廣西不同產(chǎn)地華南忍冬中綠原酸含量測定

1、廣西不同產(chǎn)地華南忍冬中綠原酸含量測定【摘要】目的測定廣西不同產(chǎn)地華南忍冬中綠原酸含量,評價(jià)華南忍冬藥材質(zhì)量。方法采用高效液相色譜法,angilentds18(4.6150,5)柱,以乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液為流動(dòng)相,梯度洗脫,三相的比例020in為7588,25in為131374；流速為0.5l/in；檢測波長為327n；柱溫為30。結(jié)果廣西不同產(chǎn)地華南忍冬中綠原酸含量范圍為2.21%3.94%。結(jié)論廣西不同產(chǎn)地華南忍冬中綠原酸含量存在一定的差異,但均已到達(dá)?中華人民共和國藥典?的要求?！娟P(guān)鍵詞】華南忍冬；綠原酸；高效液相色譜法；含量測定abstrat：bjetivetdeterinet

2、hententfhlrgeniaidinfrutuslnieranfusad(fld)frdifferentplaesinguangxibyhpl,andevaluateitsinternalquality.ethdshplseparatinasperfrednaagilent18analytiallun(4.6150,5)bygradientelutingithaetnitrile-ethanl-0.05%phsphriaidattheflratef0.5l/in.thelunteperatureas30andtheuvdetetinavelengthas327n.resultsthehlr

3、geniaidntentffldfrdifferentplaesinguangxirangedfr2.21%t3.94%.nlusinthehlrgeniaidntentsffldfrdifferentplaesinguangxiaredifferent,butallftheareuptthestandardfphaarpeiafthepeplesrepublifhina.keyrds：frutuslnieranfusad；hlrgeniaid；hpl；ntentdeterinatin華南忍冬為山銀花的一種,系忍冬科忍冬屬植物華南忍冬lnieranfusad.的枯燥花蕾,具有清熱解毒之成效,同

4、時(shí)還是重要的化工原料和優(yōu)良飲品原料。2000年版及其之前的?中華人民共和國藥典?將華南忍冬當(dāng)作山銀花使用,2022年版?中華人民共和國藥典?將華南忍冬定為山銀花3種來源植物之一1。1儀器與試藥安捷倫agilent1100高效液相色譜儀；g-16高速微量離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠)；sb3200t超聲波清洗儀(上海能信超聲)；illipresipliity-185超純水儀(美國密里博公司)；bp211d電子分析天平(德國賽多利斯)；agilent8453紫外分析儀(美國安捷倫科技公司)。綠原酸對照品(由中國藥品生物制品檢定所提供,批號(hào)110753-202213)；實(shí)驗(yàn)用10批樣品均經(jīng)廣西中醫(yī)藥研究

5、所副研究員方鼎鑒定為忍冬科植物華南忍冬lnieranfusad.的枯燥花蕾或帶初開的花。甲醇、乙腈(天津四友生物醫(yī)學(xué)技術(shù),色譜純)、乙醇(北京化工廠,分析純)、磷酸中國醫(yī)藥(集團(tuán))上?；瘜W(xué)試劑公司,分析純,其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1對照品溶液的制備取綠原酸對照品3g,精細(xì)稱量,置10l容量瓶中,加70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,得到濃度為0.3g/l的溶液,備用。2.2供試品溶液的制備精細(xì)稱定華南忍冬藥材粉末0.1g,精細(xì)參加70%乙醇50l,超聲提取30in,所得溶液趁熱離心15in,取上清液即可。2.3色譜條件色譜柱為agilent18柱(1504.6,5)；流動(dòng)相為乙腈-甲醇-0

6、.05%磷酸,020in三相的比例為7588,25in為131374,體積流量為0.5l/in；柱溫為30；檢測波長327n；進(jìn)樣10l；理論塔板數(shù)以綠原酸計(jì)不低于1000。2.4線性關(guān)系考察精細(xì)汲取上述綠原酸對照品溶液1l,置2l容量瓶中,加70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,得濃度為0.15g/l對照品溶液。按此方法分別制得濃度為0.075、0.0375、0.0187g/l的對照品溶液,按上述色譜條件分別進(jìn)樣測定。以峰面積積分值為縱坐標(biāo),綠原酸的濃度(g/l)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為：y71290.5169x159.97853,r0.9998,結(jié)果說明在0.18703.00g范圍內(nèi)線性

7、關(guān)系良好。2.5精細(xì)度試驗(yàn)精細(xì)量取上述同一供試品溶液10l,重復(fù)進(jìn)樣6次,按上述色譜條件測定,綠原酸峰面積積分值的rsd0.50%。2.6重復(fù)性試驗(yàn)分別取同一批樣品各6份,按“2.2項(xiàng)下方法制備并進(jìn)展測定,結(jié)果綠原酸的平均含量為3.30%,rsd1.05%。2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液,按上述色譜條件,分別在0、2、4、8、16、24h不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)展檢測,考察樣品溶液的穩(wěn)定性。結(jié)果說明,綠原酸的rsd1.06%,說明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。2.8加樣回收率試驗(yàn)取含量的樣品0.05g,精細(xì)稱定,分別精細(xì)參加綠原酸對照品溶液(1.096g/l)1l,按照“2.2項(xiàng)下方法制備,依次測定,計(jì)算

8、回收率。結(jié)果見表1。表1加樣回收率測定結(jié)果略2.9樣品測定取10批廣西不同產(chǎn)地的樣品,按上述測定方法進(jìn)展測定,以外標(biāo)峰面積法計(jì)算樣品的含量。結(jié)果見圖1、表2。表2廣西不同產(chǎn)地華南忍冬樣品中綠原酸含量測定結(jié)果略3討論2022年版?中華人民共和國藥典?中,山銀花的含量測定使用乙腈-0.4%磷酸溶液(892)作為流動(dòng)相；而在試驗(yàn)過程中,反復(fù)使用此條件都不能使樣品有很好的別離結(jié)果,后采用甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液三相作為流動(dòng)相,采用梯度洗脫的方法,使樣品中綠原酸峰以及其它峰得到很好的別離。廣西華南忍冬的產(chǎn)地主要分布在廣西的上思縣、橫縣、邕寧縣等地,多為野生零散分布,但其主要有效成分綠原酸含量均已到達(dá)?中華人民共和國藥典?要求,如能按照gap標(biāo)準(zhǔn)種植、集中管理,藥材質(zhì)量可能會(huì)得到更大的提升。由于不同的生長條件,廣西不同產(chǎn)地的山銀花華南忍冬主要有效成分綠原酸含量存在一定的差異。研