適3、樣品提取的方法有哪幾種？液-液萃?。↙LE）、液-固萃取、柱色譜萃取4、凝膠滲透色譜的原理及洗脫順序？基于物質(zhì)分子大小不同來實現(xiàn)分離的一種色譜技術(shù)。樣品中的大分子先被洗脫下來，小分子后被洗脫下來。5、固相萃取的原理？固相萃?。⊿PE）是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，與樣品的基體和干 擾物分離，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，從

2、而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。6、固相萃取的過程？（1）吸附劑的預(yù)處理：為保證萃取良好的再現(xiàn)性，固相柱在使用前必須用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑?。?）添加樣品（3）固相柱的洗滌（4）固相柱的干燥（5）分析物的洗脫液質(zhì)聯(lián)用（小結(jié)）1、質(zhì)譜儀有哪幾部分組成？進(jìn)樣系統(tǒng)一離子源一質(zhì)量分析器一檢測器2、離子源有哪幾種？（電子）EI電離源、（化學(xué)）API電離源3、大氣壓電離源有哪幾種及它們各自的適用范圍？APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子。ESI能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。4、質(zhì)量分析器有哪幾種及適用范圍？四極桿分析器：多用于定量，最常用離子阱質(zhì)量分析器：推斷結(jié)構(gòu)飛

3、行時間析器：精確于分子量毛細(xì)管電泳（小結(jié)與上屆重點(diǎn)）1、什么是電泳？在電解質(zhì)溶液中，位于電場中的帶電離子在電場力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相 反的電極方向遷移的現(xiàn)象，稱之為電泳。2、什么是電滲流？電滲現(xiàn)象中整體移動著的液體叫電滲流（電滲現(xiàn)象：當(dāng)固體與液體接觸時，固體表面由于某 種原因帶一種電荷，則因靜電引力使其周圍液體帶有相反電荷，在液-固界面形成雙電層， 二者之間存在電位差。當(dāng)液體兩端施加電壓時，就會發(fā)生液體相對于固體表面的移動，這種 液體相對于固體表面的移動的現(xiàn)象叫電滲現(xiàn)象。）3、什么是電泳淌度，電滲淌度和表觀淌度？電泳淌度：單位場強(qiáng)下，離子的電泳速率為電泳淌度（pep ）。電滲淌

4、度：電滲流的遷移速率ueof和電場強(qiáng)度E成正比。單位電位梯度的電滲速率為電滲 淌度peof表觀淌度：單位場強(qiáng)下，離子在實際分離過程中的遷移速度（表觀遷移速度）4、各種電性離子在毛細(xì)管柱中的遷移速度是怎么樣的？（石英毛細(xì)管，帶負(fù)電）陽離子運(yùn)動方向與電滲流一致，最先流出中性粒子運(yùn)動方向與電滲流一致陰離子運(yùn)動方向與電滲流相反，在中性離子后流出；5、改變電滲流方向的方法有哪些（1）毛細(xì)管改性（2）加電滲流反轉(zhuǎn)劑6、電滲流受哪些因素影響？電場強(qiáng)度的影響電滲流速度和電場強(qiáng)度成正比，當(dāng)毛細(xì)管長度一定時，電滲流速度正比于工作電壓。毛細(xì)管材料的影響不同材料毛細(xì)管的表面電荷特性不同，產(chǎn)生的電滲流大小不同；溶液PH

5、的影響對于石英毛細(xì)管，溶液pH增高時，表面電離多，電荷密度增加，管壁zeta電勢增大， 電滲流增大；pH3，完全被氫離子中和，表面電中性，電滲流為零。分析時，采用緩沖溶 液來保持pH穩(wěn)定。溫度的影響毛細(xì)管內(nèi)溫度的升高，使溶液的黏度下降，電滲流增大。溫度每變化1，將引起背景電 解質(zhì)溶液黏度變化2%3%；添加劑的影響（1）加入濃度較大的中性鹽，如K2SO4，溶液離子強(qiáng)度增大，使溶液的黏度增大，電滲流 減小。（2）加入表面活性劑，可改變電滲流的大小和方向；加入不同陽離子表面活性劑來控制電滲流。加入陰離子表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉（SDS），可以使壁表面負(fù)電荷增加，zeta 電勢增大，電滲流增大；（

6、3 ）加入有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈，使電滲流增大。第8章薄層色譜法（上課知識點(diǎn)加上屆重點(diǎn)）1、對吸附劑的要求（1 ）、應(yīng)不溶于所使用的溶劑以及與所使用的溶劑和樣品中各組分不起化學(xué)反應(yīng)（2）、應(yīng)具有較大的吸附表面（吸附容量）和一定的吸附力，對被分離物質(zhì)應(yīng)有足夠的分辨 力（3）、吸附劑顆粒大小要均勻，保持良好的重復(fù)性2、分離效率與什么有關(guān)：分離效率與其粒度、孔徑及表面積等有關(guān)3、常用溶劑的極性強(qiáng)弱順序：（大概記一下）水酸毗啶甲醇乙醇正丙醇石油醚4、混合溶劑1、先用單一的溶劑展開2、若Rf值太小，則加入一定量的極性強(qiáng)的溶劑，如乙醇、丙酮等3、如果Rf值太大，則加入適量極性弱的溶劑，如環(huán)已烷、石油醚等，以

7、降低極性4、可加入一定比例的酸或堿，使斑點(diǎn)集中5、薄層色譜操作方法制板（均勻）、點(diǎn)樣（集中）、展開（多種方式，預(yù)飽和）、顯色6、分配薄層色譜：利用被分離組分對固體表面活性吸附中心吸附能力的差別而實現(xiàn)分離7、吸附薄層色譜：利用被分離組分在固定相與流動相中的分配系數(shù)不同，各組分遷移速率 不同而實現(xiàn)分離的方法8、比移值的概念：用來表征斑點(diǎn)位置的基本參數(shù)是保留因子，通常稱作比移值，用Rf表示。第9章紫外一可見分光光度分析法（上課知識點(diǎn)，黑體字為上屆重點(diǎn)）1、紫外可見區(qū)：紫外區(qū)200400nm，可見區(qū)400760nm2、吸光定律：（我找不到答案）3、紫外可見分光光法是一種電子躍遷光譜4、發(fā)色團(tuán)，助色團(tuán)，

8、紅移，藍(lán)移，增色效應(yīng)，減色效應(yīng)5、分光光度計的組成：光源一一單色器一一樣品室一一檢測器一一顯示記錄系統(tǒng)6、檢測器有哪些：光電池、光電管、光電倍增管1、紫外一可見分光光度法是一種分子吸收光譜，紫外-可見吸收光譜主要研究共軛雙鍵結(jié)構(gòu) 的有機(jī)化合物2、光是一種電磁波，具有波粒二象性。光的波動性可用波長從頻率V、光速c、波數(shù)（cm-1） 等參數(shù)來描述：X V = c ；波數(shù)=1/ X = v /c粒子性則用能量描述，光是由光子流組成，光子的能量：E = h V = h c / X（Planck 常數(shù)：h=6.626 X 10 -34 J S ）光的波長越短（頻率越高），其能量越大。3、分子具有三種不同

9、能級：電子能級、振動能級和轉(zhuǎn)動能級，三種能級都是量子化的，且 各自具有相應(yīng)的能量分子的內(nèi)能：電子能量Ee、振動能量Ev、轉(zhuǎn)動能量Er即 E=Ee+Ev+Er E eA E vA E r4、生色團(tuán)，助色團(tuán)生色團(tuán)（和助色團(tuán)）是分子產(chǎn)生紫外-可見吸收的條件生色團(tuán)（chromophore）：能產(chǎn)生紫外-可見吸收的官能團(tuán)，如一個或幾個不飽和鍵C=C, C=O, N=N, N=O 等助色團(tuán)（auxochrome）:有一些含有n電子的基團(tuán)（如一OH、一OR、一NH 2、一NHR、一X 等），它們本身沒有生色功能（不能吸收入200nm的光），但當(dāng)它們與生色團(tuán)相連時，就會發(fā) 生nn共軛作用，增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力

10、（吸收波長向長波方向移動，且吸收強(qiáng)度增加）， 這樣的基團(tuán)稱為助色團(tuán)。5、紅移，藍(lán)移由于化合物結(jié)構(gòu)變化（共軛、引入助色團(tuán)取代基）或采用不同溶劑后吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移吸收峰位置向短波方向移動，叫藍(lán)移增色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度增強(qiáng)的效應(yīng)減色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度減小的效應(yīng)6、影口 .共軛效應(yīng)的影響/ . 兀電子共軛體系增大，人max紅移， max增大空間阻礙使共軛體系破壞，人max藍(lán)移， max減小。取代基的影響給電子基：含未共用電子對的原子的基團(tuán)。-NHZ, -OH等。吸電子基：易吸引電子而使電子容易流動的基團(tuán)。如：-NO2, -CO等給電子基未共用電子對流動性大，形成p-兀共軛，降低能量，人max

11、紅移。吸電子基的存在產(chǎn)生兀電子的永久性轉(zhuǎn)移，入max紅移。兀電子流動性增加，吸收光子的吸收分?jǐn)?shù)增加，吸收強(qiáng)度增加。a)b)c)d)溶劑的影響極波移25( 0劑3000()正丁烷浴派水溶液a)b)c)d)溶劑的影響極波移25( 0劑3000()正丁烷浴派水溶液b）溶劑極性增大，n *躍遷波長藍(lán)移A ：吸光度；描述溶液對光的吸收程度；陜光程長度，單位cm；c：溶液的量濃度，單位moLL-1； 一藝辛方可E :摩爾吸光系數(shù)，單位Lmol-I、cm-L；.4 = lg y- - abCc：溶液的濃度，單位g-L-1o：吸光系數(shù)，單位L-g-1 -cm-1a與E的關(guān)系為：a =E /M （M為摩爾質(zhì)量）

12、8、關(guān)于摩爾吸光系數(shù)的討論-摩爾吸光系數(shù)在數(shù)值上等于濃度為1 moLL-1、液層厚度為1cm時該溶液在某一波 長下的吸光度；-吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)心 不隨濃度c和光程長度b的改變而改變。在溫度和波長等條件一定時，僅與吸收 物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；心可作為定性鑒定的參數(shù)；-同一吸收物質(zhì)在不同波長下的值是不同的。在最大吸收波長A max處的摩爾吸光 系數(shù)，以 max表示。- max表明了該物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的 最大靈敏度。- max越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。 105：超高靈敏； =（610）

13、X104 :高靈敏； 2X104 :低靈敏。9、單色器的作用將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出任一波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；色散元件：將復(fù)合光分解成單色光；棱鏡或光柵；聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；出射狹縫。10、顯色劑的類型（知道有哪幾類）無機(jī)顯色劑：硫氰酸鹽、鉬酸銨、過氧化氫等幾種。有機(jī)顯色劑：種類繁多偶氮類顯色劑：本身是有色物質(zhì)，生成配合物后，顏色發(fā)生明顯變化；具有性質(zhì)穩(wěn)定、顯色 反應(yīng)靈敏度高、選擇性好、對比度大等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用最廣泛。偶氮胂III、PAR等。三苯甲烷類：鉻天青S

14、、二甲酚橙等11、吸光度讀數(shù)范圍用儀器測定時應(yīng)盡量使溶液透光度值在T %=1565%（吸光度 A = 0.800.20）。12、雙波長分光光度法不需空白溶液參比；但需兩個單色器獲得兩束單色光0 1和人2）；以參比波艮1處的吸光 度A入1作為參比，來消除干擾。乙 A=AK 2A入 1 = G 入 2-8 入 1）bc優(yōu)勢：在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時顯示出很大的優(yōu)越性。 靈敏度、選擇性、測量精密度高第10章紅外吸收光譜（上屆重點(diǎn)）1、紅外吸收光譜概念：是利用物質(zhì)分子對紅外光的吸收，得到與分子結(jié)構(gòu)相應(yīng)的紅外光譜 力，從而來鑒別分子結(jié)構(gòu)的方法。2、振動形式：雙原子分子只有一種振動形式，多原子

15、分子引起偶極炬變化的振動，一般可 分為兩大類，即伸縮振動、變形振動3、產(chǎn)生光譜的條件（1）紅外輻射的能量必須與分子的振動能級差相等（2）分子振動過程中其偶極矩必須發(fā)生變化。4、特征區(qū)域的概念：有機(jī)化合物的分子中一些主要官能團(tuán)的特征吸收多發(fā)生在紅外區(qū)域， 40001333cm-1。該區(qū)域吸收峰比較稀疏，容易辯論，幫通常把該區(qū)域叫特征譜帶區(qū)。5、指紋區(qū)的意義，概念概念：紅外吸收光譜上1333400cm-1的低頻區(qū)，該區(qū)域中出現(xiàn)的譜帶主要是C-X （X=C、 N、O）單鍵的伸縮振動及各種彎曲振動，由于這些鍵的鍵強(qiáng)差別不大，原子質(zhì)量又相似， 所以譜帶出現(xiàn)的區(qū)域也相近，互相間影響較大，加之各種彎曲振動能

16、級差小，所以這一區(qū)域 譜帶特別密集，猶如人的指紋，故稱指紋區(qū)。意義：各個化合物在結(jié)構(gòu)上的微小差異在指紋區(qū)都會得到反映，因此，在核對和確認(rèn)有機(jī)化 合物時用處很大。6、兩種紅外光譜的優(yōu)缺點(diǎn)？（不知道問什么）色譜型紅外光譜儀：價格低，速度慢，分辨率低，一般采用雙光束，（與紫外不同的是色譜 型的樣品是放在光源和單色器之間）。傅立葉變換型紅外光譜儀：掃描速度快，適合食品聯(lián)用；不需要分光，信號強(qiáng)，靈敏度高; 儀器小巧。7、紅外的樣品（可以是固、液、氣態(tài)）質(zhì)譜法（上屆重點(diǎn)）1、質(zhì)譜法的主要組成（六部分）進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、質(zhì)量分析器、檢測器、真空系統(tǒng)和工作站2、離子源有哪幾種電子轟擊源（EI）、化學(xué)電離源（C

17、I）、場致電離源（FI）、光致電離源（PI）3、質(zhì)量分析器有哪幾種，用于？四極桿分析器：多用于定量，最常用離子阱質(zhì)量分析器：推斷結(jié)構(gòu)飛行時間析器：精確于分子量4、最常有的串聯(lián)質(zhì)譜（最常用的，掃描方法，多反應(yīng)監(jiān)測，是如何掃描的）氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已發(fā)展成為最完善，最成熟的色譜聯(lián)用技術(shù)。全掃描模式（Scan）：掃描的質(zhì)量范圍覆蓋被測化合物的分子離子和碎片離子的質(zhì)量是化合物的全譜可用于譜庫檢索選擇離子監(jiān)測模式（SIM）：跳躍式地掃描某幾個選定的質(zhì)荷比，獲得的質(zhì)譜圖不是化合物 的全譜子離子掃描：-掃描指定母離子的子離子碎片，所得到的質(zhì)譜圖只能是由指定的母離子經(jīng)碰 撞產(chǎn)生的母離子掃描：掃描能丟失指定質(zhì)譜碎片的

18、母離子，所得到的母離子質(zhì)譜峰一定是能丟失指定 質(zhì)譜碎片的母離子。多反應(yīng)監(jiān)測（Multiple Reaction Monitor, LC/MS/MS）:監(jiān)測特定母離子產(chǎn)生特定子離子碎片的化合物，目標(biāo)化合物的跟蹤，提高采集靈敏度，是靈敏度最高的定量采集方式上屆氣相色譜法重點(diǎn)氣相色譜法：是以氣體作為流動相的柱色譜分析方法。分類：一、按兩相聚集狀態(tài)（1）按流動相的狀態(tài)：液相色譜、氣相色譜、超臨界流體色譜（2） 按固定相的狀態(tài)：液固、液液：氣固、氣液二、按操作方式（1）柱色譜：填充柱、毛細(xì)柱（2）平面色譜：薄層色譜、紙色譜法三、按分離原理分：吸附色譜，分配色譜，離子交換色譜，尺寸排阻色譜，親和色譜氣相色

19、譜分離法的特點(diǎn)：先分離，后檢測氣相色譜應(yīng)用范圍：（1）易揮發(fā)有機(jī)物（2）可衍生化成易揮發(fā)物（3）無機(jī)氣體氣相色譜儀的結(jié)構(gòu)及其作用：1、氣路系統(tǒng)：包括載氣氣源，氣體減壓，穩(wěn)壓，穩(wěn)流和凈化裝置2、進(jìn)樣系統(tǒng)：包括進(jìn)樣閥，氣化室和控溫部分3、分離系統(tǒng)：包括色譜柱，柱室和控溫部分，分離系統(tǒng)是氣相色譜儀的核心部件4、檢測系統(tǒng)：包括檢測器和控溫部分，5、記錄系統(tǒng)：包括放大器，色譜工作站等色譜圖：在氣相色譜分析中，柱后流出物流經(jīng)檢測器時，載氣中各組分的量所產(chǎn)生的信號及 時間的曲線稱為色譜圖流出曲線，又稱為色譜圖。色譜峰：色譜圖中突出部分，是檢測器對組分含量變化所輸出信號的微分曲線。基線：僅有基線通過檢測器時，

20、儀器記錄的響應(yīng)信號曲線稱為基線?；€的波動程度反映儀 器檢測系統(tǒng)噪聲大小。保留值：是定性分析的指標(biāo)保留時間：是組分從進(jìn)樣到出現(xiàn)信號最大值時的時間，tR。死時間：是不被固定相滯留組分的保留時間，tM，反映流動相通過色譜柱所需要的時間。調(diào)整保留時間：tR，指組分的保留時間與死時間之差。相對保留值：在相同的操作條件下，組分i的調(diào)整保留值與組分s的調(diào)整保留值之比，稱為 組分i對組分s的相對保留值，用ris表示。Ris只隨柱溫和固定相的改變而變化，ris的大小， 反映色譜柱對不同組分的選擇性。Ris不等于1，說明色譜柱對兩個組分有選擇性。分離度（分辨率）（Resolution，R）：相鄰兩色譜峰保留值之

21、差與兩峰底寬平均值之比。如果 R=1，W 牝 W =牝 t -1 =At = 4。稱為4a分離，1峰分離達(dá)98% R R2夫如果 R=1.5 t -1 = At = 6。稱為6a分離，峰分離達(dá)99.7%，R=1.5是兩個相鄰色譜峰完全分離的標(biāo)志。定量分析的依據(jù)：峰高，峰面積衡量色譜柱的效能：用峰寬Wb，半峰寬W1/2，標(biāo)準(zhǔn)偏差6（0.067峰高處的峰寬的一半）來 衡量。6值的大小表示色譜柱后流出組分的分散程度，6越小，表明流出組分越集中，柱效越 高。從流出曲線的形狀我們可以得到以下信息：1、應(yīng)用峰數(shù)：判斷樣品中的最少組分?jǐn)?shù)量。2、 保留值：進(jìn)行定性分析。3、峰高或者峰面積：定量分析。4、結(jié)合保

22、留值和區(qū)域?qū)挾戎笜?biāo)： 可以評價色譜柱對組分的分離效能。5、根據(jù)峰間距離：可以評價所選擇的固定相，流動相 是否合理。分配系數(shù)：一定溫度、壓力條件下，組分在兩相間達(dá)到分配平衡時，固定相中組分的濃度與 流動相中組分的濃度之比。K （分配系數(shù)的大小由組分和固定相的熱力學(xué)性質(zhì)決定，與兩相 體積無關(guān)。分配比：又稱容量因子，表示在一定溫度和壓力下，兩相平衡時，固定相中組分的質(zhì)量與流 動相中組分的質(zhì)量之比。K （容量因子越大，固定相對組分的滯留作用越大）氣相色譜的基本理論：塔板理論，速率理論塔板理論的四個基本假設(shè)：1、色譜柱由若干小段組成，每一段稱為一個理論塔板，塔板的段長稱為理論塔板高度，用 H表示。2、塔

23、板中，下層是固定相，上層空間充滿流動相，該空間稱為板體積，載氣脈沖式進(jìn)入色 譜柱，每次進(jìn)氣一個板體積。3、組分在各塔板內(nèi)的兩相間迅速達(dá)到分配平衡，分配系數(shù)恒定不變，與組分濃度無關(guān)。4、開始時，試樣組分全部加在第1塊塔板上，試樣沿色譜柱方向的縱向擴(kuò)散忽略不計。當(dāng)n=5時，即第一個塔板進(jìn)了 5個體積的氣后，組分A開始流出柱出口，進(jìn)入檢測器產(chǎn)生信 號，但此時組分A含量很小，信號很弱。當(dāng)n=8, 9時，柱出口流出量達(dá)最大值，之后又逐漸減小，相應(yīng)產(chǎn)生的電信號由小到大，再 由大到小。當(dāng)n值趨向無窮大時，形成的峰形呈正態(tài)分布。柱效能指標(biāo)：理論塔板數(shù)n，理論塔板高度H，有效塔板數(shù)neff。反映色譜柱對組分的分

24、離 效能。理論塔板數(shù)n：主要由操作系數(shù)決定，組分流過色譜柱時在兩相是進(jìn)行平衡分配的總次數(shù)。n=16 （tR/Wb） 2塔板理論高度H： H=L/n（L為色譜柱的長度）計算題：比較薄的那本復(fù)印本上的186頁色譜柱長L 一定時，組分的H或Heff越小，n或者neff越大，表明色譜柱對該組分的作用 越大，柱效能直高。塔板理論的貢獻(xiàn)與不足：貢獻(xiàn)：（1）較好地解釋了色譜峰形的正態(tài)分布規(guī)律（2）提出了評價柱效能指標(biāo)：n和H不足：（1）沒有考慮動力學(xué)因素對色譜過程的影響，不能解釋載氣流速u對理論塔板數(shù)n 的影響（2）不能回答色譜峰為什么發(fā)生變形（3）不能說明塔板高度受什么因素影響速率理論（Van Deemt

25、er方程）H=A+B/u+CuH有效塔板高度A渦流擴(kuò)散項B/u分子擴(kuò)散項Cu傳質(zhì)阻力項一、渦流擴(kuò)散項A產(chǎn)生原因：隨載氣一起流動的組分由于固定相的阻礙而改變運(yùn)動方向，形成“渦流”，導(dǎo)致 不同的組分分子在柱中走過的路程長短不一致，引起峰形的擴(kuò)張。意義：填充柱填充越均勻規(guī)則，載體平均顆粒直徑越小，則渦流擴(kuò)散越小，色譜峰擴(kuò)張變 形小二、分子擴(kuò)散項B/u（縱向擴(kuò)散項）產(chǎn)生原因:組分被載氣帶入色譜柱后，以“塞子”的形式存在于柱內(nèi)很小一段空間中，在“塞 子”的前后（縱向）存在著濃度差而形成濃度梯度，使運(yùn)動著的分子產(chǎn)生縱向擴(kuò)散 意義：選擇分子量大的組分和載氣，降低色譜柱溫，分子擴(kuò)散項?。簹鈿鈮涸礁?，分子擴(kuò)散

26、程度越小，結(jié)論：減小渦流擴(kuò)散、分子擴(kuò)散、傳質(zhì)阻力，能夠降低塔板高度，有利于提高柱效。氣相色譜中固定液要滿足以下要求：1、操作溫度下呈液態(tài)2、熱穩(wěn)定性好，有較寬的工作 溫度范圍，適應(yīng)寬沸程樣品分析3、選擇性好，對不同組分有不同的溶解能力4、黏度小5、 揮發(fā)性小，不易流失。固定液的選擇：1、選用非極性固定液分離非極性物質(zhì)2、選用極性固定液分離極性物質(zhì)3、選用極性固定液，分離含有極性組分和非極性組分的混合試樣4、選擇氫鍵型或極性固定液，分離含有能形成氫鍵組分的試樣5、選擇兩種或兩種以上的混合固定液，分離復(fù)雜的，難分離的試樣檢測器分類：濃度敏感型檢測器：熱導(dǎo)檢測器TCD、電子捕獲檢測器ECD質(zhì)量敏感型

27、檢測器：氫火焰原子檢測器FID、火焰光度檢測器FPD靈敏度：又稱為響應(yīng)或應(yīng)答值，是用來評價檢測器質(zhì)量，或比較不同類型檢測器性能的要指 標(biāo)。檢測限：或稱敏感度，指某組分的峰高恰為基線噪聲的2倍時，單位體積載氣中所含該組分 的量。在相同靈敏度條件下，儀器噪聲越小，檢測限越小，檢測器的性能越好。線性范圍：線性范圍虎寬越好。FID：（利用含碳有機(jī)物在火焰中燃燒產(chǎn)生離子，在外加的電場作用下，使離子形成離子流， 根據(jù)離子流產(chǎn)生的電信號強(qiáng)度，檢測被色譜柱分離出的組分）一般只能測定含碳有機(jī)化合 物。多用氮?dú)庾鬏d氣，氫氣作燃?xì)?，空氣作助燃?xì)?。ECD：原理：（1）放射源的6射線將載氣（N2或Ar）電離，產(chǎn)生次級電

28、子和正離子，在電 場作用下，電子向正極移動，形成恒定基流。（2） 當(dāng)載氣帶有電負(fù)性組分進(jìn)入檢測器時，電負(fù)性組分就能捕獲這些低能量的 自由電子，形成穩(wěn)定的負(fù)離子，負(fù)離子再與載氣正離子復(fù)合成中性化合物， 使基流降低而產(chǎn)生負(fù)信號一一倒峰。信號的大小與組分的濃度成正比。（常用氮?dú)庾鬏d氣）分離度方程：分離度與柱效能、柱選擇性及柱容量的關(guān)系2、增加n，通過改變峰的寬度而改善分離度，3、增加ris，改善分離度，影響峰間距，但峰的寬度不變。在氣相色譜中，選擇分離條件的基本原則是在較短的分析時間內(nèi)，將試樣中各組分彼此分離 精品！呱穴嗨響兩峰間距要求分離度足夠大）。要以Van Deemter方程和分離度方程為指導(dǎo)

29、來選擇分離條件。一般分離條件主要指載氣、色譜柱、溫度以及進(jìn)樣操作。載氣：在低流速時（0u最佳）時，宜選用分子量較大的載氣（氮?dú)猓瑲鍤猓?在高流速時（u最佳）時，選用分子量較小的載氣（氫氣，氦氣）溫度：1、汽化室溫度：一般控制在等于或稍高于試樣組分沸點(diǎn)2、檢測室溫度：一般可高于柱溫3050度或等于汽化室溫度3、柱室溫度及控制方式：選擇的基本原則是使難分離的組分在符合分離度要求的前提下， 盡可能采用較低柱溫，但以保留時間適宜及不拖尾為宜。柱溫的控制方式有恒溫與程序升溫兩種。恒溫是指在某一恒定溫度下操作，適合于組分 少且沸點(diǎn)相近的試樣，而對于組分較復(fù)雜、沸程寬試樣需采取程序升溫的方法。程序升 溫是指

30、在某一初溫維持一定時間，然后按一定速率升溫，升至終溫后再維持一定時間， 每一次升溫稱為一階。進(jìn)樣：實際工作時在檢測器靈敏度足夠的前提下，盡量減小進(jìn)樣量，并進(jìn)樣速度要快。定性分析 主要依據(jù)每個組分的保留值來定性（tR,ris） 定量分析 依據(jù)：在一定操作條件下，檢測器產(chǎn)生的響應(yīng)信號（峰面積或峰高）與被測組分的量呈正比。1、歸一化法前提：試樣中所有組分都產(chǎn)生信號并能流出色譜柱，彼此分離 依據(jù)：組分含量與峰面積成正比 fA fX % = /i x 100% =Lx 100%i Z AfAf + . + Af + + A fi i1 1i in n（對于同系物，f可消去）即X % = -A x100%

31、 =Ax100%i Z AA + + A + + A2、外標(biāo)法 1用組分的純品為對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和試樣中待測組分的響應(yīng)信號相比較進(jìn)行定量的方 法。外標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)：簡便，不用校正因子，不必加內(nèi)標(biāo)物只需待測組分出峰。外標(biāo)法的缺點(diǎn)：結(jié)果的準(zhǔn)確度與進(jìn)樣量的重復(fù)性和操作條件的穩(wěn)定性有關(guān)。3、內(nèi)標(biāo)法以一定量的純物質(zhì)（內(nèi)標(biāo)物），加入到準(zhǔn)確稱定的試樣中再進(jìn)樣分析，根據(jù)試樣和內(nèi)標(biāo)物的 質(zhì)量及峰面積和相對校正因子，求出某組分的百分含量。n X % = m x 100% = AJ- -m x 100%i mA f m（可以看看薄的那本復(fù)印本的206頁的計算題幫助理解）優(yōu)點(diǎn)：1、只需內(nèi)標(biāo)物及目標(biāo)組分出峰；2、操作條

32、件變化而引起的誤差小3、適合于復(fù)雜樣品和微量組分的定量分析缺點(diǎn)：1、內(nèi)標(biāo)物選擇難2、需要準(zhǔn)確計量樣品和內(nèi)標(biāo)的量內(nèi)標(biāo)物的選擇：（1）試樣中不存在的純物質(zhì)，與樣品中的組分完全分離；（2）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)與待測組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相近（3）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)為純物質(zhì)或含量已知（4）內(nèi)標(biāo)物與樣品互溶，不發(fā)生不可逆化學(xué)反應(yīng)內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法：先將待測組分的純物質(zhì)配成不同濃度的系列的系列標(biāo)準(zhǔn)試樣，分別加入等量的內(nèi)標(biāo)物，進(jìn)樣分析，測得Ai和As,以Ai/As對Xi作圖得到一直線即內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法。液質(zhì)聯(lián)用APCI （大氣壓化學(xué)電離）和ESI （電噴霧電離）的不同點(diǎn)（主要看一下應(yīng)用范圍）離子產(chǎn)生的方式-APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。-ESI利用離